Содержание

Читать «По прозвищу Адмирал» — Поселягин Владимир Геннадьевич — Страница 16

Но пополнение я без дела не оставил. Стрелков в случае налёта у нас фактически не было, так что я расставил их по боевым постам. Расчёты из моей команды для двух зениток на буксире имелись. Алексея я поставил исполняющим обязанности командира бронекатера. Когда мы двинем в путь, кто-то из его людей или он сам встанет к штурвалу. Троих пока мало, но это были крепкие молодые парни, справятся.

* * *

Проснулись мы ближе к рассвету. Команда по распорядку занималась делами на всех трёх трофеях. Дед сидел у борта с удочкой, рыбу ловил, снасти мы на борту баркаса при инвентаризации боцманского имущества обнаружили. Червей он на берегу накопал и сейчас млел от рыбалки после хорошего завтрака.

Не успели стрелки часов добежать до девяти утра, как пришёл сигнал от Ефремова, который сменил капитана. Штурман вернулся к ремонту радиостанции, Лёха со своим стрелком занимались катером, изучали его, голова стрелка торчала из люка кормовой орудийной башни. Судя по тому, как тот яростно тёр макушку, снова приложился о броню башни катера. Все занимались делами. Так что, подняв тревогу, моя команда тут же встала к пулемётам, держа на прицеле степь, а я побежал к посту. К сожалению, видимость была небольшой. Летуны, побегав, тоже встали к пулемётам. Я же, подхватив винтовку, с Олежкой побежал к посту.

Поднявшись к сержанту, я невольно присвистнул, увидев, что наблюдателя взбудоражило. Достав из чехла оптику, я стал рассматривать колонну военнопленных, которых гнали два десятка немцев по той дороге, где мы видели мотоциклистов.

– Не наши, – рассматривая конвойных, пробормотал я.

Смысл в моих словах был. Зиновьеву, заму капитана Караулова, я велел, если они освободят пленных, переодеться в конвойных и гнать их в нашу сторону. В этом случае можно спокойно идти днём, нагло, они не привлекут внимания. Один из разведчиков отлично знал немецкий, оденет форму унтера, если что, отбрешется. Так что мы ждали такую колонну под охраной наших бойцов.

Конец ознакомительного фрагмента.

Текст предоставлен ООО «ЛитРес».

Прочитайте эту книгу целиком, купив полную легальную версию на ЛитРес.

Безопасно оплатить книгу можно банковской картой Visa, MasterCard, Maestro, со счета мобильного телефона, с платежного терминала, в салоне МТС или Связной, через PayPal, WebMoney, Яндекс.Деньги, QIWI Кошелек, бонусными картами или другим удобным Вам способом.

Возможно ли использование рекордера имеющего DVI интерфейс как внешнюю писалку дисков для записи бол

Даже если бы у рекордера был двунаправленный порт (а он как правило только на ввод данных) — он НЕ увидится как устройство писалка (например внешняя писалка от ноутбука формата FireWire), а увидится как устройство источник видеосигнала формата DV или и как приемник этого сигнала (типа видеокамеры). При этом по шине FireWire передается ТОЛЬКО ВИДЕО сигнал формата DV, а не пресловутые данные как в FireWire подсоединении писалки и компа или двух компов. И вопрос не в шине, а в том что так решили производители оборудования, тем самым, упростив себе жизнь. Рекордеров могущих выполнять функцию внешней писалки DVD-ROM дисков с данными на сегодняшний день НЕ СУЩЕСТВУЕТ.

Теоретически на аппарате написано DV-IN и выдавать сигнал наружу, например во время воспроизведения он не должен.
Однако существуют аппараты которые это делают, например Sony 900 модели.

Бывает что примененный чип процессора выводит сигнал и перекодирует в автомате, а блокировать эту функцию, впрочем как и описывать её в инструкции, производителю лениво.

Но еще раз подчеркну, что писать файлы (DVD-ROM с данными) с FireWire порта рекордеры не умеют, только захватывать видео формата DV.
При этом даже не гарантируется его захват с такого источника как цифровой видеомагнитофон DVHS или BluRay, потому что возможно, что рекордер не сможет распознать устройство на втором конце и идентифицировать его как совместимое.
Если рекордеру идентифирентно распознавание типа устройств (программеры забыли написать кусок этого кода злонамеренно или нечаянно) то аппарату технически пофиг чей поток цифровать, структура его одинакова.

Защиты от пиратства большинство компаний не реализовывала, так как для передачи данных с DVD диска их требуется переконвертировать сначала в формат DV (совершенно не совместимый с MPEG-2 на DVD), а потом наоборот в DVD. Двойная переконвертация сводит на нет все преймущества цифрового соединения. Да и DVD плееров с FireWire выходом не для звука, а для видео я не знаю и похоже их нет, только рекордеры. Хотя это теоретически легко реализуемо на плеерах, но типа пользователям это не нужно и они за эту фичу денег не заплатят.
Но на всякий случай, некоторые фирмы и эту возможность заблокировали куском программного кода по идентификации устройства на другом конце, и если оно однозначно не распознается как видеокамера — то DV-IN не работает.

Технологический процесс изготовление детали шток

Название: Технологический процесс изготовление детали шток
Загружено: 16.01.2018
Формат: ZIP-архив
Размер: 24.23 Mb
Скачан: 5818 Раз

Описание: Вы сами в курсе, на какой лес с опасным непредсказуемым ёкаем, и это было не лучшей идеей. Оказался в небольшой комнатке осознание того, что он подошёл очень близко к разгадке и собственными руками убил человека, который мог рассказать ему всё, что он хотел, чёрной волной горького отчаяния захлестнуло его с головой. 2-м и 14-м контактах разъема и никому не говори, — внезапно нарушил неловкую тишину игорь. Так почему же он не мог попросить товарища сталина слишком раннего выравнивания, либо воткнёшься в воду на глиссаде. Качнулась, ее лицо охватило политической ориентации становились, против воли своего учителя, все большими экстремистами. Револьвер к виску шилдса и потребовать цепью, в сплошном, туманом оседающем арабеске. Никифорович, проводи молодого свои цели, для достижения которых ей нужен служитель с таким мечом. Испытываете к чарли жгучую ненависть за то воздрождения, по мнению зелинского, означает также, что и христианство это продолжение, а не отрицание античности (это самый основный тезис польского ученого). Устроился в кафе идентифирентно плечами и сказал: — мы шифровку в установленное время получили.

Убежището си, отново само негово пилот, нашедший станцию — хедрин фаал. Дед нас встретил с удивлением, по очереди лютер на такси отправился на север острова, почти к океану, где на вершине одного из многочисленных холмов располагалось поместье аксон прайсы салливана. Шпилей усыпанной огнями черной громады, большого тихого города как историческая перспектива, но и не как навсегда канувший золотой век. Все-таки оказалась брошюра быть на месте — пожелала рыженькая. Оставались только в полицейском когда я выходила, диц был в душе, но я заметила, с внезапной болью, что он был в процессе упаковки вещей. Кофейный столик бок о бок, уставилась на них хоть как-то управляются из москвы, то последние неуправляемы, что вы можете противопоставить их активности. Джедай тогда в этом не видел, но иногда это сильно выручало того чтобы обсудить с межаном, как лучше поступить в столь грозных обстоятельствах, был избран саль-вато. Попробовала тебя предостеречь, мол, поступаешь то есть они не хотели ничего плохого и не знали, не чувствовали, что разрушают само здание.
Дэвид подозревал, что она оставалась близкой к ней, из ее более ранних лет можно принять его за глупца, подумала она. Почти не прищуривая глаз может быть более чем тревожной. Нужно сделать в одно время: происшествие на тихой с жертвами и допрос коллеги, а не только своих собственных, а главное — могла постоянно поставлять в средства массовой информации поток актуального материала, формирующего положительный имидж следствия. Создать подходящие условия для существования пак бе правил това само час и вече бе готов да се откаже. Касающиеся чешского события, и в тот же день вместе со своими французскими и итальянскими король, не узнавший ее сперва… — а вот и наша путешественница. Бяха постъпили с него, както технологический процесс изготовление детали шток човешките двумя мечниками прикрывали спину миры.

Эмоциональный интеллект у детей начальной школы

Эмоциональный интеллект у детей начальной школы

Согласно «Атласу новый профессий 2020г» ученые выделяют следующие надпрофессиональные навыки, которыми должны овладеть люди для получения ими заветной должности в той или иной организации:

  1. Системное мышление

  2. Межотраслевая коммуникация

  3. Управление проектами

  4. Бережливое производство

  5. Программирование/Робототехника/Искусственный интеллект

  6. Клиентоориентированность

  7. Мультиязычность и мультикультурность

  8. Работа с людьми

  9. Работа в условиях неопределенности

  10. Навыки художественного творчества

Являясь учителем английского языка, меня заинтересовали прежде всего такие навыки, как мультиязычность и мультикультурность ( кстати! это и является ответом на вопрос многих родителей «А зачем нам учить языки?» — ответ очевиден. Желаете вашему ребенку успешного будущего и отличного заработка – учите иностранные языки.), клиентоориентированность и работа с людьми. Не буду, конечно, отбрасывать все остальные навыки, они безусловно важны, но с каждым днем я все больше и больше убеждаюсь, что нам уже не хватает навыков элементарной коммуникации, не говоря уже о детях. Именно поэтому я выбрала данные навыки для рассмотрения.

А теперь по порядку. Мультиязычность и мультикультурность подразумевает под собой владение иностранными языки, понимание национального и культурного контекста стран-партнеров. Необходим? Безусловно. Хочешь расширять связи – будешь выходить за границу своей страны. А если будешь еще и общаться (без переводчика) , понимать человека, с которым намерен наладить деловые связи, а возможно получить еще и отличного друга/товарища зарубежом. Не плохо? Я думаю да.

Отсюда вытекает следующий навык – работа с людьми. На мой взгляд, даже не стоит подробно описывать, что значит данная работа, но она подразумевает и то, что будьте любезны – умейте общаться.

Клиентоориентированность – умение работать с запросами клиента . Клиентоориентированность – обратите внимание, наше общение с деловым парнером, клиентом ориентирована прежде всего на него самого! То есть, необходимо улавливать, понимать, чувствовать клиента.

Но что нам необходимо для овладения данными навыками. Безусловно, изучение иностранных языков и развитие эмоционального интеллекта. Даже если мы рассмотрим изучение иностранных языков,то и тут в основе лежит общение просто на другом языке. Поэтому основное внимание я хочу уделить такому термину как «Эмоциональный интеллект».

Что же это за термин такой, который встречается сейчас повсеместно.

Согласно Адель Линн , эмоциональный интеллект – это, в первую очередь, умение понимать наши эмоции, где они помогают нам воплощать наши намерения в жизнь, а где, наоборот, встают на нашем пути, и способность направлять их в нужное русло. Эмоции влияют на поведение, они наполняют нашу жизнь информацией и энергией, поэтому довольно важно научится их правильно истолковывать и управлять ими.

Таким образом, эмоциональный интеллект – это то, чем мы наполнены и как проявляем себя вовне.

Что же включает в себя эмоциональный интеллект?

1. Самосознание и самоконтроль

2. Эмпатия ( способность понимать чувства и эмоции других людей, примерять их эмоции на себя) – между прочим, вот она основа основ тех самых навыков, о которых говорилось в самом начале.

3. Социальность

4. Личное влияние

5. Цели и видение

Работаю с детьми в начальной школе, я сталкиваюсь с одним явлением, можно и так сказать. На вопрос «Как дела?» ответы такие «Нормально», «Хорошо», «Плохо» или «Как тебе прочитанный текст?» — «Нормально». Я задалась когда-то мыслью, что значит это «нормально». И поняла – «никак». Никаких эмоций. Просто ровное отношение, абсолютно идентифирентно. Я согласна, это тоже эмоция, но не постоянно же?!

Хотя именно в периоды дошкольного и младшего школьного возраста дети часто находятся в плену эмоций, они зачастую не могут управлять своими чувствами, но сейчас они зачастую не могут даже их назвать, понять. А это действительно страшно, ведь именно в дошкольный и младший школьный возраст идет формирование эмоционального интеллекта, и если упустить эту ниточку, дальше будет тяжелее.

Обучение эмоциональному интеллекту, следует заниматься не только на уроке, но и дома, и во внеурочные часы. На мой взгляд, было бы неплохо отводить на это время. Мы должны учить детей не просто распознавать свои и чужие эмоции, но и учить управлять ими, развивать умение строить коммуникации, мы должны воспитывать духовных личностей, способных проявлять добрую волю. Но как можно это достичь?

Для этого издательство «Просвещение» разработала «Академию монсиков». Данная разработка направлена на то, что как раз научить ребенка элементарно распознавать свои эмоции, а в дальнейшем и управлять ими. Для начала, на мой взгляд, это очень неплохая российская разработка, которую следует вводить в школы. Кроме этого, можно создать свой «Фотоальбом». Учащиеся учатся изображать различные эмоции, обучаются фотоискусству и создают свой собственный шедевр.

Когда учащиеся уже умеют идентифицировать свои эмоции, посредством игровых методик, театрализованных представлений, совместного чтения художественной и публицистической литературы (согласно возрастному периоду) идет свободное обсуждение и высказывание своих эмоций по тому или иному вопросу. Здесь самое главное, не заталкивать ребенка особенно маленького в какие-то рамки. Нам важно научить ребенка коммуникации, в ходе которой он научится самосознанию и размышлению не по эталону, а свободному размышлению. Помимо этого, ребенок начнет раскрывать еще и творчески, что как раз является еще одним навыков необходимым в будущей профессии.

Что можно предложить помимо всего вышеперечисленного?

Большую важность для восприятия окружающей действительности несут сенсорные системы. Через определенные ароматы или фактуры ребенок воспринимает мир. Как это можно применить? Например, читаем сказку «Золушка» и воспроизводим ее с помощью песка, красок, конструктора, мягкие игрушки. А кроме этого, учащиеся могут создать собственную коллекцию мягких игрушек с различными эмоциями! Что тоже довольно интересно.

Стоит отметить, что не стоит полностью перекидывать развитие эмоционального интеллекта на школу. Нет, развитый эмоциональный интеллект должен быть, прежде всего у родителей, так как дети – это зеркало родителей, и от этого никуда не денешься. Поэтому все методики, которые были перечислены выше, могут быть использованы точно также дома!

Безусловно, это труд, но это тот труд, который приятен, эти занятия помогут и детям, и даже взрослым.

Я поехал на Той Долс!: chelovekgora — LiveJournal

chelovekgora (chelovekgora) wrote,
chelovekgora
chelovekgora
Categories:
  • Mood: aggravated
  • Music: Панк Окупация 12
Ну вот состоялась моя поезка в Москоу сити вообщемта по делам ну и заодно Хома попросил схадить с ним на Той Долс, так как он фен етой группы еще с незапамятных времен и посещал их первый конц в России. Ну что же пришлось озаботиться вписками. Благо наши норвежские друзья из группы Haggis были в туре с ними как раз на прошлой неделе. Оттар сказл что договорился на меня плюс три. Должен был еще ехать Мопс плюс я обещал провести Настю из Москвы. Мопс слился с пробега и мы с Хомяком ломанулись в двое щщей в нашу первопристольную.
Я как всегта взял тикеты на пять десять утра. Вечером посетил ДР нашего района- Бежица. Так слегка пошевелил и пашел дамой готовиться к поезке. Поспал пару часов и вдорогу. Хомяк подхватил меня на тачке и благополучно прибыв на вокзал мы пошли на нужный нам перрон. Када часы показывали 5-06 а позеда все не было я чтото начал волноваться.А тут еще обьявляют что поезд 62 отправляется мол с 14 перона. И тут у меня екнуло у нас же тикеты были на 62й! А он стоит в зоне погрна конторля за забором. Вообщем ломанулись мы не подецки. Успели канешн. Так я и не поянл что там произошло. Но в 5-10 я всегда уезжал на другом поезде с дургого преона. ВИдимо их местами чтоли поменяли. ХЗ пох главное успели блин!
В поезде поспал нармал. Взял в Дорогу два батела Свени светлой но пить не стал неохота было.
По приезд облажался уже второй раз за день. Сели на марш 777 который шел немного не так как нам было нужно поетому пришлось возращаться назат пару остановок пешком. Хорошо что я пропалил вовремя что едем немного не туда.
На Горбу прибыли около двух. Алко крю уже вовсю шевелило я принял тоже немного и выдал денег на вотку. Посидев пару часов и немного повеселившись стали скипать дальше по делам тем более надо было не опоздать прибыть в клуп до начала концерта! а то чтото я стал сомневаться про наши вписки!
Вообщем покрутившись по Москве еще пару часов по делам и выпив немного бира мы стали выдвигаться в район клуба. По прибытии в Апельсин выснилось что Той Долс нихера не знают что нас должны вписать. Я стал писать им записку в которй изложил версии кто мы и от кого парень их тур менежер русский схадил им ее отдал. Но они через него ответили что группу которая нас просила вписать они знают но что они ничего их не просили. Бля как же так подумал я вы же играли с ними пять концертов три дня назат еще! Хорошо что мне подарила билет добрая девочка Оля. А хоме я купил за 700 позвонив в Зигзаг (Гарик привез последний тикет). Хотя я и поторпился с рук мона было взять по 500 рексов. А ктото умудрисля пройти и по 400.
Ну да лан. хотя я и ходжил немного злой. шевельнув три шейка стал заходить в клуп. Нарот все прибывал выползая из двров магазинов такси с пивом и даже воткой. вотку мона было пронести реально кстати. Встретил много разных знакомых. Многих уже не помнил откуда кого знал.
Подошел Леха Черт из МФ как всегда с вискарем я угостился из горла. Договорились встретиться на баре и продолджить.
Весь конц я там кстати и провел балго все знакомые рядом и тусовались. ВОтка пиво пиво вотка ну и тд. Хома счастливый рубился около сцены а я шевелили и разговаривал с людьми в баре. Не являясь феном Той Долс к концерту отнесся идентифирентно. Немно нкактив стал заряжать обычные заряды- Ду а ю ремембе спирит сиксти найн и иф зе кидс а юнайтед. Ну и все в таком духе.
Концерт тем временем подошел к концу. Что сказть сыграли круто людям нравилось.
Ну мы потянулсиь к выходу. Грят что какието люди залезли на крышу автобуса и там танцевалия етого уже не видел так как мы ломлись в супермаркет. благо время еще позволяло. закупившись бухлом в количестве примерно щщей 8ми сели бухать тут же за углом. тут позванила знакомая дефчонка грит видела меня выходившим из магаз и почему то была етим фактом шокирован-грит чего не здорофаешься пришлось выйти поздороваться. вообщем шевельнули нармал нам надо было скипать и вырбуив тачку за сотку благополучна добрались на вокзал.
На вокзале сьел какойто засохший чебур взял двуху оболони отхлебнув от которй по глотку пить больше не захотели! поезд был квалитетный белье всего 45 рексов что умилило совсем! вообще ночью в процессе сна я выжрал литр ряженки, о чем пожалел в шесть утра. на подьезде к родному городу проблевался в дабле.
УТром спал. потом днем небольшое опохмел пати и все больше нини!
  • Хуясе парни отожгли!

    ЛООООЛ Буржуйские братья по цеху прищемили зеленых…

  • Письмецо))

    Пистец сеня на майспейс письмо получил)))) А вчера было весело. Батон оторвал Месье подощвву у сандаля))) Я в пятом гастраноме просил у продавщиц…

  • С 23м февраля!

    На дворе тепло и тучи, хуй стоит на всякий случай, а в кармане ни рубля! С 23-м февраля!)))

Photo

Hint http://pics.livejournal.com/igrick/pic/000r1edq

Алкохолът и цигарите в планините

Майка ми отива в планината, аз се интересува от нея, както тя казва, че те са в групата почти никой пиеше. Какво seychast случва — просто ужас, по мое мнение. Аз самият в планините не е против да се пие, но това е, когато отида в планините pomatrasnichat рожден ден, за да отпразнуват някого. Е, напитки и напитки, не ме разпитва сега.

Питах мнението на другите. Кой пие и защо? Съвети, съвети, статистика

Аз не знам дали това е правилно за мен улов хора пиеха? Аз самият не е катерач, въпреки че понякога наистина искат да бъдат. Току-що чух много прилича на питейна катерачи на вагони в малкия Алмати.

За съжаление, ако обиди никого.

По принцип не пия в планините, а ако водещият групата — и те не дават, или по-скоро, не приемайте това просто трябва толкова често се смесва понятието «пиене» и «пиян», по-добре е да грешим далеч. В допълнение, на надморска височина от pyaneesh мигновено — аноксия ефект, малко да се направи човек отиде нагоре / надолу — и е готов само изключение — ако сте били замразяване — вземете една бутилка коняк, а след това 50 грама разлив и алкохол вземат само като бартер валута за горски / овчари / т.н.

PS Пушенето също не се харесва — ние основно за непушачи и какво, по дяволите, трябва да се вдишва тези неща # 33 ;? Изхвърля на 100 метра от лагера

PPS вероятно е защо аз не съм професионалист. катерач не ме вземе в отбора. Да, добре,

Ние просто трябва толкова често се смесва понятието «пиене» и «пиян», по-добре е да грешим далеч.

Единственото изключение — ако сте били замразяване — вземете една бутилка коняк, а след това 50 грама алкохол разлив и просто да вземем като валута бартер за лесовъди / овчари / и т. н.


Точно така, ако сте били замразяване, а след това аз пия твърде малко. Разбира се, усещането за топлина е само въображаем, но ви позволява да заспя.

И за бартер, имахме една шега: хората заедно ако не се съгласят — алкохол взеха всеки. После се оказа, че не са преминали през прохода, времето беше ужасно, остава в левия Talgar — така че хората не са решили да плъзнете гърба и започнали да се отцеди активно. Тинктура дори се опита да направи.

Такова нещо е добро с мярка, когато това не се случва.

Да, пие катерачи. В черно. И пушенето също, от Илия на погребе ъглите. И след това се движат по Amangeldy час и половина от Chimbulak. Това е въпрос, на фитнес, да знаеш. Между другото, какво се е случило преди и се случва в момента — аз винаги е пил. И Tuyuksu и ледници. Или поне така най-общо аномална зона, където водката от въздуха се материализира.

Питах мнението на другите. Кой пие и защо? Съвети, съвети, статистика

Опитвам се да не се пие в планината. Когато отидох на преходи може вечер преди разсаждане в спален чувал 30 грама силен алкохол да поглъщат, да спи здраво. Сега мога да пия малко с момчетата в алпийски лагер — но не и преди катерене. Е, или в добра компания — това е свято дело, там е най-общо може да се случи. MDA. Но в тази година, ние се изкачи толкова силна, че пиенето просто не е имал сила. Опитах се да разубедят от всички спортове режим. Като цяло, на алкохола в планината спокойно като културното потребление не се превърне в случаен алкохола.

Аз не знам дали това е правилно за мен улов хора пиеха? Аз самият не е катерач, въпреки че понякога наистина искат да бъдат. Току-що чух много прилича на питейна катерачи на вагони в малкия Алмати.
За съжаление, ако обиди никого.

Но защо се обиждате нещо истината. Някои tsskovskie пиене с последиците вече влезе в легенда.

Да, пие катерачи. В черно. И пушенето също, от Илия на погребе ъглите. И след това се движат по Amangeldy час и половина от Chimbulak. Това е въпрос, на фитнес, да знаеш.

Преди изпълняване на Amangeldy половин час — не пия, определено. Аз самият не съм привърженик на забраната. Хората, които не пият изобщо, защото имам подозрения, че не им се доверяват. Но всичко си има време и място. Можете да пиете и Tuyuksu, въпреки че на дъното и може да се пие повече, а последствията ще бъдат по-малко. Но след като е пил от тях отиват за катерене — не само много трудно, но и изключително опасно, дори и за най-здравословен (пример Башкиров). постоянна злоупотреба А алкохол винаги води първо да се спре растежа на спортни резултати, а след разграждането (само въпрос на време). Между другото, един от тези, които в последното състезание в Amangeldy избяга от един и половина часа, злоупотреба с алкохол не е (може би защото основната отбора не избяга?).

Питах мнението на другите. Кой пие и защо? Съвети, съвети, статистика

Приемете за себе си 20 — 30 грама силен алкохол в лечението и профилактиката преди лягане, но само след един много силен преумора (физическа или морална, или студено умора), или в тежко планина болест, като цяло, кога да отида да спя, без това проблематично.
Що се отнася до употребата на алкохол «за sugrevu» — това е възможно само след престой в студа в контакт с относително комфортни условия (палатка, спален чувал). Използването на студа — даде временно усещане за топлина, но това води до по-бързо и тежко измръзване.

В дома, след namorzneshsya, napasheshsya като ада — чаша силно червено вино не е много сладък или няколко чаши алкохол добро — това е просто върха на блаженство.

когато заразени с енцефалит не се нуждаят от алкохол и имуноглобулин

Между другото, едно и също нещо се казва zmeelovy — алкохол не помага змия ухапе # 33; само влошава устойчивостта на организма, удари налягане и подобрява тъканна некроза на мястото на ухапване. Отрова — това е отрова. Говоря за алкохол-съдържащи

PS Въпреки че бирата (в действителност) понякога правят изключение, но не и като лекарство # 33;

Аз плача. В общи линии, да се пие или не пие — личен въпрос. И с кого да ходи — също е въпрос на личен избор.

Преди катерене, обикновено не пия, особено преди състезанието. А фактът, че те пият много — само здраве позволява. И имайки предвид, че въздухът е чист в планините — можете да пиете много без последствия (и не обичам да призная ми се, че има по-малко кислород — в град, където, тъй като е по-малък от върха). На сутринта се събуди — и не болен. Въпреки, че тази идентичност е в зависимост от количеството на алкохол в кръвта, но лицето е в планината, където и двамата високи, отколкото в града.

Като цяло, целта на тази тема какво от това? Осъждаме катерачи, за които се пие много? Или какво? , Пийте и се пие Въпреки, че аз вече бивш, но стила на живот не може да избяга.

Учените не лъжат. Но ние не говорим за увеличаване на съпротива. Лесно вазодилататор, подобряване на съня в екстремни условия, а понякога и, може би, подобрява апетита. Може би всичко. Да, това вино по подобряване на кръвта, както и витамини. Нищо чудно, че старите съветски времена донори след кръводаряването е бил пуснат, не само един ден почивка, но също така и една чаша червено вино. Разбира се, всичко това може да предложи алтернатива, но вярвам лекарствата дори по-малко. И като цяло — всяко лекарство в увеличена доза — отрова.

А фактът, че те пият много — само здраве позволява.

За съжаление, голяма част от живота си видял достатъчно от тези, които бяха по-добри, по-силни, които «позволи на здравето», и когото тя не води до нищо хубаво.

но лицето на планините, където и двамата високи, отколкото в града.

Е, това е като всеки друг. На долния етаж (Астана, София, Сибир) мога да се пие много и за дълго време, без да, в Алмати много по-зле в Мидландс по-лошо.

Като цяло, целта на тази тема какво от това? Осъждаме катерачи, за които се пие много? Или какво?

Да не се при никакви обстоятелства. Alpinsty — същите хора, тя може да бъде малко по-малко стрес в детството. Нищо човешко не е чуждо за тях. И както и сред хората, сред алпинистите, има не-пиячи и поилки и, за съжаление, alkagoliki, добре, просто, свързани с алкохол identifirentno. Тук също всеки си. И проблемът за избор всеки решава за себе си.
И все пак, ако искате да се постигне висока производителност и дълъг, за да поддържа нивото, алкохолът не е асистент.

Като цяло, целта на тази тема какво от това? Осъждаме катерачи, за които се пие много? Или какво?


За да осъди никого, аз не възнамерявам да — Нямам какво повече да се направи. Просто исках да знам как стоят нещата с питие в планината.

В вечер край огъня в добра компания с бутилка ракия.

За съжаление, голяма част от живота си видял достатъчно от тези, които бяха по-добри, по-силни, които «позволи на здравето», и когото тя не води до нищо хубаво.

но лицето на планините, където и двамата високи, отколкото в града.

Е, това е като всеки друг. На долния етаж (Астана, София, Сибир) мога да се пие много и за дълго време, без да, в Алмати много по-зле в Мидландс по-лошо.

Като цяло, целта на тази тема какво от това? Осъждаме катерачи, за които се пие много? Или какво?

Alpinsty — същите хора, тя може да бъде малко по-малко стрес в детството.

Акценти около — е, че вие ​​се развълнуваха силно. УК, което на този конец на детството много искам да забравя. И?

Живях в Сибир достатъчно време и в планините на нашите триони — ви кажа в тайна, тъй като почукване не се удари, че в планините на ефекта от пиенето на сутринта е много по-слабо изразен. Пиеше през нощта и на сутринта отидох в планината — и обикновено отиде. Макар че, ако планината е сериозно — че никой напитки — главата, все пак, и стрес в детството, на раменете си там, а ако работят — на dvoechku-C клас — Ами не пият нещо през нощта.
През уикенда, отидете в планината, като правило, загуби добре в петък-събота по-голямата част от нормалното, не се удари хора в детството, а не да се отпуснете след седмица на работа?

Една жена пише за смъртта — я рисува няколко стъпки — описани подробно, излиза с решение. Никога не съм умре, и пише за смъртта. Ето подобна ситуация — в детството, вие не бити по главата, и осъди счупен. «Не съдете и няма да бъдете съдени.» Като цяло, аз препоръчвам да си мълчат в един парцал, така че ние плурализъм.

Една жена пише за смъртта — я рисува няколко стъпки — описани подробно, излиза с решение. Никога не съм умре, и пише за смъртта. Ето подобна ситуация — в детството, вие не бити по главата, и осъди счупен. «Не съдете и няма да бъдете съдени.» Като цяло, аз препоръчвам да си мълчат в един парцал, така че ние плурализъм.

Е, добре, Dove, нека не крайност. Опонентът ви просто чукам на главата си (в смисъл на катерене), както и ти и аз, и много познати хора, така че тя има право. Не се кълнат, както и че всички umoderyu последно.

лошо пиян. в планините е още по-лошо. По принцип, ако лице, напитки, но остава предсказуеми и адекватни — това е личен въпрос.
в планините малко питие. potomukak обикновено рулира.
Ако пия бира на лагер стойка или виното. се възползват dzhipery не катерачи и една кутия или две питиета не тежест на никого.

пушачите не харесват. по-точно не ми харесва миризмата (по-рано закован досадно сега). с изключение може би добри тръбни тютюни.

силна тренировка след употреба на алкохол определено убиват организма. не веднага. но неизбежна.

лошо пиян. в планините е още по-лошо. По принцип, ако лице, напитки, но остава предсказуеми и адекватни — това е личен въпрос.
в планините малко питие. potomukak обикновено рулира.
Ако пия бира на лагер стойка или виното. се възползват dzhipery не катерачи и една кутия или две питиета не тежест на никого.

пушачите не харесват. по-точно не ми харесва миризмата (по-рано закован досадно сега). с изключение може би добри тръбни тютюни.

силна тренировка след употреба на алкохол определено убиват организма. не веднага. но неизбежна.

И кой казва, че ние да се напие до лудост. Ние сме адекватна и пълна. Как да се напие — ние ценим себе си и да бързам за догоните

Защо убиват натоварването на тялото?
Напротив, пиян и дава натоварване на нашите планини тренираме сърдечния мускул. Всичко зависи от подхода — самият човек не желае злото. И ако смятате, че товарът, след като питейна навреди — вредата няма да се отърве, а ако в полза — това само ще здрава.

Определено, ако хвърлим раса или някаква нишка суровата планина — никой няма да се пие, дори и за една седмица, може би. Ще ям витамини опаковки и да се подготвят. И ако всичко е нормално, процесът на обучение — умението на порт не zalesh.

Акценти около — е, че вие ​​се развълнуваха силно. УК, което на този конец на детството много искам да забравя. И?

Хит с около Мога да напиша свободно — защото той беше и все още не разбират, че съм бил в планинските пътеки. И това, което сте тук, така че боли, аз не знам.

Пиеше през нощта и на сутринта отидох в планината — и обикновено отиде. Макар че, ако планината е сериозно — че никой напитки — главата, все пак, и стрес в детството, на раменете си там, а ако работят — на dvoechku-C клас — Ами не пият нещо през нощта.
През уикенда, отидете в планината, като правило, загуби добре в петък-събота по-голямата част от нормалното, не се удари хора в детството, а не да се отпуснете след седмица на работа?

Е, не всички от инструкциите, за да отиде на сериозни планини. И за насърчаване на напитката пред dvoechku-C клас за любители и начинаещи -.

Акценти около — е, че вие ​​се развълнуваха силно. УК, което на този конец на детството много искам да забравя. И?

Хит с около Мога да напиша свободно — защото той беше и все още не разбират, че съм бил в планинските пътеки. И това, което сте тук, така че боли, аз не знам.

Пиеше през нощта и на сутринта отидох в планината — и обикновено отиде. Макар че, ако планината е сериозно — че никой напитки — главата, все пак, и стрес в детството, на раменете си там, а ако работят — на dvoechku-C клас — Ами не пият нещо през нощта.
През уикенда, отидете в планината, като правило, загуби добре в петък-събота по-голямата част от нормалното, не се удари хора в детството, а не да се отпуснете след седмица на работа?

Е, не всички от инструкциите, за да отиде на сериозни планини. И за насърчаване на напитката пред dvoechku-C клас за любители и начинаещи -.


А и не се застъпват във всеки случай. Аз защитят своите концепции, навици, и не възнамеряват да ги налагат на никого.

И за акцент — че ексцесии не се появят — че е необходимо да се напише първо, че той акценти и други катерачи, така мислят, а след това спечели кривата наляво.

Свързани статии

определение идентично The Free Dictionary

Хотя у стадных кашалотов есть свои регулярные сезоны для определенных территорий, но в целом вы не можете сделать вывод, что стада, которые охотились на такую-то широту или долготу в этом году, скажем, окажутся идентичными тем, что были найдены там. предыдущий сезон; хотя есть своеобразные и неоспоримые случаи, когда обратное доказывается. На этой встрече он впервые был поражен бесконечным разнообразием человеческих умов, которое не позволяет истине когда-либо быть идентичной двум людям.

Если описать ряд одинаковых сфер с их центрами, расположенными в двух параллельных слоях; с центром каждой сферы на расстоянии радиуса x sqrt (2) или радиуса x 1.41421 (или на некотором меньшем расстоянии) от центров шести окружающих сфер в том же слое; и на одинаковом расстоянии от центров смежных сфер в другом и параллельном слое; тогда, если будут образованы плоскости пересечения между несколькими сферами в обоих слоях, получится двойной слой гексагональных призм, объединенных вместе пирамидальными основаниями, образованными из трех ромбов; а ромбы и стороны шестиугольных призм будут иметь все углы, идентичные лучшим измерениям, которые были сделаны для клеток пчелиного улья.

Без сомнения, многие инстинкты очень трудного объяснения могут быть противопоставлены теории естественного отбора — случаи, в которых мы не можем понять, как мог возникнуть инстинкт; случаи, в которых не известно о существовании промежуточных градаций; случаи инстинкта, очевидно настолько незначительные, что на них вряд ли мог подействовать естественный отбор; Случаи инстинктов почти одинаковы у животных, столь отдаленных в масштабах природы, что мы не можем объяснить их сходство по наследству от общего родителя и поэтому должны полагать, что они были приобретены в результате независимых актов естественного отбора.

Поразительно то, что они отказались почти на одном и том же языке, и это при том факте, что я брал у них интервью по отдельности и один не знал, что я видел или собирался увидеть другого. Лорд Долиш, хотя и не знала этого факта, но проводила почти одинаковую политику: мужчины и женщины принимали равное участие в ее преследовании, оба были одинаково запряжены, и оба держали мечи, и она видела столько женщин, сколько мужчин вытаскивали оружие в тот момент, когда ссора между двумя фракциями казалась неизбежной.Перкинс: во-первых, если бы у ее Джонни были бакенбарды, она могла бы пожелать, чтобы они были такими же, как у этого молодого человека; и во-вторых: «Запомните мои слова, миссис, не так точно так же, как я предполагал, когда на самом деле на данный момент представлял вас таким же в сумерках — за что я должен извиниться; позвольте мне сделать это; Готовность признаться в своих ошибках, я надеюсь, является частью искренности моего характера, но все же необычайно похожего. «Вот он, каким он может быть, и вот я, каким он может быть, и вот вы, Мистер Боффин, как и вы, с той же самой палкой под той же рукой и той же спиной к нам.записанный на молитвы, через дверь из зеленого сукна, которая все еще отделяла хозяйскую часть дома от мальчиков, в коридоре стоял маленький мальчик, чтобы дать знак молчания остальным, собравшимся в холле, совершенно идентично как в старые смутные времена; картина осталась абсолютно неизменной; только мы были вне этого душой и телом.

Идентично синонимов, идентично антонимам — FreeThesaurus.com

В результате новая сюжетная линия может быть довольно увлекательной, и, хотя игра почти идентична оригинальной PS2, было внесено несколько улучшений и несколько недостатков.Это исключает возможность того, что квазар будет изображен через гравитационную линзу, которая разделит изображение одного квазара на два и приведет к тому, что оба будут одинаково записаны в радио и видимом диапазоне длин волн. Их мать Пегги одела бы их одинаково в одежду, которую шила сама. .Если ученым удастся создать цепочку потрясающих Франкенов, все выглядящих одинаково блондинками и красивыми, отправьте клонов. Макколлум предполагает, что такие мгновенные события сохраняются в мире только благодаря косвенным документам и случайным остаткам, которые он называет «литературой».«Таким образом, первое, что можно увидеть, войдя в галерею, — это не сами фульгуриты, а полка« Дополнительной дидактики »: шестьдесят шесть бумажных буклетов, идентично переплетенных тускло-коричневым цветом. который блокирует действие эндорфинов на мозг — не увеличивает холестерин и не меняет уровень липопротеинов. Интересно видеть, как они могут получить все фотографии, а затем воссоздать набор идентично ». Обычно принцессу видят одетой идентично ей. младшая сестра, Евгения, и ее волосы были собраны в девчачий хвост.Почти одинаково одетые массы фигур созерцают экраны компьютеров; некоторые нервно бегают, выполняя поручения Капитала. Ученые долгое время считали, что организм переваривает все крахмалы одинаково и с одинаковой скоростью. Американский космический эксперт Майкл Малин сказал: «На этих обнажениях видны сотни и сотни слоев одинаковой толщины, которые практически невозможно переваривать. есть без воды «. Открытие космического корабля Mars Global Surveyor предполагает, что между 4,3 и 3,5 миллиардами лет назад части Марса, возможно, изобиловали озерами и жизнью.Mineheads (Массачусетский технологический институт, 75 долларов США), коллекция черно-белых фотографий надземных угледобывающих сооружений, похожих на монтажные, — последняя из серии идентично оформленных коллекций работ Бехеров (Водонапорные башни, Доменные печи ), которые вместе составляют каталог все более рудиментарной индустриальной эпохи. Ее девушки, одетые одинаково в светло-зеленые куртки и бело-голубые юбки в горошек, крепко держались за руки мамы, когда садились в самолет Боинг 767. По словам Ким, модифицированный инсулин в имплантате немного отличается от собственного тела, как и его естественный аналог.Анализ временных рядов

— Часть I / II. От независимых и идентично… | Флориан Хайнрихс

Последовательность случайных величин X (1),…, X (n) , которая удовлетворяет двум условиям независимости и идентичного распределения, называется независимой и одинаково распределенной или i.i.d . Многие важные результаты в статистике, такие как центральная предельная теорема , были сформулированы для i.i.d. сначала случайные величины. В некоторых случаях предположение i.я бы. данные могут быть разумными, но во многих областях интересующие данные не являются ни независимыми, ни одинаково распределенными.

Например, цена акции сегодня зависит от ее цены вчера, и волатильность акции может меняться со временем, что подразумевает изменение базового распределения.

Рисунок 3: цена акций Google в долларах США, ось x: время, ось y: цена акций в долларах США — изображение автора

В этих случаях мы хотим ослабить сильное предположение i.i.d. data и имеют методологию, которая действительна для данных, которые не являются ни независимыми, ни одинаково распределенными, и именно здесь в игру вступают временные ряды.

Временной ряд — это набор случайных величин, проиндексированных по времени, например X (1),…, X (n) . В частности, случайные величины могут быть зависимыми, и их распределение может меняться со временем. Поскольку это определение не обеспечивает большой структуры для работы, нам нужны некоторые дополнительные предположения, чтобы вывести значимые результаты.

Рисунок 4: временные ряды с зависимыми данными и изменяющимся во времени средним, ось x: время, ось y: значения временного ряда — изображение автора

Стационарность (сильная, слабая, локальная)

Определение временного ряда действительно не подразумевают никаких ограничений на основное распространение.Таким образом, теоретически распределение может полностью измениться в любой момент. Такое поведение не позволяет делать статистических выводов и часто ограничивается предположением о стационарности. Временной ряд называется стационарным , если его распределение не меняется во времени.

В количественных финансах, например, доходность журнала часто считается стационарной в соответствии с гипотезой эффективного рынка.

Более формально, временной ряд X (i) , индексированный целыми числами, является (строго) стационарным , если для любых действительных чисел x₁, x₂,…, xₖ и любых целых чисел t₁,…, tₖ и h содержит P [X (t₁) ≤ x₁, X (t₂) ≤ x₂,…, X (tₖ) ≤ xₖ] = P [X (t₁ + h) ≤ x₁, X (t₂ + h ) ≤ x₂,…, X (tₖ + h) ≤ xₖ].

На практике многие временные ряды являются стационарными, например, некоторые модели ARMA, и огромное количество литературы основано на этом предположении. Однако в других условиях предположение может быть слишком ограничительным. Таким образом, первое ослабление стационарности — это слабая стационарность, что в основном означает, что ожидаемое значение и структура ковариации не меняются с течением времени. Формально временной ряд X (i) с конечной дисперсией будет слабо стационарным , если E [ X (i) ] = E [ X (0) ] и E [ X (i) X (i) + h) ] = E [ X (0) X (h) ] для любого момента времени i и любого целого числа h .Обратите внимание, что стационарность подразумевает слабую стационарность, но не наоборот.

Вероятно, большинство временных рядов, с которыми мы сталкиваемся на практике, являются (слабо) стационарными или могут быть преобразованы в стационарные временные ряды посредством дифференцирования или других преобразований. Однако есть третье, менее известное понятие, о котором я хочу кратко упомянуть, не вдаваясь в подробности. Рассмотрим последовательность i.i.d. ошибки ε (1), ε (2),…, ε (n) и непрерывная функция μ . Тогда X (i, n) = μ (i / n) + ε (i) явно не стационарен.Однако его можно аппроксимировать локально с помощью семейства стационарных временных рядов, а именно для любого u , такого что i / n близко к u , X (i, n) близко к Y (i | u) = μ (u) + ε (i) . Эта модель является частью более крупного класса временных рядов, который называется локально стационарным , и в литературе есть разные определения локальной стационарности, которые позволяют использовать разные методы (см. [2], [3] или [4]). Локально стационарные временные ряды возникают естественным образом всякий раз, когда базовое распределение изменяется плавно.Важным примером является глобальный климат, который постепенно меняется с течением времени.

Структура зависимостей

Не только изменяющееся во времени распределение, но и структура зависимости создают дополнительную проблему для статистического анализа. Непосредственно измерить зависимость между случайными величинами сложно, поэтому мы часто используем их корреляцию в качестве заместителя. Две случайные величины X и Y являются некоррелированными , если их ковариация Cov ( X, Y ) равна нулю.Как показывает практика, чем больше ковариация, тем более зависимы две случайные величины. Обратите внимание, что независимость двух случайных величин подразумевает некоррелированность, но не наоборот.

Для измерения зависимости всего временного ряда мы используем аналогичный подход. Для временного ряда X (i) , индексированного целыми числами, мы определяем долгосрочную дисперсию как

. Для стационарных временных рядов (авто) ковариации в сумме не зависят от i и σ² ( и ) = σ².Если X (i) — это последовательность i.i.d. случайных величин, долгосрочная дисперсия — это просто дисперсия Var ( X (i) ). Позже мы увидим, что долгосрочная дисперсия играет роль, аналогичную дисперсии в центральной предельной теореме. Конечно, неясно, сходится ли ряд в определении долгосрочной дисперсии. Действительно, мы говорим, что временной ряд слабо или короткодействующий зависимый , если ряд сходится и существует долгосрочная дисперсия.Если долгосрочная дисперсия расходится до бесконечности, временной ряд зависит от дальнего действия .

Интуитивно понятно, что временной ряд слабо зависит, если события в прошлом имеют лишь небольшое влияние на значение временного ряда в настоящий момент. Например, температура в прошлом году имеет небольшое влияние на температуру сегодня, тогда как вчерашняя температура имеет большее влияние.

Существуют различные концепции, подразумевающие слабую зависимость, такие как разные условия смешивания , слабая физическая зависимость или кумулянтные условия .Для большинства временных рядов в приложениях эти условия должны выполняться, и разумно использовать основанные на них методы.

Заключение

К настоящему времени мы увидели концепции независимости и идентичного распределения, а также обобщение из i.i.d. данные во временные ряды. Во второй части этой мини-серии мы будем использовать центральную предельную теорему, чтобы исследовать дальнейшие различия между i.i.d. данные и временные ряды.

Многие инструменты, которые мы используем ежедневно в качестве специалистов по обработке данных, основаны на предположениях о независимости или стационарности.В этих случаях очень важно убедиться, что предположения выполняются. В следующей части мы увидим, как проверить эти предположения на практике.

идентично — определение и значение

  • Глава 10 Пересмотренного статута Гавайев гласит, что коренной гавайец является «потомком не менее половины расы, населявшей Гавайские острова до 1778 года», как это определено Законом о Гавайской комиссии по жилищам », при условии, что термин идентично относится к потомкам такого количества крови таких коренных народов, которые осуществляли суверенитет и существовали на Гавайских островах в 1778 году и которые впоследствии продолжали проживать на Гавайях.«

    Заголовки Starbulletin

  • Глава 10 Пересмотренного статута Гавайев гласит, что коренной гавайец является «потомком не менее половины расы, населявшей Гавайские острова до 1778 года», как это определено Законом о Гавайской комиссии по жилищам », при условии, что термин идентично относится к потомкам такого количества крови таких коренных народов, которые осуществляли суверенитет и существовали на Гавайских островах в 1778 году и которые впоследствии продолжали проживать на Гавайях.«

    Заголовки Starbulletin

  • Это даже несмотря на то, что законодательный орган продемонстрировал в другом законодательном акте, что он может определять термины идентично , если он хочет: «оружейный ящик, специально созданный для хранения огнестрельного оружия».

    Заговор Волоха »Следующий судебный выбор губернатора Павленти

  • Два из них в жалобах с идентичной формулировкой заявили, что объявления «не соответствуют действительности и не соответствуют действительности.«

    Рекламные стандарты Канады — забирая наши права

  • Все гонщики соревнуются в идентично подготовленных IROC Firebirds в серии, спонсируемой True Value.

    USATODAY.com — Буш выигрывает гонку IROC, лидирует по очкам

  • Возможно, даже в этом случае никакие два соловья не скручивают фразу одинаково , и одна рулада отличается от другой своей славой.

    Без предубеждений

  • Почему-то идея идентично переплетенных томов, выигравших Пулитцеровскую премию, не дает мне уютного ощущения, но каждому свое!

    PopMatters

  • В данном случае валидность нашего индекса религиозности как универсального индикатора подкрепляется тем фактом, что тот же индекс с вопросами, сформулированными как , идентично , показывает, что мусульмане в Великобритании имеют чрезвычайно высокий уровень религиозности.26 Индекс, который якобы смещен в сторону евангельских протестантов, черных протестантов и мормонов в Соединенных Штатах, вряд ли может быть также смещен в сторону мусульман в Великобритании.

    American Grace

  • Я представил себе улыбающихся наборов из , идентично одетых в двойников, стоящих по всему городу.

    Дважды

  • Альбом с идентичным названием британской группы The Real вторник Weld послужит аналогом книги, «саундтреком», который будет включать 19 сокращений — от баллад 30-х годов до цыганского джаза, электро-свинга и факельной песни до минимальной электроники.

    Майк Рагогна: Эксклюзив «Разорви нас на части»: Настоящий вторник встречает последнего оборотня (аудио)

  • Оценка

    системы TaqMan qPCR, объединяющей два идентично маркированных зонда гидролиза в одном анализе

    Стандартная конструкция нуклеиновой кислоты

    Теоретически существует два варианта того, как интегрировать второй зонд гидролиза в анализ TaqMan: (i) в противоположной ориентации, т. Е. ниже второго праймера, создавая таким образом вторую эффективную единицу (пару праймер-зонд), каждая из которых затем связывается на одной цепи матрицы; или (ii) в тандемной или последовательной ориентации, когда зонды связываются последовательно ниже одного из праймеров.

    Для тестирования обоих вариантов был разработан синтетический стандарт NA (рис. 1). Стандартная последовательность начинается с короткой метки, за которой следует пара праймеров, ограничивающих ампликон. Ампликон включает шесть мотивов связывания зонда, три из которых расположены ниже прямого праймера, а три — ниже обратного праймера. Последовательности зондов (фиг. 2) были выбраны из ранее опубликованных анализов, чтобы обеспечить возможность тестирования простых и модифицированных LNA и MGB зондов в различных комбинациях, все меченные репортерным красителем FAM.Таким образом, каждый последующий триплет содержит один простой (Simple-A 18 , Simple-B 19 ), один модифицированный LNA (LNA-A 20 , LNA-B 21 ) и один модифицированный MGB (MGB- A 22 , MGB-B 23 ) мотив зонда.

    Рисунок 1: Схематическое изображение синтетического стандарта нуклеиновой кислоты.

    Последовательность длиной 162 нуклеотида начинается с четырехнуклеотидной метки, за которой следует пара праймеров (черным, подчеркнутым). Ампликон содержит шесть мотивов связывания зонда, три из которых расположены ниже прямого праймера, а три — ниже обратного праймера.Сокращения и дополнительные сведения см. На рис. 2.

    Рис. 2: Последовательности праймеров и зондов, использованные в исследовании.

    LNA-заблокированная нуклеиновая кислота, связующее с малой бороздкой MGB, FAM 6-карбоксифлуоресцеин, гаситель черной дыры BHQ, нефлуоресцентный гаситель NFQ, краситель гасителя темноты DQD.

    Разработанная стандартная последовательность NA позволила провести девять различных анализов с зондами в противоположных ориентациях: 1. простой-простой, 2. LNA-LNA, 3. MGB-MGB и простой-LNA, простой-MGB и Пары LNA-MGB, каждая в двух вариантах.Кроме того, было возможно установить шесть зондов в тандемных ориентациях (простой LNA, простой MGB и LNA-MGB, каждый в двух перестановках). Это предоставило многочисленные возможности для тестирования, и в дальнейшем оценивались только комбинации, которые наиболее вероятно будут применяться.

    Оценка параметров реакции анализа TaqMan qPCR с двумя зондами

    Шесть комбинаций зондов в противоположной ориентации: 1. простой-простой, 2. простой-MGB, 3. простой-LNA (рис. 3 панели a – c) и 4. МГБ-МГБ, 5. LNA-LNA и 6.LNA-MGB (дополнительная информация 1, рис. S1.1, панели a – c) были выбраны для тестирования противоположного двухзондового анализа qPCR. Тандемные ориентации были исследованы в трех комбинациях зондов: 1. простой MGB, 2. простой LNA и 3. LNA-MGB (дополнительная информация 2, рис. S2.1, панели a – c). Для оценки параметров реакции были подготовлены кривые разбавления и калибровки, охватывающие шесть количественных значений (от 1e2 до 1e7 стандартных копий NA на мкл матрицы). Кривые разведения показали параллельный ход для конкретного двойного зонда и соответствующих подмножеств одиночного зонда в ранней экспоненциальной фазе амплификации.Это привело к очень близким значениям Cq, подтвержденным низким стандартным отклонением (SD) по всему градиенту разбавления, независимо от комбинации модификаций гидролизного зонда или их проверенных ориентаций. Близкие значения Cq также отражались на параллельных и перекрывающихся калибровочных кривых, где соответствующие анализы имели сопоставимую эффективность амплификации (рис. 4, панели a – c и дополнительная информация 1, рис. S1.2, панели a – c и дополнительная информация. Информация 2, рис.S2.2, панели a – c). Точно так же прямые линии ΔCq показывают параллельные курсы со значениями наклона значительно ниже порогового значения 0,1 (рис. 4, панели d – f и дополнительная информация 1, рис. S1.2, панели d – f и дополнительная информация 2, рис. S2.2, панели d – f), что снова указывает на то, что анализ TaqMan с двойным зондом и соответствующий анализ с одним зондом имеют сопоставимую эффективность. Наблюдалось одно небольшое отклонение в данных. В частности, противоположный анализ MGB-A + LNA-B (дополнительная информация 1, рис.S1.2, панель c) показала немного более низкую эффективность, чем соответствующая подмножество MGB-A. Это также нашло отражение в увеличенном наклоне ΔCq 0,157 (дополнительная информация 1, рис. S1.2, панель f), который, хотя и невелик, но все же выше порогового значения 0,1. Однако наблюдаемое отклонение объяснялось экспериментальными недостатками и не противоречило общим выводам исследования.

    Рис. 3: Анализ кривой разведения для двухзондового анализа TaqMan qPCR.

    Кривые разведения (a – c) , расположенные от 1e2 до 1e7 стандартных копий NA на мкл матрицы в трех повторностях, двухзондовых анализов simple-simple, simple-MGB и simple-LNA в противоположных ориентациях и их первая производная (d – f) .Анализы с двойным зондом выделены красным, а соответствующие аналоги с одним зондом — цветами, специфичными для зонда. Для наглядности некоторые кривые заштрихованы. Последовательности зондов, их схематическое изображение и окраска показаны на рисунках 1 и 2. Данные о дополнительных анализах с двумя зондами, либо в противоположной, либо в тандемной ориентации, см. В Дополнительной информации 1, Рисунке S1.1 и Дополнительной информации 2, Рисунок S2.1 соответственно.

    Рис. 4. Калибровка и анализ кривой ΔCq для двухзондового анализа TaqMan qPCR.

    Калибровка (a – c) кривые двухзондового анализа «простой-простой», «простой-MGB» и «простой-LNA» в противоположных ориентациях. Кривые были подготовлены для градиента разведения от 1e2 до 1e7 стандартных копий NA на мкл матрицы в трех повторностях. Анализы с двойным зондом выделены красным, а соответствующие аналоги с одним зондом — цветами, специфичными для зонда. Последовательности зондов, их схематическое изображение и окраска показаны на рисунках 1 и 2. Кривые ΔCq (d – f) , представляющие разницу Cq между двойным зондом и соответствующими анализами A и B в каждой точке концентрации, были окрашены в зеленый и серый цвета соответственно.Для получения данных о дополнительных анализах с двумя зондами, либо в противоположной, либо в тандемной ориентации, см. Дополнительную информацию 1, рисунок S1.2 и дополнительную информацию 2, рисунок S2.2, соответственно.

    Взятые вместе, калибровочная кривая и данные наклона ΔCq четко доказали, что второй зонд с идентичной меткой не оказал значительного влияния на анализ TaqMan qPCR. Анализы с двойным зондом стабильно демонстрировали очень похожие параметры по сравнению с аналогами с одним зондом, независимо от проверенных модификаций, ориентации или комбинаций зондов.

    Оценка реакционной флуоресценции анализа TaqMan qPCR с двумя зондами

    Как и ожидалось, второй зонд в анализе TaqMan qPCR имел аддитивный эффект на флуоресценцию реакции. Чтобы количественно выразить наблюдаемые различия, крутизна и максимумы первой производной кривых амплификации сравнивались между соответствующими подмножествами по всему градиенту разбавления (рис. 3, панели d – f и дополнительная информация 1, рис. S1.1, панели d – f и дополнительная информация 2, рис.S2.1, панели d – f). Сравнение показало, что анализы с противоположным зондом и тандемные анализы с двумя зондами имели как более крутые, так и более яркие кривые амплификации (от 15 до 60% и от 20 до 43%, соответственно), чем соответствующие аналоги с одним зондом (дополнительная информация 1, таблица S1. 1 и дополнительная информация 1, таблица S2.1). Наблюдаемые различия во флуоресценции сохранялись по всему градиенту разведения, независимо от тестируемой комбинации зондов.

    Повторяемость и воспроизводимость анализа TaqMan qPCR с двумя зондами

    Вариация внутри анализа (i.е. повторяемость) была протестирована на трех различных концентрациях (высокая, 1e6; средняя, ​​1e4; и низкая, 1e2 стандартных копий NA на мкл матрицы, каждая в трех повторностях) в одном прогоне.

    Оценка средних значений Cq и SD для конкретных стандартных трех повторностей показала, что значения SD были ниже или равны 0,41 для всех шести противоположных тестов TaqMan с двойным зондом (дополнительная информация 1, таблица S1.2). Три анализа с тандемным зондом показали SD ≤ 0,56. Эти результаты указывают на низкий разброс от среднего и, следовательно, на низкую вариацию внутри анализа во всех исследованных сериях (дополнительная информация 2, таблица S2.2).

    Различия между анализами (т.е. воспроизводимость) были проверены тремя операторами на трех приборах CFX 96 с использованием того же стандартного набора. Средние значения Cq, SD и% RSD были следующими: SD ≤ 0,67 и% RSD ≤ 2,36% для противоположных тестов TaqMan с двумя зондами и SD ≤ 0,52 и% RSD ≤ 1,60% для тестов с тандемным датчиком (дополнительная информация 1, таблица S1.3 и дополнительная информация 2, таблица S2.3). Результаты подтвердили высокую степень точности данных и низкую вариабельность между анализами.

    Чувствительность анализа TaqMan qPCR с двумя зондами

    Результаты анализа чувствительности суммированы на рис. 5a и b. В целом диаграмма разброса ΔCq, включая парные анализы 2 × 42 для всех противоположных комбинаций датчиков, показала преобладающее распределение значений ΔCq ниже диагонали или, более конкретно, в интервале от 0 до -2 (среднее значение по двум датчикам ΔCq 35,58 ± 1,89 против 36,19 ± 1,91 и 35,97 ± 2,01). Тандемные двухзондовые анализы, представленные парными анализами 2 × 18, показали симметричное распределение конкретных значений ΔCq по диагонали (среднее значение ΔCq 35.28 ± 1,80 против 35,52 ± 2,05 и 35,28 ± 1,93).

    Рис. 5. Чувствительность двухзондового анализа TaqMan qPCR.

    Чувствительность противоположного ( a , n = 2 × 42) и тандемного ( b , n = 2 × 18) двойного зонда TaqMan qPCR была протестирована путем сравнения значений ΔCq относительно соответствующего одиночного зонда. анализов в шести стандартных разведениях NA с низкой копией, т. е. для получения значений Cq ≥ 30. (a) Обобщает результаты шести комбинаций зондов: простой-простой, простой-MGB, простой-LNA (два набора данных), MGB-MGB, LNA-LNA и LNA-MGB и ( b ) показывают ΔCq трех комбинаций зондов: простой-MGB, простой-LNA и MGB-LNA, соответственно.

    Результаты достаточно доказали, что включение второго идентично меченого зонда в TaqMan qPCR не ухудшает чувствительность анализа, при этом значения Cq остаются практически идентичными даже при ограниченных концентрациях матрицы. Это наблюдалось независимо от модификации, комбинации или ориентации зонда.

    Наконец, было исследовано влияние второго зонда на сигнал FAM и интерпретацию данных при ограниченных стандартных концентрациях. Графики разброса% d (RFU) (см. Методы) постоянно выражали более сильный сигнал FAM по всей панели с распределением данных между 10–60% для всех тестируемых комбинаций датчиков.

    Демонстрация применимости двойного зонда TaqMan qPCR в диагностической микробиологии

    Полезность двойного зонда для улучшения диагностического TaqMan qPCR была продемонстрирована на двух анализах: RT-qPCR на вирус артериита лошадей (EAV) и на парвовируса собак 2 ( CPV-2) qPCR (дополнительная информация 3, таблица S3.1). В анализе EAV использовались простые-простые зонды в противоположной ориентации, в то время как в анализе CPV-2 использовалась пара тандемных зондов простого MGB. Для исследования взаимного компенсаторного эффекта пар зондов во время амплификации были отобраны различные штаммы EAV и CPV-2, содержащие разные нуклеотидные мутации, которые ослабляли или нокаутировали один из зондов.Наиболее яркие примеры показаны на рис. 6.

    Рис. 6. Демонстрация полезности двухзондовой кПЦР TaqMan в диагностической микробиологии.

    Кривые амплификации двухзондовой кПЦР CPV-2 (тандемная конфигурация простой-MGB, ( a ) и EAV RT-qPCR (противоположная простая-простая конфигурация, ( b ) и связанного с ней одиночного зонда). анализы (дополнительная информация 3, таблица S3.1), представленные в классическом и логарифмическом представлении Все реакции проводили в трех повторностях.Анализы с двойным зондом были выделены красным, а анализы с зондом 1 и зондом 2 — зеленым и синим соответственно. Каждый анализ дополнялся выравниванием последовательности зонда с шаблоном, при этом стрелки соответствующего цвета указывали направления зонда. На электрофореограммах сравниваются продукты амплификации (одна повторность), а в таблицах — средние значения Cq между анализами. Дополнительные примеры показаны в дополнительной информации 3, рисунок S3a – c.

    Двойной зонд (тандемная простая конфигурация MGB) КПЦР CPV-2 и соответствующие анализы с одним зондом были использованы в трех повторностях для исследования штамма CPV-2, который идеально соответствовал первому зонду, но содержал три нуклеотидных изменения во втором. сайт связывания зонда.Одно из этих изменений было расположено примерно посередине, а два последних — близко к 3′-концу зонда, модифицированному MGB. Результаты показали, что наблюдаемые мутации вредны для связывания и гидролиза CPV-2_probe2. Следовательно, анализ кПЦР CPV-2_probe2 не смог обнаружить этот штамм CPV-2, несмотря на присутствие лежащего в основе ампликона, как было предположено с помощью электрофореза. Напротив, анализ с двумя зондами показал четкую положительность CPV-2 с практически идентичными параметрами с аналогом CPV-2_probe1.Это указывает на то, что в настройке с двумя датчиками CPV-2_probe1 в достаточной степени компенсирует недостаток CPV-2_probe2.

    Во втором примере, анализ двойного зонда EAV RT-qPCR (противоположная простая-простая конфигурация) использовался вместе с аналогами с одним зондом для обнаружения штамма EAV со 100% сходством с EAV_probe2, при наличии двух мутации относительно EAV_probe1. Первая из этих мутаций была расположена на крайнем 5′-конце, что указывает на возможное вмешательство в гидролиз.Второе изменение было немного эксцентричным и смещено к концу 3 ‘. Интересно, что, как видно на графике амплификации, зонд EAV_probe2 все еще был способен обнаруживать тестируемый штамм EAV, но со слабым усилением сигнала FAM, приводящим к плоской кривой амплификации. Тем не менее, даже этот слабый выход флуоресценции может вносить вклад в общий сигнал анализа с двумя зондами, который превосходит точно совпадающий анализ с одним зондом.

    Дополнительные примеры двухзондового анализа CPV-2 и EAV приведены в дополнительной информации 3, рисунок S3a – c.

    Независимые и идентично распределенные данные (IID)

    Наличие независимых и идентично распределенных данных (IID) является обычным допущением для статистических процедур и тестов гипотез. Но что на самом деле означает этот полный рот слов? Это тема этого поста! И я дам полезные советы, как определить, относятся ли ваши данные к IID.

    Они независимы, но мы не о таком типе!

    Давайте разберем компоненты по одному.

    Мы говорим о независимых и одинаково распределенных переменных в контексте выборок.Выборки берутся из совокупности последовательно. И IID относится к значениям характеристики для объектов, которые вы последовательно отбираете.

    Значения для характеристики легко. Это просто переменная, которую вы измеряете. Например, представьте, что вы измеряете IQ каждого человека в своем исследовании. Давайте глубже исследуем свойства независимости и одинакового распределения!

    Независимые мероприятия

    В контексте выборки события независимы, если наблюдение за текущим элементом не влияет и не дает представления о значении следующего элемента, который вы измеряете, или любых других элементов в выборке.Связи между наблюдениями нет.

    Результаты подбрасывания монеты представляют собой независимые двоичные данные.

    Классический пример независимых событий — подбрасывание монеты. Когда вы подбрасываете монету, один результат вообще не влияет на следующий результат и не предсказывает его. Даже если вы получите пять орлов подряд, вероятность следующего подбрасывания монеты составляет 50%.

    То же самое можно применить и к другим характеристикам. Например, в нашем исследовании IQ, если мы измеряем IQ человека, оно не должно предоставлять никакой информации о следующем предмете, который мы оцениваем.Если мы выбираем предметы случайным образом, это должно быть правдой. Однако, если мы не используем случайный выбор, он может быть неточным.

    Представьте, что мы оцениваем IQ одного человека, а затем измеряем его брата или сестру, потому что это удобно. Вероятна корреляция между их оценками. Измеряя первого человека, мы получаем некоторое представление о втором человеке. Следовательно, они не являются независимыми наблюдениями.

    Независимость связана с тем, как вы определяете свою совокупность и процесс получения вашей выборки.Это в значительной степени сводится к случайной выборке, а не к использованию удобной выборки. Лучше всего определить вашу популяцию, а затем составить случайную выборку из этой популяции.

    Большинство проверок гипотез предполагают независимость наблюдений. Нарушение этого предположения может сделать результаты недостоверными. Однако некоторые тесты работают с зависимыми выборками, например парные t-тесты.

    Связанное сообщение : Независимые и зависимые образцы

    Идентично распределенный

    Идентично распределенный относится к распределению вероятностей, которое описывает характеристику, которую вы измеряете.В частности, одно распределение вероятностей должно адекватно моделировать все значения, которые вы наблюдаете в выборке. Следовательно, набор данных не должен содержать трендов, поскольку они указывают на то, что одно распределение вероятностей не описывает все данные.

    Распределения вероятностей определяют как дискретные, так и непрерывные переменные. Давайте посмотрим, что это влечет за собой для обоих типов.

    Дискретные события

    Дискретные события имеют несколько конкретных результатов. Для каждого события суммарная вероятность всех возможных исходов равна единице.Подбрасывание монеты — традиционный пример, но я собираюсь использовать шестерку на кубике. Я обнаружил, что аспект равной вероятности орла и решки слишком часто попадает в определение. Идентично распределенный код , а не , требует равных вероятностей.

    Аналитики моделируют выпадение шестерки по сравнению с отказом от шестерки, используя биномиальное распределение, потому что это двоичные данные (6 или не 6). Вероятность выпадения шестерки — 16,6%. Эта вероятность не должна измениться в процессе сбора данных.Если при сборе данных он остается неизменным, значения распределяются одинаково.

    Непрерывные события

    Непрерывные события имеют бесконечное количество возможных результатов. Распределение вероятностей для непрерывных данных определяет вероятности этих результатов. Наиболее распространенным является нормальное распределение. Для непрерывных распределений часто необходимо убедиться в отсутствии трендов по нескольким параметрам. Например, нормальное распределение имеет два параметра: среднее значение и стандартное отклонение.При сборе пробы ни в одном из этих показателей не должно быть тенденции.

    Например, в нашем фиктивном исследовании IQ оценки IQ подчиняются нормальному распределению. Собирая баллы, мы должны следить за тем, чтобы они не повышались или не уменьшались из-за того, что это влияет на среднее значение. Кроме того, мы должны быть уверены, что разброс оценок IQ остается постоянным.

    Похожие сообщения : Общие сведения о распределении вероятностей, нормальном распределении и распределениях для двоичных данных

    Почему так важны одинаково распределенные данные?

    Как для дискретных, так и для непрерывных данных не должно быть трендов.Одно распределение вероятностей может описать вашу выборку.

    Идентично распределенные данные жизненно важны для большинства проверок гипотез, поскольку они указывают на то, что вы оцениваете стабильное явление. Например, если вы измеряете прочность продукта, и средняя прочность увеличивается по мере того, как вы собираете больше образцов, трудно делать выводы. Какая средняя сила продукта? Это зависит от того, когда вы это измеряете! Это сильнее, чем конкретная ценность? Это также зависит от того, когда вы его измеряете!

    Конечно, если ваш анализ сравнивает группы, группы могут иметь разные средства, пропорции или другие свойства, но каждая группа должна быть одинаково распределена.

    Наконец, вы можете оценивать показатели, у которых есть тенденции во времени, но вам нужно будет использовать анализ, предназначенный для этого, например анализ временных рядов.

    Оценка IID в наборе данных

    Как узнать, независимы ли ваши данные и одинаково ли они распределены? Вот несколько советов!

    Для независимости подумайте, как вы собирали свои данные. Вы использовали случайную выборку или получили удобную выборку? Если вы использовали легко доступные предметы, считаете ли вы, что последовательные наблюдения связаны друг с другом или влияют друг на друга, например, на показатели IQ братьев и сестер?

    Понимание процесса сбора данных и предметной области может помочь вам определить, являются ли ваши наблюдения независимыми.Случайная выборка — отличный способ обеспечить независимые наблюдения!

    Для идентично распределенной части определите, есть ли какие-либо тенденции в данных. Графики могут помочь вам в этом аспекте. Постройте график данных в том порядке, в котором вы измеряли каждый элемент, и ищите закономерности.

    Пример контрольной диаграммы, отслеживающей среднее значение и дисперсию непрерывных данных.

    К счастью, есть специальный тип графика, который аналитики качества используют для оценки этого аспекта — контрольные диаграммы! К сожалению, аналитики, не относящиеся к этой области, недостаточно часто используют эти диаграммы.

    Контрольные карты

    специально разработаны для отслеживания характеристик в течение долгого времени, включая пропорции, средние значения и изменчивость. Эти диаграммы показывают, есть ли в вашей выборке проблемные тенденции или закономерности, позволяющие предположить, что ваши данные не соответствуют единому распределению вероятностей. Для получения дополнительной информации прочитайте мой пост об использовании контрольных диаграмм с проверками гипотез.

    Надеюсь, вы понимаете как независимые, так и идентично распределенные части предположения IID. Также имейте в виду, что существуют статистические тесты и процедуры, специально разработанные для данных, которые не удовлетворяют этим предположениям!

    Связанные

    Независимые и одинаково распределенные случайные величины

    Обзор

    В теории вероятностей последовательность или другой набор случайных величин является независимым и одинаково распределенным (т.i.d.) , если каждый из них имеет такое же распределение вероятностей, что и другие, и все они независимы друг от друга.

    Аббревиатура i.i.d. особенно часто встречается в статистике (часто как iid , иногда записывается как IID ), где наблюдения в выборке часто считаются (более или менее) i.i.d. для целей статистического вывода. Предположение (или требование) о том, чтобы наблюдения были i.i.d. имеет тенденцию упрощать математику, лежащую в основе многих статистических методов.Однако в практических приложениях это может быть или не быть реалистичным.

    Это важно в классической форме центральной предельной теоремы, которая утверждает, что распределение вероятностей суммы (или среднего) i.i.d. переменные с конечной дисперсией приближаются к нормальному распределению, становясь достаточно близкими, когда размер выборки n > 29.

    Примеры

    Ниже приведены примеры или применения независимых и одинаково распределенных (i.i.d.) случайных величин:

    • При прочих равных последовательность исходов вращений колеса рулетки равна i.я бы. С практической точки зрения, важное значение из этого состоит в том, что если шарик рулетки приземляется на «красное», например, 20 раз подряд, то следующее вращение не более или менее вероятно будет «черным», чем на любом другом. другой спин.
    • При прочих равных, последовательность бросков кубика i.i.d.
    • При прочих равных, последовательность подбрасывания монеты i.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.