12 простых правил, чтобы не деградировать во фрилансе / Хабр

Очень часто фриланс обвиняют в том, что он является тупиком в развитии специалиста (при этом часто в пример ставятся именно фрилансеры-программисты).

Мол все сводится к решению однотипных не сложных задач, а сложные задачи не доверяют во фриланс. Такие выводы можно прочитать почти в любом обсуждении фриланса и не от одного человека.

Именно поэтому я хотел бы сегодня поднять еще раз эту тему и привести список своих советов, что нужно делать фрилансеру, чтобы он постоянно продвигался вперед, а не топтался на месте и деградировал. Иначе говоря — как не погрязнуть в рутине однообразных и мелких проектов.

Сразу скажу, что сложные проекты есть во фрилансе, только большая часть их никогда не выкладывается в открытом виде на биржах и т.д. Они приходят сразу в нужные руки, к фрилансерам, которым доверяют. Основная проблема на данный день во фрилансе состоит в том, что квалификация бОльшей части фрилансеров просто физически и технически не позволяет им «проглотить» сложный проект и, что естественно, таким людям проект не доверят. Для действительно профессиональных исполнителей — заказы есть, были и будут — это аксиома.А во фрилансе еще проще выделяться профессионалам на фоне бОльшей части фрилансеров.

Я согласен с мнением, что если фрилансер не развивается, а только зарабатывает деньги — рано или поздно это приведет его в тупик, когда на работу ему будет уже сложно устроится, ввиду того, что оплата будет намного меньше его заработков во фрилансе, а прогресса во фрилансе у него нет.

Итак, не откладывая в долгий ящик, мои советы для фрилансеров-программистов:

1. До старта. Не идите во фриланс не поработав 1-2 года в командах в офисе. Без понимания процесса работы в командах — о развитии специалиста не может быть и речи (дальше поясню почему)
2. В начале пути. Первые полгода Вам нужно будет работать на репутацию, чтобы потом иметь возможность ставить цены повыше, опираясь на репутацию и опыт
3. Фильтруйте проекты. Как только у вас есть репутация — не беритесь за все подряд, за что платят просто много денег. Старайтесь взять каждый раз проект по-сложнее, по-интереснее, так, чтобы допустим 25% этого проекта Вы не знали, как сделать, чтобы приходилось поломать голову, поискать решения
4. Новая информация. 2-3 часа в день уделяйте на самообразование в профильной сфере
5. Обмен опытом. Старайтесь как можно чаще работать в команде с другими людьми из вашей области — это важно для обмена опытом. Тут как раз и пригодится опыт работы в команде в офисах — многие вещи в том или ином виде имеют применение в условиях удаленной работы
6. Не допускайте застоя. Продвигайтесь в своих познаниях, старайтесь перейти на ступень выше — в одном проекте выступить, как исполнитель, в другом — как менеджер (получите хороший опыт работы с людьми и с заказчиками) или проектировщик базы данных
7. Новинки. Интересуйтесь новинками в Вашей области — старайтесь их «потрогать» своими руками, чего бы Вам это не стоило — для этого Вы должны достаточно зарабатывать (привет снова репутации фрилансера), чтобы иметь доступ к новым технологиям
8. Соблюдайте режим. Не работайте в день больше 6 часов — это пагубно сказывается на Вашем здоровье. 6 часов в день достаточно для работы
9. Отдых. Больше отдыхайте, чтобы мозг был готов к освоению новых вещей чуть ли не каждый день
10. Реальность. Время от времени советую браться за работу над каким-либо проектом, где работодателю нужно Ваше присутствие в его офисе с его командой. Можно даже самостоятельно предлагать такой тип сотрудничества по проектам в топ-конторах своего города. Такой себе выездной фриланс. Очень полезно для обмена опытом с офисными коллегами и получения новых знаний
11. Цели. Ставьте себе цели на месяц, год, на два года наперед и двигайтесь к их достижению. Отличной целью может быть как запуск своего проекта, так и освоение бизнес-английского
12. Будущее. Никогда не останавливайтесь на достигнутом — идите дальше, глубже. Определитесь с тем, кем вы хотите быть через 5 лет допустим и идите к этой цели

Правила довольно простые, почти все они очень просто проецируются на любую область фриланса и работают не только в области программирования во фрилансе.

Подеградируем? Что значит деградировать и почему над этим смеются

Деградировать — это значит ухудшаться, двигаться назад в развитии. Латинский глагол degradare (спускаться) происходит от слова gradus — ступень.
Пример: «Система образования в стране за последние годы деградировала».

Деградация — это процесс постепенного ухудшения, упадка, снижения качества. Например, «деградация личности». Или «деградация окружающей среды» — то есть разрушение экосистем.

В устаревшем значении деградация — понижение в чине, разжалование. Пример: «По окончании дела в деградации чина посылать до вышнего генералитета».

Синонимы к слову «деградировать»: вырождаться, загнивать, приходить в упадок, разлагаться, регрессировать, ухудшаться, хиреть.

Антонимы к слову «деградировать»: прогрессировать, развиваться, улучшаться, подниматься.

«Хочу деградировать». В чем смысл шуток про деградацию

Интернет-шутники используют слово «деградировать» с иронией, описывая свой низкоинтеллектуальный отдых. Деградировать — это значит валяться на диване со смартфоном и смотреть мемы, листать соцсети, смотреть глупые ролики с YouTube или сериалы. В английском языке подобные развлечения называют guilty pleasures — «удовольствия, за которые стыдно».

Пример употребления: «Ничего не хочу делать, хочу тупо лежать и деградировать».

Штука о деградации из твиттера https://img.anews.com/media/gallery/107547370/953033642.jpg

Штука о деградации из твиттера https://img. anews.com/media/gallery/107547370/427400045.jpg

Штука о деградации из твиттера https://img.anews.com/media/gallery/107547370/950290023.jpg

Почему же деградация стала предметом гордости?

По-видимому, на фоне культа богатства и успеха, разговоров о постоянном саморазвитии и «выходе из зоны комфорта» людям иногда хочется послать все к черту. Потому они бравируют своим нонконформизом, признаваясь в желании жить расслабленно и признавать свое несовершенство, а не стремиться к «успешности». В этом смысле деградировать — иронический синоним слов «отдыхать», «чилить».

Деградирует ли молодежь от мемов?

Некоторые люди старшего поколения воспринимают шутки всерьез и жалуются, что «молодежь деградирует» из-за интернета, социальных сетей и мемов.

Пост о вреде мемов и деградации молодежи. Скриншот с Pikabu.ru https://img.anews.com/media/gallery/107547370/147683668.jpg

Другие отмечают, что мемы и соцсети — это всего лишь современное проявление массовой культуры. А непонятная многим постирония — признак чувства юмора, свойственная думающему человеку языковая игра.

Обсуждение мемов и деградации на сайте thequestion.ru https://img.anews.com/media/gallery/107547370/866976476.jpg

Деградировать и деградация. Примеры употребления

Мелкая поземельная собственность, нормальная форма мелкого производства, деградируется, уничтожается, гибнет при капитализме.
В.И. Ленин. Карл Маркс (1913)

Многие превращаются в вечно недовольных, обвиняющих весь мир в своем несчастии, злобных скандалистов, охотно прибегающих к алкоголю и под влиянием последнего быстро деградирующих.
П.Б. Ганнушкин. «Клиника психопатий, их статика, динамика, систематика» (1933)

Менделевская лженаука — выражение маразма и деградации буржуазной культуры…
А.Н. Студитский. «Менделевская генетика на службе американского расизма» // «Наука и жизнь» (1949)

Начиналось новое восхождение, новая война — и так несколько раз, пока производительные силы планеты не истощались и технически не деградировали.
И. А. Ефремов. «Час быка» (1968-1969)

— За последний год я страшно деградировал.
— Но, говорят, вы были режиссером?
Сергей Довлатов. «Иностранка» (1985)

Результатом большой термоядерной войны может быть лишь гибель цивилизации, смерть и страдания миллиардов людей, социальная и биологическая деградация оставшихся в живых и их потомков.
А.Д. Сахаров. «Конвергенция, мирное сосуществование» (1989)

И речь у нас шла о том, что для классической китайской ментальности любое движение вперед будет деградацией.
Виктор Пелевин. «Чапаев и пустота» (1996)

Деграданты пишут статью про деградацию и такие же умственно-отсталые полу**ки изливают свои «мысли» по этому поводу в обсуждении. Прекрасно.
Lurkmore. Из обсуждения удаленной статьи «Деградация»

ДЕГРАДИРОВАТЬ — это… Что такое ДЕГРАДИРОВАТЬ?

ДЕГРАДИРОВАТЬ

ДЕГРАДИРОВАТЬ

ДЕГРАДИ́РОВАТЬ [дэь], деградирую, деградируешь, совер. и несовер. (книжн.). Прийти в состояние деградации (находиться в состоянии деградации), ухудшиться (ухудшаться).

Толковый словарь Ушакова. Д.Н. Ушаков. 1935-1940.

.

Антонимы:

• ДЕГРАДАЦИЯ
• ДЕГТЯРНИК

Смотреть что такое «ДЕГРАДИРОВАТЬ» в других словарях:

• ДЕГРАДИРОВАТЬ — (лат. degradare, от gradus ступень). Понизить, обойти по службе. Словарь иностранных слов, вошедших в состав русского языка. Чудинов А.Н., 1910. деградировать (фр. degrader) ухудшаться, вырождаться, двигаться назад в своем развитии. Новый словарь …   Словарь иностранных слов русского языка

• деградировать — dégrader. Постепенно ухудшаться, приходить в упадок. БАС 2. Невыгодно давать рабочему слишком высокое образование. Он должен деградировать в своих желаниях и в рабской дешевизне до возможного предела. Природа 1934 1 105. Природа не терпит статики …   Исторический словарь галлицизмов русского языка

• деградировать — прогнивать, пойти под гору, загнивать, приходить в упадок, вырождаться, прийти в упадок, гнить, идти под гору, разлагаться, разложиться, опуститься, выродиться, опускаться, загнить Словарь русских синонимов. деградировать прийти (приходить) в… …   Словарь синонимов

• деградировать — деградировать. Произносится [дэградировать] и допустимо [деградировать] …   Словарь трудностей произношения и ударения в современном русском языке

• ДЕГРАДИРОВАТЬ — [дэ ], рую, руешь; совер. и несовер. (книжн.). Постепенно ухудшаясь, прийти (приходить) к вырождению. | сущ. деградация, и, жен. Толковый словарь Ожегова. С.И. Ожегов, Н.Ю. Шведова. 1949 1992 …   Толковый словарь Ожегова

• деградировать — • здорово деградировать • катастрофически деградировать • полностью деградировать • сильно деградировать • страшно деградировать …   Словарь русской идиоматики

• Деградировать — несов. и сов. неперех. 1. Постепенно ухудшаясь, приходить в упадок. 2. Снижать или утрачивать положительные качества. Толковый словарь Ефремовой. Т. Ф. Ефремова. 2000 …   Современный толковый словарь русского языка Ефремовой

• деградировать — деградировать, деградирую, деградируем, деградируешь, деградируете, деградирует, деградируют, деградируя, деградировал, деградировала, деградировало, деградировали, деградируй, деградируйте, деградирующий, деградирующая, деградирующее,… …   Формы слов

• деградировать — развертываться развиваться …   Словарь антонимов

• деградировать — деград ировать, рую, рует …   Русский орфографический словарь

территория комплекса деградировала.

28.04.2020. Александр Килимов. Новости Сахком. Южно-Сахалинск. Сахалин.Инфо

11:01 28 апреля 2020.

Александр Килимов ЖКХ, Южно-Сахалинск

«ЖК позиционирует себя как комплекс повышенной комфортности, а на деле разруха», — пишет в редакцию ИА Sakh.com южносахалинец, проживающий в жилом комплексе Green Palace. Новостройки на перекрестке Мира — Пуркаева стоят всего около четырех лет, но за это время, считает собеседник информационного агентства, территория деградировала. К своему письму с жалобами в адрес управляющей компании «Сателлит» мужчина приложил множество различных фотографий.

Соавтор Sakh.com рассказал, что почти год является собственником квартиры в одной из многоэтажек. Общаясь с соседями, он выяснил, что с момента ввода первого дома в эксплуатацию жильцами неоднократно составлялись письменные, а также устные, претензии в адрес УК по устранению недостатков. Буквально в прошлом году был составлен список из 21 позиции, но были исправлены всего два замечания и появились новые.

— Дом на гарантии, думали, проблем не возникнет. УК ссылается на плохую работу застройщика. Замкнутый круг получается. По договору управляющая компания отвечает за текущий и капитальный ремонт на территории ЖК, — комментирует мужчина. — У нас многие жилые комплексы сегодня находятся в похожем состоянии. Хотя когда-то была куча красивых обещаний. Многие разделят негодование. Думаю, тема очень интересна сахалинцам, так как качество жилья — одна из центральных проблем. Если в «элитном» жилье так, то на что рассчитывать жителям «обычных» домов и т. д.

Директор управляющей компании «Сателлит» Денис Ясикава не отрицает, что на территории Green Palace имеются проблемы (обваливается кафель, проваливается брусчатка, проблемы с ливневой канализацией и многое другое) и сам застройщик от них не отворачивается. В апреле специалисты приступили к устранению замечаний на подземной парковке. В мае работы продолжатся во дворе жилого комплекса, застройщик поэтапно начнет приводить территорию в порядок.

В мэрии Южно-Сахалинска жильцам советуют жаловаться на работу УК в государственную жилищную инспекцию Сахалинской области, потому что администрация не имеет отношения к данному ЖК — это не муниципальное имущество, а частный жилищный кооператив.

Соавтор Sakh.com передал гонорар на благотворительные цели. Так как сбор средств для детей пока не ведется, Sakh.com будет откладывать деньги для помощи, чтобы в будущем передать их нуждающемуся.

Соавтор ИА Sakh.com пообещал держать руку на пульсе, следить за работой управляющей компании и после рассказать информационному агентству, как она справилась со своими обязанностями.

Декоративный камень

Щебень

«Сергею Семаку не надо искать оправданий, а надо разобраться, почему команда так деградировала»

Второй год подряд «Зенит» не смог выйти в евровесну, заняв четвертое место на групповом этапе Лиги чемпионов, хотя при жеребьевке был посеян из первой корзины и получил соперников, уступающих ему по рейтингу.

По мнению мастера спорта, бывшего игрока и тренера «Зенита», заслуженного работника физической культуры Российской Федерации Алексея Стрепетова, нынешнее выступление петербургской команды в Европе надо признать провальным.

«Год назад результат был таким же, но все же «Зенит» боролся до конца, набрал 7 очков. Сейчас команда всех разочаровала, оказалась совершенно не готовой к Лиге чемпионов. Получилось в этом году, как в сказке про золотую рыбку: сперва все было хорошо, в России выиграли все, что можно – золотые медали, Кубок, Суперкубок, а оказались у разбитого корыта», – рассуждает футбольный эксперт «ПД».

Вчерашний матч с «Брюгге» получился просто удручающим.

«Вообще не стал бы говорить о составе, о тех игроках, которые не смогли выйти на поле. Главное – не было у футболистов «Зенита» настроя, желания бороться. Как говорили в советские годы, «Не горели глаза». Можно было проиграть, но в борьбе, отдать все силы на поле. В матче с «Брюгге» я не увидел стремления победить, как будто эта игра уже не нужна», – считает экс-зенитовец.

После матча Сергей Семак назвал целый комплекс причин неудачного выступления в Лиге чемпионов. Но можно ли оправдать ими провал?

«Не стоит искать оправданий. Все те причины, что называет Семак – усталость, травмы, перелеты, – все это включает в себя футбол. Надо признать, что «Зенит» в этом сезоне деградирует, превращается в среднюю команду, против которой уверенно играют даже аутсайдеры нашего чемпионата, как тульский «Арсенал». Все футболисты стали играть хуже, даже те, кто только пришел в «Зенит». Возьмите Ловрена в начале сезона и то, как он выглядит сейчас. Совершенно не похож на себя Барриос, а ведь он полтора года был лучшим опорным полузащитником нашего чемпионата. Сдали Оздоев, Ракицкий, не могут вернуться на свой уровень после травм Азмун, Дриусси. Мостовой в «Сочи» играл хорошо, в первых матчах за «Зенит» смотрелся неплохо, но в последних матчах тоже не радует. В этом есть вина тренерского штаба. Игроки должны прогрессировать, не снижать своего уровня», – уверен Алексей Стрепетов.

В «Зените» не оказалось в критический момент лидера.

«Сейчас я вообще не вижу в команде ни одного футболиста, который мог бы повести партнеров за собой, каким был Бранислав Иванович в предыдущих сезонах. Артем Дзюба тянулся за ним, но когда Иванович ушел, то стало ясно, что такого же авторитетного для всех человека в команде нет», – полагает эксперт.

Нужны ли «Зениту» радикальные перемены прямо сейчас? Стоит ли отправить Семака в отставку? По мнению футбольного специалиста, со столь важными решениями спешить не надо.

«Думаю, что Семак и тренерский штаб должны провести серьезный анализ своей работы. Понять, в чем они допустили ошибки, в чем недоработали, почему такие результаты. Ведь каждое поражение – это ошибка тренерского штаба. Ошибка с составом, с выбранной тактикой, с оценкой соперника, с психологической подготовкой к игре. Почему «Зенит» был так не подготовлен к Лиге чемпионов? Почему команда выглядела такой разобранной? После того, как Семак и его помощники такую работу проведут, руководство клуба должно принимать решение», – уверен эксперт.

Выступления в Европе – главный критерий для оценки выступлений клуба.

«Семак уже сказал, что задача – выиграть чемпионат России. Но болельщикам мало этого, они хотят, чтобы «Зенит» достойно выступал в еврокубках. Выиграть чемпионат России и потом позорно проигрывать в Лиге чемпионов – это никому не нужно. К тому же уровень чемпионата России заметно снизился и победить в нем – не такое уж достижение. Мне кажется, что нужна свежая кровь. Со многими футболистами нынешнего состава придется расставаться. Пора создавать в «Зените» новую команду, которая смогла бы побеждать в России и показывать хороший результат в Европе», – уверен Алексей Стрепетов.

Украинский экс-министр рассказал, как деградировала экономика страны

https://ria.ru/20190503/1553238500.html

Украинский экс-министр рассказал, как деградировала экономика страны

Украинский экс-министр рассказал, как деградировала экономика страны

Бывший министр экономики Украины Виктор Суслов в интервью телеканалу ZIK заявил, что украинская экономика находится в ужасающем состоянии и в ближайшем будущем… РИА Новости, 03. 05.2019

2019-05-03T05:48

2019-05-03T05:48

2019-05-03T05:59

ситуация на украине

украина

в мире

экономика

/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content

/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content

https://cdn23.img.ria.ru/images/155316/21/1553162181_0:0:2323:1307_1920x0_80_0_0_452d3817990083b21779b4d7923b66fe.jpg

МОСКВА, 3 мая — РИА Новости. Бывший министр экономики Украины Виктор Суслов в интервью телеканалу ZIK заявил, что украинская экономика находится в ужасающем состоянии и в ближайшем будущем у страны нет перспектив развития.Он объяснил, что политика нынешних украинских властей привела к устойчивому экономическому кризису, а все заявления политиков о достижениях не соответствуют действительности. При этом он отметил, что украинский народ выживает во многом за счет украинцев, работающих за границей, а также за счет постоянных иностранных займов, которые идут на «оплату старых кредитов».»Пусть даже они переводят сюда деньги, но у нас нет уже рабочей силы для наших предприятий, мы становимся все менее привлекательными для инвесторов. У нас идет колоссальное разрушение инфраструктуры. Люди, которые работают за границей, они ведь поддерживают только своих родственников и не платят налогов в бюджет и взносов в пенсионный фонд», — объяснил экс-министр.Суслов добавил, что Украина потеряла почти всю свою промышленность, за исключением военно-промышленного комплекса, но это происходит только из-за того, что власти бросили абсолютно все силы в эту сферу.Он отдельно подчеркнул, что на Украине серьезный кризис переживает ядерная энергетика. По его словам, в стране в течение нескольких ближайших лет будут изношены почти все блоки атомных электростанций, которые обеспечивают больше половины электроэнергии для Украины, а появление новых и ремонт старых не предвидится.Суслов также констатировал, что на данный момент перспектив развития экономики Украины нет, добавив, что в стране наблюдается устойчивая «деградация». При этом он считает, что ситуацию может спасти лишь полностью новая экономическая политика нового президента.

https://ria.ru/20190426/1553055015.html

https://ria.ru/20190418/1552773864.html

украина

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

2019

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://ria.ru/docs/about/copyright.html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

https://cdn24.img.ria.ru/images/155316/21/1553162181_0:0:2323:1743_1920x0_80_0_0_a549b1981c17bdc492cf4351042ee65f.jpg

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

ситуация на украине, украина, в мире, экономика

МОСКВА, 3 мая — РИА Новости. Бывший министр экономики Украины Виктор Суслов в интервью телеканалу ZIK заявил, что украинская экономика находится в ужасающем состоянии и в ближайшем будущем у страны нет перспектив развития.

Он объяснил, что политика нынешних украинских властей привела к устойчивому экономическому кризису, а все заявления политиков о достижениях не соответствуют действительности. При этом он отметил, что украинский народ выживает во многом за счет украинцев, работающих за границей, а также за счет постоянных иностранных займов, которые идут на «оплату старых кредитов».

26 апреля 2019, 08:00

«Ищи где хочешь!» Газовая проблема разрывает Украину

«Пусть даже они переводят сюда деньги, но у нас нет уже рабочей силы для наших предприятий, мы становимся все менее привлекательными для инвесторов. У нас идет колоссальное разрушение инфраструктуры. Люди, которые работают за границей, они ведь поддерживают только своих родственников и не платят налогов в бюджет и взносов в пенсионный фонд», — объяснил экс-министр.

Суслов добавил, что Украина потеряла почти всю свою промышленность, за исключением военно-промышленного комплекса, но это происходит только из-за того, что власти бросили абсолютно все силы в эту сферу.

«Терять такие мощные отрасли промышленности, которые у нас были <…> мощное авиастроение, за пять лет мы не произвели ни одного самолета. Все кораблестроительные заводы почти ничего не производят, они в кризисе, объемы производства упали многократно. Огромные сложности испытывает космическая промышленность. Есть кое-какие достижения в ВПК, но это не большое достижение, оно не повышает уровень жизни. Ну вот, пожалуй, и все», — рассказал экс-министр.

Он отдельно подчеркнул, что на Украине серьезный кризис переживает ядерная энергетика. По его словам, в стране в течение нескольких ближайших лет будут изношены почти все блоки атомных электростанций, которые обеспечивают больше половины электроэнергии для Украины, а появление новых и ремонт старых не предвидится.

Суслов также констатировал, что на данный момент перспектив развития экономики Украины нет, добавив, что в стране наблюдается устойчивая «деградация». При этом он считает, что ситуацию может спасти лишь полностью новая экономическая политика нового президента.

18 апреля 2019, 08:00

Две недели до дефолта: Украине нечем расплатиться с кредиторами в мае

«Занимаясь апгрейдом машин, мы деградировали как люди» – Hi-Tech – Коммерсантъ

Состоявшаяся на минувшей неделе в Сан-Франциско конференция «Человечность: новая повестка дня для технологических компаний» собрала более 300 представителей IT-индустрии: руководителей компаний, ученых и экспертов. Организаторы — Центр гуманных технологий — рассказывали, почему развитие социальных сервисов ведет к деградации человечества.

Конференцию организовали бывший сотрудник Google, создатель Центра гуманных технологий и основатель движения «Время, потраченное не напрасно» Тристан Харрис и его коллега и единомышленник Эйза Раскин.

Тристан Харрис — известная личность в Кремниевой долине. В 2011—2015 годах он занимался продуктовым дизайном в Google, где составил манифест «Свести к минимуму отвлечение внимания и уважать внимание пользователей». Борьба за «гуманность технологий», не покушающихся на полноту жизни человека, стала его главной целью, когда он ушел из компании.

Эйза Раскин является специалистом по компьютерным интерфейсам. Он сын Джеффа Раскина (1943-2005) — одного из первых специалистов в этой области, работавшего в том числе над проектом Macintosh в Apple Computer.

Центр гуманных технологий уже несколько лет пропагандирует идею, что IT-гиганты обладают безграничной властью над большей частью человечества благодаря использованию психологических уязвимостей людей. Десять таких уязвимостей и способов манипулировать вниманием Харрис перечислил в своем эссе 2016 года «Как технологии взламывают ваш разум»:

1. Иллюзия свободного выбора
2. Игровая зависимость
3. Страх пропустить что-то важное
4. Жажда социального одобрения
5. Принцип социальной взаимности
6. Бесконечные ленты и автозапуск
7. Резкое отвлечение внимания уведомлениями
8. Слияние ваших потребностей с потребностями бизнеса
9. Неудобство невыгодного выбора
10. Умалчивание последствий выбора

По мнению Тристана Харриса, на соцсетях лежит огромная ответственность — не допустить того, чтобы человечество проводило свою жизнь, уткнувшись в экраны гаджетов. Facebook, YouTube, Twitter и другие подобные сервисы, по его словам, принижают человека, низводят его на более низкий уровень, поощряя самолюбие, тщеславие, овладевая его инстинктами и эмоциями, снижая концентрацию, подрывая способность к ведению диалога, разрушая человеческие отношения и ослабляя тем самым сообщества и демократию.

Все люди рождаются с одинаковым набором слабостей. После того, как на протяжении десятилетий слабости миллиардов людей стали объектом использования, мы получим масштабный системный сбой, считает Харрис. «Большинство дискуссий вокруг технологий и искусственного интеллекта касалось проблемы того, что же будет, когда ИИ превзойдет человеческий разум. Но мы забыли подумать, что же произойдет, когда ИИ возвысится над человеческими слабостями. Вот этот момент мы как раз и переживаем»,— заметил он.

По его мнению, зависимость от социальной активности в интернете ведет к депрессиям, раскол мнений в интернет-спорах — к изоляции и радикализации, вмешательство хакеров в выборы — к тому, что результаты голосования не вызывают доверия; слабеет внимание, теряется способность мыслить критически, появляются проблемы со сном и т.п. «Человечество деградирует», — предупреждает Тристан Харрис.

Люди бьются за «лайки», теряют способность делать самостоятельный выбор, поскольку за них все решают соцсети с их режимом автозапуска воспроизведения и бесконечной лентой рекомендаций, они тонут в потоке новостей и зачастую ненужной информации, вязнут в бессмысленных онлайн-спорах и т. п.

«Пока мы занимались апгрейдом наших машин, мы деградировали как люди»,— уверен Харрис.

Сооснователи Центра гуманных технологий призвали технологические компании, разработчиков ПО, политиков, СМИ и ученых принять «новую повестку дня», обратив внимание в первую очередь на то, как новые технологии, программы и сервисы влияют на человека, на его мозг, психику и жизнь в целом. А потом, считают они, нужно создать инструменты и программы, которые бы помогли сосредотачиваться на деле, находить точки соприкосновения с другими людьми, укреплять отношения, строить жизнь в соответствии с общими ценностями и т. д.

Со своей стороны, Центр намерен в ближайшие месяцы провести несколько публичных мероприятий, открытых дискуссий, а в следующем году организовать конференцию по проблеме гуманных технологий. Кроме того, его специалисты составят и распространят этическое руководство для разработчиков технологий.

Алена Миклашевская

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Можно избежать деградации почвы и улучшить ее естественным путем

«Пора перестать обращаться с почвой как с грязью» — так звучал заголовок отчета « Guardian» от 11 июля 2019 года. Видео по теме называлось просто: «Не еще одна история климатических ужасов». В другой статье утверждалось, что в настоящее время мы теряем тридцать футбольных полей земли каждую секунду. Кроме того, «треть почв мира уже деградировала», тогда как при нынешних темпах все верхние слои почвы мира будут деградированы всего за 60 лет.Что такого ужасного в том, как мы обращаемся с почвой? И как это можно изменить?

Деградация почвы — если вы хотя бы отдаленно заинтересованы в выращивании растений, это, вероятно, термин, на который вы уже наткнулись. В соответствии с такими причудливыми словами, как деградация земель, эрозия почвы или опустынивание, деградация почвы обычно используется для описания проблем, которые негативно влияют на продуктивность сельского хозяйства. Но что именно это означает? Почему так плохо? Что вызывает это? И, самое главное, что мы можем с этим сделать?

Вот несколько ответов об одном из злейших врагов сельского хозяйства и серьезной угрозе глобальной продовольственной безопасности.Оказывается, мы можем не только заранее предотвратить деградацию почвы, но и обратить ее вспять, если она уже произошла. И мы можем сделать это естественными средствами!

Soil — это коктейль из разных ингредиентов.

Чтобы понять деградацию почвы, мы должны немного глубже понять, из чего состоит почва. Фактически, это не однокомпонентный напиток «на камнях», а коктейль из разных компонентов.

Проще говоря, почва состоит из четырех различных материалов.Пропорции могут различаться в зависимости от типа почвы:

• Частицы неорганических минералов: Это мелкие частицы разного размера, такие как песок или глина, которые изначально происходят из горного материала (так называемого «исходного материала»). Обычно они составляют более пятидесяти процентов от объема почвы.

• Органическое вещество почвы (SOM): Состоит либо из живых организмов, таких как бактерии, дождевые черви, грибки, либо невидимых микроорганизмов, либо из мертвых материалов растений и животных.В основном почвы содержат от 2 до 10% органических веществ. Чайная ложка верхнего слоя почвы обычно содержит широкий спектр различных видов и до 6 миллиардов (!) Микроорганизмов.

• Последние два компонента — это Air и Water , которые хранятся в свободных пространствах между органическими и неорганическими материалами. Вместе они составляют до половины объема почвы.

Хотя органическое вещество в почве часто почти незаметно, обычно оно составляет значительную ее часть (© Департамент первичной промышленности и регионального развития).

Хорошая почва обеспечивает наше благополучие и выживание.

Для нас наиболее очевидная функция почвы — быть колыбелью для пищи, которую мы едим. Таким образом, попросту говоря, мы называем это «хорошим», когда он хорошо питает наши посевы. Все вышеупомянутые компоненты играют в этом роль.

Например, вы можете представить, что в почве пустыни относительно небольшая доля воды. Удивительно, но он все еще содержит много живых организмов, таких как мхи, водоросли и микроорганизмы. Они «спят» на песке в ожидании следующего дождя.И когда они это делают, они раскрывают эту жизнь в виде цветущей фауны, покрывающей песчаные почвы пустыни до тех пор, пока там достаточно воды. Это демонстрирует важность трех так называемых «основных питательных веществ»: водорода, кислорода и углерода (в первую очередь в форме воды и воздуха). В этом примере вода — это единственный ингредиент, который препятствует росту растений, также называемый «ограничивающим фактором».

Пустыня Калахари на юге Африки до и после дождей. Хотя в почве изобилие жизни и питательных веществ, вода является ограничивающим фактором для роста растений (© Reddit)

Однако не только основные питательные вещества могут быть ограничивающими факторами.Большинству растений нужен не только воздух и вода. В составе вышеупомянутых компонентов почвы также содержат минералы, которые необходимы растениям для роста, процветания и производства пищи. 17 минералов составляют наиболее важные из них. Например, вы могли слышать о важности азота, фосфора или калия. В традиционном сельском хозяйстве их часто добавляют в почву в виде синтетических удобрений, чтобы дать урожай прямой искусственный импульс.

Для роста растений нужны органические помощники.

В природе растения не могут получить доступ к этим минералам сами по себе, поскольку они «скованы» физическими и химическими связями внутри компонентов почвы. Растения не могут их сломать, вот тут и становится интересно. Им нужна помощь живых организмов, таких как бактерии, которые являются естественными освободителями.

Бактерии и микроорганизмы способны «расцеплять» минералы и делать их доступными для корневой системы растений. Взамен они получают ценный сахар, что делает эти отношения беспроигрышной ситуацией, также называемой «симбиозом».Этот сахар на самом деле является углеродом, который извлекается из атмосферы в процессе фотосинтеза, а затем хранится в земле — довольно приятное сопутствующее преимущество.

Бактерии Rhizobium образуют симбиоз с некоторыми растениями, такими как бобовые. Таким образом, бактерии превращают азот из воздуха в форму, доступную для растений (© Micropia)

Микоризные грибы: почему растения любят ногу спортсмена

Еще один почвенный обитатель, заслуживающий упоминания — «микоризные грибы». То, что звучит как ужасная болезнь, на самом деле является нашим самым ценным подпольным торговцем питательными веществами.В здоровой почве эти грибы создают своего рода подземную систему (микоризу), которая соединяет грибы и часто несколько растений.

Подземная «система метро» для питательных веществ: микоризные грибы (© Permaculture Apprentice)

Через эти органические каналы они сообщаются и распределяют минералы в почве. Микоризные грибы также защищают растения от болезней. Посмотрите это видео об этих сетях, и вы больше никогда не захотите рубить дерево.

Здоровая почва как водопоглощающая губка

Эти связи являются частью больших систем, называемых «круговоротом питательных веществ», которые необходимы для жизни на этой планете.Однако живые организмы в почве не только обеспечивают питательными веществами. Они также улучшают структуру почвы. Дождевые черви, например, роют почву, оставляя за собой системы туннелей, чтобы вода могла проникнуть в нее и остаться.

Таким образом, дождевая вода попадает в почву, а не стекает с ее поверхности. Затем он становится доступным для корней растений и не вымывается, забирая с собой важные питательные вещества. Думайте о здоровой почве как о натуральной губке, которая может очень долго удерживать воду.

Чем выше доля органических веществ в почве, тем больше воды удерживается. Затем он становится доступным для растений (© Сан-Хасинто)

Итак, грибки, бактерии и их собратья-ползучие насекомые необходимы для здоровья почвы. Однако им нужно что-нибудь поесть. Они питаются мертвым и разлагающимся органическим веществом, превращая его в перегной (нет, это не ближневосточный провал). Подумайте о листьях, ветках, мульче или навозе животных в поверхностных слоях почвы. Эти материалы также увеличивают способность накапливать углерод и предотвращают его высыхание.Все эти органические вещества — живые и мертвые — составляют большую часть верхнего слоя почвы, поэтому они так ценны для роста растений.

Значение pH: фактор роста растений

Еще одним важным аспектом счастливой почвы является ее значение pH — не волнуйтесь, я буду проще. PH показывает, является ли почва кислой или щелочной — вы можете назвать ее кислой или некислой — по шкале от 0 до 14. Если он ниже 7, она кислая. Если выше, значит, почва щелочная.

Шкала pH показывает, является ли почва кислой или щелочной.Он определяет, в какой степени растения имеют доступ к определенным питательным веществам (© Prochem)

Итак, что это означает? Значение pH влияет на химические процессы в почве и тем самым определяет, в какой степени питательные вещества доступны для растений. Например, фосфор становится недоступным для растений в почве с низким pH (кислой), поскольку он образует прочную связь с алюминием. Эта проблема связана с тем, что полезные микроорганизмы не любят смешиваться в кислых почвах. Поэтому они недоступны для поддержки растений.

pH влияет на доступность питательных веществ.

Представьте свои растения как парк приключений под открытым небом. Если погода (значение pH) слишком жаркая (кислая) или холодная (щелочная), ваши ценные клиенты (питательные вещества) просто останутся дома, наслаждаясь комфортом своего дома (химические и физические связи). В результате ваш парк иссякает, пока, наконец, не обанкротится.

Три самых важных сельскохозяйственных культуры в мире (кукуруза, пшеница и рис) нуждаются в относительно нейтральном pH в пределах 5.5 и 6.5 (© Economic Times)

Вот почему фермеры всегда хотели бы внимательно следить за значением pH своей почвы, прежде чем выращивать урожай. Хорошая почва обычно имеет pH от 5,5 до 7 и поэтому является нейтральной или слегка кислой. Это потому, что большинство растений, а также полезные микроорганизмы предпочитают эти сбалансированные условия. Однако другие специализируются на более экстремальных ценностях. Часто это виды-первопроходцы, о которых мы поговорим позже.

Мы разрушаем наш фундамент.

Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций (ФАО) определяет деградацию почвы как «изменение состояния здоровья почвы, приводящее к снижению способности экосистемы предоставлять товары и услуги своим бенефициарам». Проще говоря, когда почва деградирует, он теряет способность поддерживать жизнь на этой планете. Эти товары и услуги включают, среди прочего, поддержку наших продовольственных культур, растений и деревьев, хранение углерода, а также фильтрацию воды. Они необходимы для нашего благополучия и выживания.

Почва обеспечивает нам ряд важных преимуществ — так называемые «экосистемные товары и услуги» (© Blum)

Эрозия: потеря верхнего слоя почвы

Почва может разлагаться по разным причинам, которые могут быть связаны, среди прочего, с ее плодородием, количеством органического вещества в ней или ее структурой. Например, водная или ветровая эрозия являются движущими силами деградации почвы. Они возникают, когда голая почва подвергается воздействию погодных условий в результате вырубки растений или деревьев, которые раньше покрывали и защищали ее.Сильные ветры и дожди могут смыть поверхностные слои почвы — верхний слой почвы — и сдувать или смывать его где-нибудь в другом месте. Таким образом может быть потеряна большая часть того ценного органического вещества, которое в основном находится в верхнем слое почвы.

Когда поверхность почвы обнажена, дожди могут смыть богатый питательными веществами верхний слой почвы. Это называется водной эрозией и является одним из примеров деградации почвы, вызванной деятельностью человека (© Farmers Weekly)

Деградация почвы часто напрямую связана с деятельностью человека.В настоящее время мы несем ответственность за уничтожение самого ресурса, который нам нужен для нашего выживания и благополучия. Подумайте о промышленной деятельности, расширении городов и, самое главное, о традиционном сельском хозяйстве.

Деградация почвы в результате монокультурного земледелия

Традиционное земледелие в основном осуществляется с помощью долгосрочных интенсивных монокультур — представьте себе фермерский участок, на котором выращивают только одну культуру. Нетрудно представить, как это может повредить почву. Конкретному растению нужны определенные питательные вещества. Другое растение того же типа, конечно, потребует точно таких же.Когда один и тот же участок земли обрабатывается одним и тем же типом сельскохозяйственных культур в течение длительного времени и без перерывов, соответствующие питательные вещества истощаются. Затем их нужно добавить вручную. В традиционном сельском хозяйстве это означает: синтетические удобрения.

Фермы-монокультуры часто требуют тонны химических веществ для обеспечения питательными веществами или уничтожения вредителей и сорняков (© Le Devoir)

Убийство вместо выращивания

У синтетического удобрения много недостатков. Что наиболее важно, это вредит живым организмам в почве и приводит к усилению роста нежелательных сорняков.Поскольку они считаются вредными для сельскохозяйственных культур — они конкурируют за одни и те же питательные вещества — они будут уничтожены химическими гербицидами. Опять же, они оказывают негативное воздействие на почву.

Многие из этих гербицидов являются хелатами и связывают важные металлы. Однако растениям они нужны для борьбы с болезнями, и они больше не могут получить к ним доступ. Теперь фермерам нужно распылять фунгициды — угадайте, что? — повредите почву, СНОВА. Они убивают полезные живые организмы. Как видите, мы попадаем в нисходящую спираль, по которой почва становится все менее и менее способной поддерживать сами наши растения.Посмотрите это отличное видео, если хотите узнать о нем больше.

Когда почва становится кислой: подкисление

Как мы видели ранее, чрезвычайно кислые или щелочные почвы не подходят для производства продуктов питания. Многие важные культуры вряд ли могут вырасти в таких условиях. В частности, кислые почвы часто возникают в результате деятельности человека. Подкисление почвы происходит естественным путем, но этот процесс идет очень медленно. Опять же, виноват в том, что обычное сельское хозяйство ускоряет его, являясь самим создателем большей части нашей еды.

Монокультура озимой пшеницы, выращенной на кислой почве (© Вашингтонский государственный университет)

Сельское хозяйство способствует подкислению двумя разными способами.Первый — синтетическое удобрение. Например, азот является одним из важнейших питательных веществ для сельскохозяйственных культур, и его часто добавляют в удобрения, чтобы сделать почвы более кислыми. В первую очередь, это удобрения на основе аммония, изготовленные из газа, которые оказывают наибольшее воздействие.

Второй — удаление выращенных растений из почвы, что нарушает круговорот питательных веществ. Растительный материал обычно слабощелочной. В природе, когда растения умирают, они естественным образом разлагаются, что возвращает почву щелочность и, следовательно, уравновешивает кислотность почвы.В сельском хозяйстве эти щелочные материалы уносятся при уборке урожая и выпасом скота и часто не возвращаются в почву. В конечном итоге он становится кислым.

Обработка почвы: раздирание почвы

Еще один важный пример того, как мы буквально повреждаем почву, — это обработка почвы. В традиционном сельском хозяйстве фермеры взбалтывают почву после сбора последнего урожая, чтобы подготовить свой участок для посадки новых семян каждый год. Вы, наверное, видели, как ваш местный фермер вспахивает свои поля с помощью такого трактора:

Обработка почвы — это процесс вскрытия верхнего слоя почвы.Она нарушает жизнь в почве, разрушает ее структуру и увеличивает эрозию почвы (© Castongia)

Хотя это может показаться хорошей идеей (не так ли?), Обработка почвы на самом деле во многих отношениях вредит почве. Например, он разрушает его структуру и снижает способность проникать и удерживать воду. Таким образом, вся хорошая работа, которую проделали наши органические помощники по бурению и копанию, уничтожается за доли секунды.

Так называемые «агрегаты почвы» — комки почвы с порами между ними — обычно образуют структуру хорошей почвы, и для ее развития требуются годы.Обработка почвы давит их, как щелкунчик. Кроме того, он уменьшает количество органических веществ в почве и приводит к потере важных питательных веществ. Короче говоря, он приносит больше плохого, чем хорошего.

Развитие биологии почвы во избежание ее деградации

Теперь мы увидели, как распространенные сегодня методы ведения сельского хозяйства ответственны за «потерю» здоровых почв. Хотя эта тема может занять целые книги, гораздо больше воодушевляет поиск решений, а не проблем. Итак, как мы можем избежать деградации почвы?

Ответы кроются в самой природе.Как мы видели ранее, важно, чтобы в вашей почве было большое количество и разнообразие грибов, бактерий и микроорганизмов, чтобы поддерживать ее в здоровом состоянии. Это наши лучшие помощники в создании условий, которые лучше всего подходят для производства продуктов питания, хранения углерода, инфильтрации воды и всех других услуг, которые мы требуем от наших почв. Чтобы наша почва не деградировала, нам нужно сделать ее комфортным жилищем для этих человечков. Итак, как нам сохранить их там, где мы хотим?

Хотя они могут выглядеть не слишком привлекательно, нам необходимо поддерживать в почве изобилие дождевых червей и друзей (© In Chemistry)

Поскольку предоставление бесплатного Wi-Fi, кофе и обмен книгами вряд ли увенчаются успехом, нам нужно придумать что-то получше. .К счастью, есть множество практик, которые оказались более привлекательными. Вот три основных принципа, которым вы можете следовать, чтобы стать лучшим хозяином.

1. Сведите к минимуму нарушение почвы.

Это очень просто: не разрушайте то, что вам нужно. Обработка почвы — лишь один из примеров того, как можно повредить структуру почвы. Другой называется уплотнением, который описывает процесс движения тяжелой техники, такой как тракторы, по почве. Тем самым они «уплотняют» почву, разрушая ее структуру.

Представьте, что корень пытается проникнуть в почву, чтобы добраться до ценных питательных веществ. Он может столкнуться либо с рыхлым материалом, заполненным маленькими туннелями и трещинами, либо со стеной спрессованной земли, представляющей непреодолимый барьер. Таким образом, минимизация использования тяжелой техники и обработки почвы является ключом к сохранению здоровой почвы.

2. Поддержание органического почвенного покрова

Если вы хотите поддерживать в почве здоровую популяцию ползучих насекомых, вам нужно дать им пищу.Лучше всего это делать, покрыв землю мертвыми или живыми растительными материалами, листьями, мульчей и / или навозом. Затем наши органические помощники разлагают эти материалы, превращая их в богатый питательными веществами перегной, который растения могут усвоить. Таким образом, они процветают и смешиваются с почвой в огромных количествах, что помогает поддерживать хорошую структуру почвы.

Постоянный почвенный покров, например, из мертвых растительных материалов имеет решающее значение для поддержания здоровья почвы (© Daily News)

Почвенный покров имеет еще одно преимущество.Это помогает удерживать воду в почве, особенно в более сухом климате, которая в противном случае испарялась бы в воздух. Благодаря этой органической «крышке» наверху он дольше остается доступным для растений.

3. Диверсифицировать заводы

Чем больше у вас разнообразия растений, тем плодороднее и устойчивее становится ваша почва. Логично, что разные культуры нуждаются в разных питательных веществах, что предотвращает истощение отдельных питательных веществ. В сельском хозяйстве есть два простых подхода к достижению большего разнообразия: севооборот — выращивание разных культур на одном участке земли в разные сезоны — и совмещение культур — одновременное выращивание нескольких культур.Оба имеют положительное воздействие на почву.

Совмещение культур увеличивает биоразнообразие почвы, предотвращает эрозию и снижает конкуренцию за питательные вещества (© Asian Scientist)

Агролесоводство: работа с разнообразием и многолетними растениями

Есть много других вариантов увеличения разнообразия вашего участка. Например, агролесоводство выходит за рамки этого, создавая систему изобилия, за которую будет благодарна каждая почва. Его разнообразие растений обычно выше, чем у большинства обычных систем.

Обычно он работает с многолетними растениями — деревьями и растениями, которые необходимо пересаживать раз в (или каждую секунду) год, — что оставляет еще больше питательных веществ в земле, предотвращает подкисление и создает большую сеть в почве.

Восстановление деградированных почв естественными средствами

Предотвращение деградации почвы до того, как это произойдет, — довольно прямолинейная и относительно простая процедура. Решения уже есть, и их не сложно применить — конечно, в зависимости от вашей индивидуальной ситуации.

Но что, если почва уже деградировала? Что, если за ним годами неправильно ухаживали, почти не осталось верхнего слоя почвы, а структуру можно сравнить с бетонным блоком? Есть ли способ реанимировать нашего земного пациента, когда он уже «умер»?

Предотвращение деградации почвы — это одно, но что, если ваша почва уже «мертвая»? (© Umwelt Bundesamt)

Экологическая сукцессия: Естественное восстановление почвы

В природе, когда происходит нарушение — скажем, лесной пожар или шторм — разрушающее экосистему, оно восстанавливается.Это происходит в процессе экологической сукцессии.

Обычно сначала появляются специализированные, более мелкие виды, которые создают более благоприятные условия для других более крупных, которые затем следуют за ними, и подготавливают почву для еще более крупных растений. Это продолжается до тех пор, пока не будет достигнута последняя стадия — сообщество кульминации. В Центральной Европе, например, это будет лес.

Пионеры готовят почву

Первые вернувшиеся растения — это виды-первопроходцы, которые специализируются на том, чтобы селиться и выжить в очень суровых условиях.Как только эти лидеры установлены, они подготавливают почву для других с помощью магии фотосинтеза. Они поглощают солнечный свет и превращают его в сахара, привлекающие живые организмы.

Их будет постепенно расти, делая все больше и больше питательных веществ доступными для растений. Пионеры также обеспечивают тень и защиту от ветра, что помогает расти более чувствительным растениям.

Следовательно, большая часть экологической сукцессии происходит в почве. Добавляется больше органических веществ, и важные организмы (повторно) утверждаются.

Реконструкция верхнего слоя почвы

Медленно, но верно это место станет более пригодным для жизни и для других растений. Когда эти занявшие второе место становятся больше, они неблагодарно побеждают пионеров. Они умирают и сами становятся естественными удобрениями, опять же, поддерживая преобразование верхнего слоя почвы.

Мертвый материал попадает в почву, а живые организмы возвращаются, чтобы питаться ею, разлагать ее и превращать в питательные вещества. Этот процесс повторяется несколько раз, пока экосистема становится больше, сложнее и разнообразнее.Хотя могут пройти десятилетия или даже миллионы лет (после массового вымирания), пока сообщество кульминации не восстановится.

Ручное ускорение последовательности

Когда вы полагаетесь на свою почву для производства продуктов питания, у вас, вероятно, не будет пары десятилетий, и уж тем более миллионов лет. Вам нужно будет найти способы ускорить эту последовательность и создать почву, поддерживающую ваши растения.

Очевидное решение — обратиться в местный фермерский магазин. Вы можете купить много синтетических азотных, калийных и фосфорных удобрений и залить ими почву.Это совсем не восстановит вашу почву, но может сохранить жизнь вашим растениям на короткое время.

Азотные удобрения производятся из газа, они создают выбросы CO2 и не помогают в восстановлении деградированной почвы (© Net Nebraska)

Однако у этого есть несколько недостатков. Это очень дорого, и вам придется регулярно повторять этот процесс. Кроме того, он может убить последние полезные организмы в вашей почве, привести к ее подкислению и поддержать паршивую структуру почвы. Так что, в конце концов, вы будете платить много денег и по-прежнему получать неутешительные суммы.

Органические материалы, возвращающие почве жизнь.

Гораздо лучшее решение — использовать органические материалы для работы с экологической преемственностью, а не против нее, и, таким образом, для ее ускорения. Главное — как можно быстрее восстановить плодородный верхний слой почвы с помощью множества органических материалов и организмов. Часто почва все еще содержит минералы, но растения не могут получить к ним доступ, потому что биология почвы отсутствует.

Многие природные материалы могут помочь вернуть жизнь в почву.Вот некоторые из самых полезных, все из которых увеличивают содержание органических веществ в почве. Они гораздо менее растворимы, чем синтетические удобрения, что означает, что они не легко проникают в почву:

• Известь: Известь изготавливается из измельченного известняка или мела. Это помогает повысить уровень pH вашей почвы, делая ее менее кислой. Растения получают лучший доступ к питательным веществам благодаря известкованию.
• Наземная штукатурка: Наземная штукатурка, также называемая «гипсом», представляет собой измельченный скальный материал.Улучшает структуру почвы, создает нейтральный pH и поддерживает органическое вещество почвы.
• Каменная пыль: Другой измельченный скальный материал, содержащий большое количество минералов, которые могли быть потеряны в результате эрозии, выщелачивания или интенсивного земледелия.

Каменная пыль — это естественная поправка на почву, содержащая множество полезных минералов (© Eartheasy)

• Компост: Вы, наверное, слышали об этом. Это разложившийся органический материал — может быть ваш кухонный мусор — который разбрасывается по почве для создания ценного верхнего слоя почвы и добавления питательных веществ.
• Мульча: Мульчу можно использовать в качестве почвопокровного материала. Это может быть кора, солома, листовой материал или опилки, чтобы поддерживать почву влажной, предотвращать эрозию и кормить почву.

Естественный путь к здоровой почве

В частности, каменная пыль, известь и штукатурка снижают кислотность почвы, увеличивают доступность питательных веществ для растений, а также подавляют токсичные элементы. Это помогает более ранним растениям установить и дать толчок экологической сукцессии.Важно отметить, что эти поправки — это лишь кратчайший путь, но не долгосрочное решение.

В центре внимания всегда должно быть возвращение и поддержание процветающей биологии почвы (© Agri-Organic)

Акцент всегда должен делаться на запуске процветающей биологии почвы. Максимальное разнообразие растений, постоянный почвенный покров, минимальное нарушение почвенного покрова и использование многолетних растений поможет и ускорит восстановление биологии почвы. Таким образом, будет восстановлена ​​здоровая почва.

Деградацию почвы можно предотвратить и исправить.

Теперь мы увидели, что почва — это больше, чем просто палки и камни. Мы увидели, что это один из наших самых важных ресурсов, который не только отвечает за выращивание продуктов питания, но также борется с изменением климата и фильтрует нашу воду. Фактически, здоровая почва имеет огромное значение для нашего благополучия и всей жизни на Земле.

К сожалению, мы также увидели, что в настоящее время мы плохо относимся к нему. Традиционное сельское хозяйство, о котором следует знать лучше всех, сейчас является основной причиной страданий наших почв.Использование синтетических удобрений, обработка почвы и монокультурное земледелие приводят к их истощению и уничтожению.

К счастью, есть решения, и они готовы к использованию. Такие принципы, как диверсификация растений, почвенный покров, отсутствие нарушения почвы и, что наиболее важно, работа с природой, а не против нее, оказались чрезвычайно полезными. Понятно, что процветающая жизнь в почве является ключевым моментом, и мы знаем, как сохранить И принести ее туда. Да начнется «Жуковая жизнь»!

Агролесоводство — это система управления землепользованием, в основе которой лежат все эти принципы.Он оказался исключительно полезным для создания и поддержания здоровой почвы, а вместе с тем и для процветающих и продуктивных систем для людей и природы. Мы, компания reNature, продвигаем и поддерживаем распространение систем агролесоводства по всему миру. Посетите наш веб-сайт и воспользуйтесь ссылкой , чтобы поддержать наше дело.

Читать далее

Анаэробное бактериальное разложение макромолекул белков и липидов в субарктических морских отложениях

1.

Hop H, Pearson T, Hegseth EN, Kovacs KM, Wiencke C, Kwasniewski S, et al. Морская экосистема Конгс-фьорда, Шпицберген. Polar Res. 2002; 21: 167–208.

Google ученый

2.

Арндт С., Йоргенсен Б. Б., Ла Роу Д. Е., Мидделбург Дж. Дж., Панкост Р. Д., Ренье П. Количественная оценка разложения органического вещества в морских отложениях: обзор и синтез. Earth-Sci Rev.2013; 123: 53–86.

CAS Google ученый

3.

Данне Дж. П., Сармьенто Дж. Л., Гнанадезикан А. Синтез глобального экспорта частиц с поверхности океана и циклического движения внутри океана и на морском дне. Glob Biogeochem Cycles. 2007; 21: 1–16.

Google ученый

4.

Christian JR, Karl DM. Бактериальные эктоферменты в морских водах: соотношения активности и температурные реакции в трех океанографических провинциях. Limnol Oceanogr. 1995; 40: 1042–9.

CAS Google ученый

5.

Fabiano M, Pusceddu A. Общее количество и гидролизуемые твердые органические вещества (углеводы, белки и липиды) на прибрежной станции в заливе Терра Нова (море Росса, Антарктида). Polar Biol. 1998. 19: 125–32.

Google ученый

6.

Bradley JA, Amend JP, LaRowe DE. Некромасса как ограниченный источник энергии для микроорганизмов в морских отложениях. J Geophys Res Biogeosci. 2018; 123: 577–90.

Google ученый

7.

Wehrmann LM, Formolo MJ, Owens JD, Raiswell R, Ferdelman TG, Riedinger N и др. Видообразование и круговорот железа и марганца в отложениях высокоширотных фьордов, подверженных ледниковому влиянию (Западный Шпицберген, Шпицберген): свидетельство механизма рециркуляции и переноса бентоса. Геохим Космохим Акта. 2014; 141: 628–55.

CAS Google ученый

8.

Burdige DJ. Сохранение органического вещества в морских отложениях: меры контроля, механизмы и дисбаланс в балансах органического углерода отложения? Chem Rev.2007; 107: 467–85.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

9.

Hedges JI, Oades JM. Сравнительная органическая геохимия почв и морских отложений. Org Geochem. 1997. 27: 319–61.

CAS Google ученый

10.

Маккарти М., Пратум Т., Хеджес Дж., Беннер Р. Химический состав растворенного органического азота в океане. Природа. 1997. 390: 150–4.

CAS Google ученый

11.

Веттер Ю.А., Деминг Дж.В. Активность внеклеточных ферментов в полынье Арктический Северо-Восток Уотер. Mar Ecol Prog Ser. 1994; 114: 23–34.

CAS Google ученый

12.

Parsons TR, Stephens K, Strickland JDH. О химическом составе одиннадцати видов морских фитопланктеров. Доска J Fish Res может. 1961; 18: 1001–16.

CAS Google ученый

13.

Хадсон Б.Дж., Карис И.Г. Липиды водоросли Спирулина. J Sci Food Agric. 1974. 25: 759–63.

CAS PubMed Google ученый

14.

Wakeham SG, Lee C, Farrington JW, Gagosian RB. Биогеохимия твердых частиц органического вещества в океанах: результаты экспериментов по ловушке наносов. Deep Sea Res A. 1984; 31: 509–28.

CAS Google ученый

15.

Харви Х.Р., Роджер Харви Х., Фаллон Р.Д., Паттон Дж. С..Влияние органического вещества и кислорода на деградацию липидов бактериальных мембран в морских отложениях. Геохим Космохим Акта. 1986; 50: 795–804.

CAS Google ученый

16.

Sousa DZ, Smidt H, Alves MM, Stams AJM. Экофизиология синтрофных сообществ, разлагающих насыщенные и ненасыщенные длинноцепочечные жирные кислоты. FEMS Microbiol Ecol. 2009. 68: 257–72.

CAS PubMed Google ученый

17.

Meyer-Reil L-A. Экологические аспекты ферментативной активности в морских отложениях. Серия Брока / Спрингера в современной биологии; Springer New York New York, NY 1991. стр. 84–95.

18.

Beulig F, Røy H, Glombitza C, Jørgensen BB. Контроль скорости и пути анаэробной деградации органического углерода на морском дне. Proc Natl Acad Sci USA. 2018; 115: 367–72.

CAS PubMed Google ученый

19.

Арности К.Микробные внеклеточные ферменты и морской цикл углерода. Ann Rev Mar Sci. 2011; 3: 401–25.

PubMed Google ученый

20.

Арности С. Контрастные модели активности пептидаз в морской воде и отложениях: пример из арктических фьордов Свальбарда. Mar Chem. 2015; 168: 151–6.

CAS Google ученый

21.

Муйзер Г., Стамс АЙМ. Экология и биотехнология сульфатредуцирующих бактерий.Nat Rev Microbiol. 2008; 6: 441–54.

CAS PubMed Google ученый

22.

Webster G, Watt LC, Rinna J, Fry JC, Evershed RP, Parkes RJ, et al. Сравнение стабильных изотопов ДНК и фосфолипидных жирных кислот для изучения функционального разнообразия прокариот в сульфатредуцирующих обогащенных суспензиях морских отложений. Environ Microbiol. 2006; 8: 1575–89.

CAS PubMed Google ученый

23.

Мюллер А.Л., Пеликан С., де Резенде Дж. Р., Васмунд К., Путц М., Гломбица С. и др. Бактериальные взаимодействия при последовательной деградации цианобактериальной некромассы в сульфидных морских отложениях Арктики. Environ Microbiol. 2018; 20: 2927–40.

PubMed PubMed Central Google ученый

24.

Knoblauch C, Sahm K, Jørgensen BB. Психрофильные сульфатредуцирующие бактерии, выделенные из постоянно холодных морских арктических отложений: описание Desulfofrigus oceanense gen.nov., sp. nov., Desulfofrigus fragile sp. nov., Desulfofaba gelida gen. nov., sp. nov., Desulfotalea psychorophila gen. nov., sp. ноя и Desulfotalea arctica sp. ноя Int J Syst Bacteriol. 1999; 49: 1631–43.

CAS PubMed Google ученый

25.

Сам К., Кноблаух К., Аманн Р. Филогенетическая принадлежность и количественная оценка психрофильных сульфатредуцирующих изолятов в морских арктических отложениях.Appl Environ Microbiol. 1999; 65: 3976–81.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

26.

Na H, Lever MA, Kjeldsen KU, Schulz F, Jørgensen BB. Не культивируемые desulfobacteraceae и кренархеотическая группа C3 включают 13C-ацетат в прибрежных морских отложениях. Environ Microbiol Rep. 2015; 7: 614–22.

CAS PubMed Google ученый

27.

Васмунд К., Мусманн М., Лой А.Жизнь серная: микробная экология круговорота серы в морских отложениях. Environ Microbiol Rep. 2017; 9: 323–44.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

28.

Ллойд К.Г., Шрайбер Л., Петерсен Д.Г., Кьельдсен К.Ю., Левер М.А., Стин А.Д. и др. Преобладающие в морских отложениях археи разрушают детритные белки. Природа. 2013; 496: 215–8.

CAS PubMed Google ученый

29.

Zinke LA, Glombitza C, Bird JT, Røy H, Jørgensen BB, Lloyd KG, et al. Потенциал микробной деградации органического вещества в отложениях Балтийского моря под влиянием условий осадконакопления и геохимии in situ. Appl Environ Microbiol. 2018; 85: e02164–18.

Google ученый

30.

Орси В.Д., Ричардс Т.А., Фрэнсис В.Р. Прогнозируемые микробные секретомы и их целевые субстраты в морских отложениях. Nat Microbiol. 2018; 3: 32–7.

CAS PubMed Google ученый

31.

Бейкер Б.Дж., Лазар С.С., Теске А.П., Дик Г.Дж. Геномное разрешение связей в круговороте углерода, азота и серы среди широко распространенных бактерий в эстуарных осадках. Микробиом. 2015; 3:14.

PubMed PubMed Central Google ученый

32.

Бойер Т., Левитус С., Гарсия Х., Локарнини Р.А., Стивенс С., Антонов Дж. Объективный анализ годовой, сезонной и месячной температуры и солености Мирового океана на сетке 0,25. Int J Climatol.2005; 25: 931–45.

Google ученый

33.

Glombitza C, Jaussi M, Røy H, Seidenkrantz M-S, Lomstein BA, Jørgensen BB. Формиат, ацетат и пропионат как субстраты для восстановления сульфатов в субарктических отложениях Юго-Западной Гренландии. Front Microbiol. 2015; 6: 846.

PubMed PubMed Central Google ученый

34.

Грауэ Дж., Энгелен Б., Ципионка Х. Деградация цианобактериальной биомассы в бескислородных приливно-отстойных отложениях: исследование метаболических процессов и изменений сообществ в микромире.ISME J. 2012; 6: 660–9.

CAS PubMed Google ученый

35.

Newport PJ, Nedwell DB. Механизмы ингибирования видов Desulfovibrio и Desulfotomaculum селенатом и молибдатом. J Appl Bacteriol. 1988; 65: 419–23.

CAS Google ученый

36.

Дановаро Р., Делль’Анно А., Фабиано М. Биодоступность органического вещества в отложениях Абиссальной равнины Поркьюпайн, северо-восток Атлантики.Mar Ecol Prog Ser. 2001; 220: 25–32.

CAS Google ученый

37.

Пушедду А., Делль’Анно А., Фабиано М., Дановаро Р. Количество и биодоступность органического вещества донных отложений как признаки трофического статуса бентоса. Mar Ecol Prog Ser. 2009; 375: 41–52.

CAS Google ученый

38.

Glombitza C, Pedersen J, Røy H, Jørgensen BB. Прямой анализ летучих жирных кислот в поровых водах морских отложений методом двумерной ионной хроматографии-масс-спектрометрии.Методы Limnol Oceanogr. 2014; 12: 455–68.

CAS Google ученый

39.

Dumont MG, Radajewski SM, Miguez CB, McDonald IR, Murrell JC. Идентификация полного оперона метанмонооксигеназы из почвы путем сочетания исследования стабильных изотопов и метагеномного анализа. Environ Microbiol. 2006; 8: 1240–50.

CAS PubMed Google ученый

40.

Neufeld JD, Vohra J, Dumont MG, Lueders T., Manefield M, Friedrich MW, et al.Исследование стабильных изотопов ДНК. Nat Protoc. 2007; 2: 860–6.

CAS PubMed Google ученый

41.

Pelikan C, Herbold CW, Hausmann B, Müller AL, Pester M, Loy A. Анализ разнообразия сульфит- и сульфатредуцирующих микроорганизмов с помощью мультиплексного секвенирования ампликонов dsrA и dsrB с использованием новых праймеров и имитационной биоинформатики, оптимизированной для сообщества . Environ Microbiol. 2016; 18: 2994–3009.

CAS PubMed Google ученый

42.

Herbold CW, Pelikan C, Kuzyk O, Hausmann B, Angel R, Berry D и др. Гибкий и экономичный подход к штрих-кодированию для высоко мультиплексного секвенирования ампликонов различных генов-мишеней. Front Microbiol. 2016; 6: 731.

Google ученый

43.

Quast C, Pruesse E, Yilmaz P, Gerken J, Schweer T., Yarza P, et al. Проект базы данных генов рибосомной РНК SILVA: улучшенная обработка данных и веб-инструменты. Nucleic Acids Res. 2013; 41: D590–6.

CAS PubMed Google ученый

44.

Тихонов М., Leach RW, Wingreen NS. Интерпретация метагеномных данных 16S без кластеризации для достижения разрешения суб-OTU. ISME J. 2015; 9: 68–80.

PubMed Google ученый

45.

Лав М.И., Хубер В., Андерс С. Умеренная оценка кратного изменения и дисперсии данных РНК-seq с помощью DESeq2. Genome Biol. 2014; 15: 550.

PubMed PubMed Central Google ученый

46.

Орси В.Д., Смит Дж. М., Лю С., Лю З., Сакамото С. М., Уилкен С. и др. Разнообразные некультивируемые бактерии и археи, лежащие в основе круговорота растворенного белка в океане. ISME J. 2016; 10: 2158–73.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

47.

Лагкувардос И., Джозеф Д., Капфхаммер М., Гиритли С., Хорн М., Халлер Д. и др.IMNGS: всеобъемлющий открытый ресурс обработанных микробных профилей 16S рРНК для исследований экологии и разнообразия. Научный доклад 2016; 6: 33721.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

48.

Peng Y, Leung HCM, Yiu SM, Chin FYL. IDBA-UD: de novo ассемблер для данных одноклеточного и метагеномного секвенирования с сильно неравномерной глубиной. Биоинформатика. 2012; 28: 1420–8.

CAS Google ученый

49.

Банкевич А., Нурк С., Антипов Д., Гуревич А.А., Дворкин М., Куликов А.С. и др. SPAdes: новый алгоритм сборки генома и его приложения для секвенирования отдельных клеток. J Comput Biol. 2012; 19: 455–77.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

50.

Li H, Durbin R. Быстрое и точное согласование коротких считываний с помощью преобразования Барроуза-Уиллера. Биоинформатика. 2009; 25: 1754–60.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

51.

Ли Х, Хандакер Б., Вайсокер А, Феннелл Т., Руан Дж., Гомер Н. и др. Формат выравнивания / карты последовательностей и SAMtools. Биоинформатика. 2009; 25: 2078–9.

PubMed PubMed Central Google ученый

52.

Канг Д.Д., Фрула Дж., Иган Р., Ван З. MetaBAT, эффективный инструмент для точной реконструкции отдельных геномов сложных микробных сообществ. PeerJ. 2015; 3: e1165.

PubMed PubMed Central Google ученый

53.

Wu YW, Simmons BA, Singer SW. MaxBin 2.0: автоматический алгоритм биннинга для восстановления геномов из нескольких наборов метагеномных данных. Биоинформатика. 2016; 32: 605–7.

CAS Google ученый

54.

Alneberg J, Bjarnason BS, de Bruijn I., Schirmer M, Quick J, Ijaz UZ, et al. Объединение метагеномных контигов по охвату и составу. Нат методы. 2014; 11: 1144–6.

CAS Google ученый

55.

Sieber CMK, Probst AJ, Sharrar A, Thomas BC, Hess M, Tringe SG и др. Восстановление геномов из метагеномов с помощью стратегии дерепликации, агрегации и подсчета очков. Nat Microbiol. 2018; 3: 836–43.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

56.

Olm MR, Brown CT, Brooks B, Banfield JF. dRep: инструмент для быстрого и точного сравнения геномов, позволяющий улучшить восстановление генома из метагеномов посредством дерепликации.ISME J. 2017; 11: 2864–8.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

57.

Parks DH, Imelfort M, Skennerton CT, Hugenholtz P, Tyson GW. CheckM: оценка качества микробных геномов, полученных из изолятов, отдельных клеток и метагеномов. Genome Res. 2015; 25: 1043–55.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

58.

Parks DH, Chuvochina M, Waite DW, Rinke C, Skarshewski A, Chaumeil P-A, et al.Стандартизированная бактериальная таксономия, основанная на филогении генома, существенно меняет древо жизни. Nat Biotechnol. 2018; 36: 996–1004.

CAS PubMed Google ученый

59.

Chaumeil PA, Mussig AJ, Hugenholtz P, Parks DH. GTDB-Tk: набор инструментов для классификации геномов с помощью базы данных таксономии генома. Биоинформатика. 15 ноября 2019 г .: btz848 . https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btz848. Epub впереди печати. PMID: 31730192.

60.

Nguyen L-T, Schmidt HA, von Haeseler A, Minh BQ. IQ-TREE: быстрый и эффективный стохастический алгоритм для оценки филогении максимального правдоподобия. Mol Biol Evol. 2015; 32: 268–74.

CAS Google ученый

61.

Minh BQ, Nguyen MAT, von Haeseler A. Сверхбыстрая аппроксимация для филогенетического бутстрапа. Mol Biol Evol. 2013; 30: 1188–95.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

62.

Letunic I, Bork P. Interactive Tree Of Life (iTOL): онлайн-инструмент для отображения и аннотации филогенетического дерева. Биоинформатика. 2007; 23: 127–8.

CAS PubMed Google ученый

63.

Джейн С., Родригес-Р. Л., Филлиппи А. М., Константинидис К. Т., Алуру С. Анализ высокопроизводительного ANI 90K прокариотических геномов выявляет четкие границы между видами. Nat Commun. 2018; 9: 5114.

PubMed PubMed Central Google ученый

64.

Vallenet D, Calteau A, Cruveiller S, Gachet M, Lajus A, Josso A и др. MicroScope в 2017 году: расширяющийся и развивающийся интегрированный ресурс для общественной экспертизы микробных геномов. Nucleic Acids Res. 2017; 45: D517–28.

CAS PubMed Google ученый

65.

Азиз Р.К., Бартельс Д., Бест А.А., ДеДжонг М., Дисз Т., Эдвардс Р.А. и др. Сервер RAST: быстрое аннотирование с использованием технологии подсистем. BMC Genomics. 2008; 9: 75.

PubMed PubMed Central Google ученый

66.

Buchfink B, Xie C, Huson DH. Быстрое и чувствительное выравнивание белков с помощью DIAMOND. Нат методы. 2015; 12: 59–60.

CAS PubMed Google ученый

67.

Джонс П., Биннс Д., Чанг Х.Й., Фрейзер М., Ли В., МакАнулла С. и др. InterProScan 5: классификация функций белков в масштабе генома. Биоинформатика. 2014; 30: 1236–40.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

68.

Финн Р.Д., Бейтман А., Клементс Дж., Коггилл П., Эберхардт Р.Й., Эдди С.Р. и др. Pfam: база данных семейств белков. Nucleic Acids Res. 2013; 42: D222–30.

PubMed PubMed Central Google ученый

69.

Хафт Д.Х., Селенгут Д.Д., Уайт О. База данных семейств белков TIGRFAM. Nucleic Acids Res. 2003. 31: 371–3.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

70.

Консорциум UniProt. UniProt: универсальная база знаний о белках. Nucleic Acids Res. 2018; 46: 2699.

PubMed PubMed Central Google ученый

71.

Kall L, Krogh A, Sonnhammer ELL. Преимущества комбинированной трансмембранной топологии и предсказания сигнальных пептидов — веб-сервер Phobius. Nucleic Acids Res. 2007; 35: W429–32.

PubMed PubMed Central Google ученый

72.

Yu NY, Wagner JR, Laird MR, Melli G, Rey S, Lo R и др. PSORTb 3.0: улучшенное предсказание субклеточной локализации белка с уточненными подкатегориями локализации и прогностическими возможностями для всех прокариот. Биоинформатика. 2010; 26: 1608–15.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

73.

Rawlings ND. MEROPS: база данных пептидаз. Nucleic Acids Res. 2000; 28: 323–5.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

74.

Lenfant N, Hotelier T, Velluet E, Bourne Y, Marchot P, Chatonnet A. ESTHER, база данных α / β-гидролазного складчатого суперсемейства белков: инструменты для изучения разнообразия функций. Nucleic Acids Res. 2013; 41: D423–9.

CAS PubMed Google ученый

75.

Lombard V, Golaconda Ramulu H, Drula E, Coutinho PM, Henrissat B. База данных по углеводно-активным ферментам (CAZy) в 2013 г. Nucleic Acids Res. 2014; 42: D490–95. https: // doi.org / 10.1093 / nar / gkt1178.

76.

Альтшул С.Ф., Мэдден Т.Л., Шеффер А.А., Чжан Дж., Чжан З., Миллер В. и др. Gapped BLAST и PSI-BLAST: новое поколение программ поиска по базам данных белков. Nucleic Acids Res. 1997; 25: 3389–402.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

77.

Стин А.Д., Кеворкян Р.Т., Берд Дж. Т., Домбровски Н., Бейкер Б. Дж., Хаген С. М. и др. Кинетика и особенности внеклеточных пептидаз в подземных отложениях устья реки Уайт-Оук, Северная Каролина.Appl Environ Microbiol. 2019; 85: e00102–19.

78.

Pruesse E, Peplies J, Glöckner FO. SINA: точное высокопроизводительное выравнивание множественных последовательностей генов рибосомной РНК. Биоинформатика. 2012; 28: 1823–9.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

79.

Цена МН, Дехал П.С., Аркин А.П. FastTree 2 — деревья приблизительно максимального правдоподобия для больших трасс. PLoS ONE. 2010; 5: e9490.

PubMed PubMed Central Google ученый

80.

Бергер С.А., Кромпасс Д., Стаматакис А. Производительность, точность и веб-сервер для эволюционного размещения считываний коротких последовательностей с максимальной вероятностью. Syst Biol. 2011; 60: 291–302.

PubMed PubMed Central Google ученый

81.

Стаматакис А. RAxML версия 8: инструмент для филогенетического анализа и постанализа крупных филогений. Биоинформатика. 2014; 30: 1312–3.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

82.

Zhao J-S, Manno D, Hawari J. Psychrilyobacter atlanticus gen. nov., sp. nov., морской член филума Fusobacteria , который продуцирует H ₂ и разлагает нитраминные взрывчатые вещества в условиях низких температур. Int J Syst Evol Microbiol. 2009; 59: 491–7.

CAS PubMed Google ученый

83.

Hedges JI, Oades JM. Сравнительная органическая геохимия почв и морских отложений.Org Geochem. 1997. 27: 319–61.

CAS Google ученый

84.

Wakeham SG, Canuel EA. Разложение и сохранение органических веществ в морских отложениях. В кн .: Справочник по химии окружающей среды; Springer Berlin Heidelberg Berlin, Heidelberg 2006. стр. 295–321.

85.

Бьенхольд К., Боэтиус А., Раметт А. Взаимосвязь энергетического разнообразия сложных бактериальных сообществ в арктических глубоководных отложениях. ISME J.2011; 6: 724–32.

PubMed PubMed Central Google ученый

86.

Finke N, Vandieken V, Jørgensen BB. Ацетат, лактат, пропионат и изобутират как доноры электронов для восстановления железа и сульфатов в морских отложениях Арктики, Шпицберген. FEMS Microbiol Ecol. 2007; 59: 10–22.

CAS PubMed Google ученый

87.

Glombitza C, Egger M, Røy H, Jørgensen BB.Контроль концентрации летучих жирных кислот в морских отложениях (Балтийское море). Геохим Космохим Акта. 2019; 258: 226–41.

CAS Google ученый

88.

Кубо К., Ллойд К.Г., Ф. Биддл Дж., Аманн Р., Теске А., Книттель К. Археи из разной кренархеотической группы многочисленны, разнообразны и широко распространены в морских отложениях. ISME J. 2012; 6: 1949–65.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

89.

Като К., Мисава К., Кума К., Мията Т. MAFFT: новый метод быстрого совмещения множественных последовательностей, основанный на быстром преобразовании Фурье. Nucleic Acids Res. 2002. 30: 3059–66.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

Ухудшение производительности — обзор

Протокол управления передачей (TCP) [8,9] — это транспортный протокол, который предоставляет услуги с подключенным режимом для верхних уровней (сеанс, представление и приложение, а также сокращение OSI).TCP обеспечивает надежное обслуживание и поэтому используется для сквозной пакетной связи между двумя компьютерами. TCP управляет потоком передатчика, чтобы не превышать пропускную способность сети (контроль перегрузки), и гарантирует, что этот поток не будет слишком большим по сравнению с потоком приемника (управление потоком). Чтобы удовлетворить все эти свойства, TCP основан на нескольких механизмах: подтверждение использования (ACK), механизмы управления потоком, механизм управления перегрузкой, основанный на медленном запуске, предотвращении перегрузки, быстрой повторной передаче и алгоритмах быстрого восстановления.

2.1 Проблемы TCP в MANET

Снижение производительности протокола TCP происходит из-за нескольких проблем [9–11]. Беспроводной носитель, в отличие от проводного, знает очень высокий BER (коэффициент битовых ошибок). В основном это происходит из-за помех и ослабления сигнала, которые повреждают пакет TCP (данные и ACK), вызывая их потерю. Если источник TCP не получает ACK в течение интервала времени ожидания повторной передачи (RTO) после передачи пакета данных, он приходит к выводу, что сеть перегружена, что приведет к повторной передаче потерянного пакета, уменьшая перегрузку. (CWND) до 1, уменьшая порог CWND до половины и удваивая RTO.Повторяющиеся ошибки в канале передачи гарантируют, что CWND источника TCP остается слишком маленьким, а затем вызывает очень низкую скорость передачи и грубое увеличение RTO.

Из-за мобильности узлов путь между источником и назначением TCP может быть прерван в любой момент. Разрыв пути между источником и получателем запускает механизм обнаружения маршрута в источнике, что занимает некоторое время T. В случае T> RTO TCP затем вызывает механизм управления перегрузкой и повторную передачу потерянного пакета.Таким образом, когда обнаруживается новая дорога, скорость передачи остается очень низкой во время фазы медленного старта. Ясно, что такое поведение нежелательно, потому что в очень мобильной среде TCP-соединение никогда не будет иметь возможности использовать максимальную пропускную способность канала для передачи. Когда T ≤ RTO, источник TCP продолжает передавать по новому маршруту, используя старый CWND. Однако старое значение CWND вполне может не быть адаптировано к новой дороге, что приведет к потере взаимосвязи между CWND и скоростью передачи данных, разрешенной дорогой.Действительно, значение CWND старой дороги может быть очень большим для новой, что вызовет внезапную перегрузку сети.

Очень вероятно, что сеть станет разделенной из-за перемещения или остановки одного или нескольких узлов. Если источник и назначение TCP находятся в разных разделах, пакеты от источника будут оставлены сетью, вызывая механизм управления перегрузкой тайм-аута. Если разделение сети занимает много времени, ненужные повторные передачи одних и тех же данных на отключенную станцию ​​удваивают RTO источника, пока оно не достигнет 64 с.Это приведет к неактивности источника в течение длительного времени, даже если связь между TCP-источником и получателем будет сброшена.

Некоторые протоколы маршрутизации поддерживают несколько маршрутов между источником и пунктом назначения (например, TORA), чтобы минимизировать частоту пересчета дорог и распределить нагрузку TCP-соединения на несколько маршрутов. К сожалению, это иногда может вызвать нарушение порядка поступления значительного количества пакетов (ООО) на приемник. Затем это может генерировать повторяющиеся подтверждения для каждого принятого пакета, если NS не соответствует ожидаемому NS.После получения трех дублированных пакетов ACK источник вызывает механизм Fast Retransmit / Fast Recovery (уменьшение CWND и порога до половины CWND). Это излишне снижает скорость передачи и ухудшает производительность сети.

Многие исследователи показали, что протоколы уровня MAC серьезно влияют на производительность TCP. Действительно, природа совместно используемой беспроводной среды в специальной среде заставляет сетевые станции всегда конкурировать за доступ к каналу.Если в определенной области количество узлов очень велико, коллизии будут более частыми, в результате чего узел, который пытается присоединиться к другой станции, после нескольких повторных передач MAC-адреса сделает вывод, что связь разорвана. Это запустит бесполезный механизм обнаружения маршрута.

Кроме того, схема случайного экспоненциального отката стандарта IEEE 802.11 не совсем подходит для ситуации. В самом деле, у него есть серьезные проблемы с равноправием доступа к каналу, когда он отдает предпочтение узлу, который выполнил последнюю успешную передачу, что может привести к монополизации этого узла.

TCP New Reno [13] — это улучшенная версия Reno, которая позволяет избежать многократного сокращения CWND при потере нескольких сегментов из одного окна данных. Был рассмотрен новый Reno TCP, поскольку это ведущий протокол управления перегрузкой в ​​Интернете. Первоначальное окно перегрузки обычно составляет один сегмент. Каждый раз, когда источник New Reno получает пакет подтверждения (ACK), он увеличивает окно перегрузки CWND на один сегмент. При таком подходе размер окна перегрузки увеличивается мультипликативно, удваивая каждое RTT.После достижения порогового значения New Reno переходит в фазу предотвращения перегрузки и, чтобы преодолеть эту ошибку, он сбрасывает свое окно перегрузки на половину значения ssthresh (пороговое значение медленного запуска), а затем увеличивает размер CWND на единицу для каждого RTT, что приводит к снижению производительности и использования Link.

Ваша ДНК может быть деградирована | Thermo Fisher Scientific

• Использование очень старых образцов ДНК
• Использование ДНК, экстрагированной из образцов залитых в парафин, фиксированных формалином
• Повторное замораживание и размораживание образцов ДНК
• Оставление образцов ДНК при комнатной температуре
• Воздействие тепла или физического сдвига образцов ДНК
• Неэффективная очистка образцов ДНК, поэтому остаточная нуклеаза остается

Решение:

Запустите гель агарозы, чтобы определить, не разложилась ли ДНК.Ищите плотную полоску с высокой молекулярной массой; смазывание указывает на деградированную ДНК.

Агарозный гель, окрашенный бромистым этидием, демонстрирует тепловую деградацию геномной ДНК. Этот гель демонстрирует прогрессирующую деградацию с увеличением времени двух образцов геномной ДНК человека, подвергнутых нагреванию при 99 ° C в течение от 0 до 30 минут.

По мере того, как средний размер ДНК в деградированном образце приближается к размеру целевой последовательности, количество образующегося продукта ПЦР уменьшается.Это связано с уменьшением количества интактных шаблонов в диапазоне размеров, необходимых для амплификации. Пример разложения при нагревании проиллюстрирован ниже. Геномная ДНК, деградированная по другим причинам, также даст плохие результаты анализа.

Графики дискриминации аллелей, показывающие эффекты деградации ДНК, вызванной нагреванием.

Факторы, влияющие на деградацию ДНК, включают методы сохранения тканей, воздействие УФ-излучения, температуру, pH и концентрацию солей в окружающей среде (Dean, M.и Баллард, J.W.O., 2001). Существует множество источников геномной ДНК, включая свежую капиллярную кровь, соскоб со щеки, биопсию твердых органов и залитую парафином ткань. В таблице ниже представлены рекомендуемые условия хранения образцов, которые помогают минимизировать деградацию ДНК.

Условия хранения тканей

Тип ткани	Условия хранения
Щечная ткань	Хранить в замороженном виде при температуре от –15 до –25 ° C
Ткань	Немедленно поместите в жидкий азот и храните при –80 ° C или заморозьте и храните
Кровь	Цельная кровь: Хранить в замороженном виде при температуре от –15 до –25˚C Баффи: Хранить в замороженном виде при температуре от –15 до –25˚C

Будьте осторожны при интерпретации результатов, если ДНК существенно разложилась.Если возможно, рассмотрите возможность повторения анализа с использованием свежеприготовленных образцов геномной ДНК.

Мониторинг конечных точек диспетчера трафика Azure

• 22.01.2021
• 15 минут на чтение

В этой статье

Azure Traffic Manager включает встроенный мониторинг конечных точек и автоматическое переключение конечных точек. Эта функция помогает доставлять приложения с высокой доступностью, устойчивые к сбоям конечных точек, включая сбои региона Azure.

Настроить мониторинг конечных точек

Чтобы настроить мониторинг конечных точек, необходимо указать следующие параметры в своем профиле диспетчера трафика:

• Протокол . Выберите HTTP, HTTPS или TCP в качестве протокола, который диспетчер трафика использует при зондировании конечной точки для проверки ее работоспособности. Мониторинг HTTPS не проверяет, действителен ли ваш сертификат TLS / SSL — он только проверяет наличие сертификата.

• Порт .Выберите порт, используемый для запроса.

• Путь . Этот параметр конфигурации действителен только для протоколов HTTP и HTTPS, для которых необходимо указать параметр пути. Предоставление этой настройки для протокола мониторинга TCP приводит к ошибке. Для протоколов HTTP и HTTPS укажите относительный путь и имя веб-страницы или файла, к которому осуществляется мониторинг. Косая черта (/) является допустимой записью для относительного пути. Это значение означает, что файл находится в корневом каталоге (по умолчанию).

• Пользовательские настройки заголовка . Этот параметр конфигурации помогает добавлять определенные заголовки HTTP к проверкам работоспособности, которые диспетчер трафика отправляет конечным точкам под профилем. Пользовательские заголовки могут быть указаны на уровне профиля, чтобы быть применимыми для всех конечных точек в этом профиле и / или на уровне конечных точек, применимых только к этой конечной точке. Вы можете использовать настраиваемые заголовки для проверки работоспособности конечных точек в многопользовательской среде. Таким образом, его можно будет правильно направить к месту назначения, указав заголовок хоста.Вы также можете использовать этот параметр, добавив уникальные заголовки, которые можно использовать для идентификации запросов HTTP (S), инициированных Traffic Manager, и для их обработки по-разному. Вы можете указать до восьми пар заголовок: значение, разделенных запятыми. Например, «заголовок1: значение1, заголовок2: значение2».

• Ожидаемые диапазоны кода состояния . Этот параметр позволяет указать несколько диапазонов кода успеха в формате 200–299, 301–301. Если эти коды состояния получены в ответ от конечной точки при выполнении проверки работоспособности, диспетчер трафика помечает эти конечные точки как работоспособные.Вы можете указать до восьми диапазонов кодов состояния. Этот параметр применим только к протоколам HTTP и HTTPS и ко всем конечным точкам. Этот параметр находится на уровне профиля диспетчера трафика, и по умолчанию значение 200 определяется как код состояния успеха.

• Интервал зондирования . Это значение указывает, как часто конечная точка проверяется на предмет ее работоспособности агентом зондирования диспетчера трафика. Здесь вы можете указать два значения: 30 секунд (нормальное зондирование) и 10 секунд (быстрое зондирование).Если значения не указаны, в профиле устанавливается значение по умолчанию, равное 30 секундам. Посетите страницу ценообразования Traffic Manager, чтобы узнать больше о ценообразовании с быстрым зондированием.

• Допустимое количество отказов . Это значение указывает, сколько сбоев допускает зондирующий агент диспетчера трафика, прежде чем пометить эту конечную точку как неисправную. Его значение может находиться в диапазоне от 0 до 9. Значение 0 означает, что единичный сбой мониторинга может привести к тому, что конечная точка будет помечена как неисправная. Если значение не указано, используется значение по умолчанию 3.

• Тайм-аут зонда . Это свойство указывает время, в течение которого зондирующий агент диспетчера трафика должен ждать, прежде чем считать проверку работоспособности конечной точкой как сбой. Если интервал зондирования установлен на 30 секунд, вы можете установить значение тайм-аута от 5 до 10 секунд. Если значение не указано, используется значение по умолчанию 10 секунд. Если интервал зондирования установлен на 10 секунд, вы можете установить значение тайм-аута от 5 до 9 секунд. Если значение тайм-аута не указано, используется значение по умолчанию 9 секунд.

  Рисунок: Мониторинг конечной точки диспетчера трафика

Как работает мониторинг конечных точек

Когда протокол мониторинга установлен как HTTP или HTTPS, зондирующий агент диспетчера трафика отправляет GET-запрос к конечной точке, используя указанный протокол, порт и относительный путь. Конечная точка считается работоспособной, если зондирующий агент получает ответ 200-OK или любой из ответов, настроенных в диапазоне Ожидаемый код состояния * .Если ответ имеет другое значение или ответ не получен в течение периода ожидания, зондирующий агент диспетчера трафика повторяет попытку в соответствии с настройкой «Допустимое количество сбоев». Если для этого параметра установлено значение 0. Повторные попытки не выполняются, конечная точка помечается как неработоспособная, если количество последовательных сбоев превышает значение параметра «Допустимое количество сбоев».

Если используется протокол мониторинга TCP, зондирующий агент диспетчера трафика создает запрос на соединение TCP, используя указанный порт.Если конечная точка отвечает на запрос ответом на установление соединения, эта проверка работоспособности помечается как успешная. Зондирующий агент диспетчера трафика сбрасывает TCP-соединение. В случаях, когда ответ имеет другое значение или ответ не получен в течение периода ожидания, зондирующий агент диспетчера трафика выполняет повторные попытки в соответствии с настройкой «Допустимое количество сбоев». Если этот параметр равен 0. Повторные попытки не предпринимаются, если количество последовательных сбоев выше, чем значение параметра Допустимое количество сбоев, то эта конечная точка помечается как неработоспособная.

Во всех случаях диспетчер трафика выполняет зондирование из нескольких мест. Последовательный отказ определяет, что происходит в каждом регионе. Вот почему конечные точки получают зонды работоспособности от диспетчера трафика с большей частотой, чем параметр, используемый для интервала зондирования.

Примечание

Для протокола мониторинга HTTP или HTTPS обычной практикой на стороне конечной точки является реализация настраиваемой страницы в вашем приложении, например /health.aspx. Используя этот путь для мониторинга, вы можете выполнять проверки конкретного приложения, такие как проверка счетчиков производительности или проверка доступности базы данных.На основе этих пользовательских проверок страница возвращает соответствующий код состояния HTTP.

Все конечные точки в профиле диспетчера трафика имеют общие настройки мониторинга. Если вам нужно использовать разные настройки мониторинга для разных конечных точек, вы можете создать вложенные профили диспетчера трафика.

Конечная точка и статус профиля

Вы можете включать и отключать профили и конечные точки диспетчера трафика. Однако изменение статуса конечной точки также может произойти из-за автоматических настроек и процессов диспетчера трафика.

Статус конечной точки

Вы можете включить или отключить определенную конечную точку. Базовая служба, которая все еще может быть исправна, не затронута. Изменение статуса конечной точки контролирует доступность конечной точки в профиле диспетчера трафика. Когда состояние конечной точки отключено, диспетчер трафика не проверяет его работоспособность, и конечная точка не включается в ответ DNS.

Статус профиля

Используя настройку статуса профиля, вы можете включить или отключить определенный профиль.В то время как статус конечной точки влияет на одну конечную точку, статус профиля влияет на весь профиль, включая все конечные точки. Когда вы отключаете профиль, конечные точки не проверяются на работоспособность, и конечные точки не включаются в ответ DNS. На запрос DNS возвращается код ответа NXDOMAIN.

Состояние монитора конечной точки

Состояние монитора конечной точки — это генерируемое диспетчером трафика значение, которое показывает состояние конечной точки. Вы не можете изменить этот параметр вручную. Состояние монитора конечной точки — это комбинация результатов мониторинга конечной точки и настроенного состояния конечной точки.Возможные значения статуса монитора конечной точки показаны в следующей таблице:

Статус профиля	Состояние конечной точки	Состояние монитора конечной точки	Банкноты
Отключено	Включено	Неактивный	Профиль отключен. Хотя состояние конечной точки — Включено, статус профиля (Отключено) имеет приоритет. Конечные точки в отключенных профилях не отслеживаются. На запрос DNS возвращается код ответа NXDOMAIN.
<любой>	Отключено	Отключено	Конечная точка отключена. Отключенные конечные точки не отслеживаются. Конечная точка не включается в ответы DNS, поэтому не получает трафик.
Включено	Включено	Онлайн	Конечная точка находится под наблюдением и исправна. Он включается в ответы DNS и может получать трафик.
Включено	Включено	Деградировано	Проверки работоспособности мониторинга конечных точек завершаются ошибкой.Конечная точка не включается в ответы DNS и не получает трафик. Исключением является отказ всех конечных точек. В этом случае все они считаются возвращенными в ответе на запрос).
Включено	Включено	CheckingEndpoint	Конечная точка отслеживается, но результаты первой проверки еще не получены. CheckingEndpoint — это временное состояние, которое обычно возникает сразу после добавления или включения конечной точки в профиле.Конечная точка в этом состоянии включается в ответы DNS и может получать трафик.
Включено	Включено	Остановлено	Веб-приложение, на которое указывает конечная точка, не запущено. Проверьте настройки веб-приложения. Этот статус также может произойти, если конечная точка относится к типу вложенной конечной точки, а дочерний профиль отключен или неактивен. Конечная точка со статусом «Остановлена» не отслеживается. Он не включается в ответы DNS и не получает трафик.Исключение составляют случаи, когда все конечные точки не работают. В этом случае все они будут считаться возвращенными в ответе на запрос.

Для получения подробной информации о том, как состояние монитора конечных точек рассчитывается для вложенных конечных точек, см. Вложенные профили диспетчера трафика.

Состояние монитора профиля

Состояние монитора профиля представляет собой комбинацию настроенного состояния профиля и значений состояния монитора конечной точки для всех конечных точек. Возможные значения описаны в следующей таблице:

Статус профиля (как настроено)	Состояние монитора конечной точки	Состояние монитора профиля	Банкноты
Отключено	или профиль без определенных конечных точек.	Отключено	Профиль отключен.
Включено	Состояние по крайней мере одной конечной точки — «Ухудшение».	Деградировано	Просмотрите значения состояния отдельных конечных точек, чтобы определить, какие конечные точки требуют дополнительного внимания.
Включено	Состояние по крайней мере одной конечной точки — «В сети». Ни одна из конечных точек не имеет статуса Degraded.	Онлайн	Сервис принимает трафик.Никаких дополнительных действий не требуется.
Включено	Статус по крайней мере одной конечной точки — CheckingEndpoint. Ни одна из конечных точек не находится в состоянии Online или Degraded.	Проверка конечных точек	Это состояние перехода возникает, когда профиль создан или включен. Работоспособность конечной точки проверяется впервые.
Включено	Статусы всех конечных точек в профиле: Отключено или Остановлено, или профиль не имеет определенных конечных точек.	Неактивный	Нет активных конечных точек, но профиль все еще включен.

Отработка отказа и восстановление конечной точки

Traffic Manager периодически проверяет работоспособность каждой конечной точки, включая неисправные конечные точки. Диспетчер трафика определяет, когда конечная точка становится работоспособной, и возвращает ее в ротацию.

Конечная точка выходит из строя, когда происходит любое из следующих событий:

• Если протокол мониторинга HTTP или HTTPS:
  • Получен ответ, отличный от 200, или ответ, который не включает диапазон состояний, указанный в параметре Ожидаемые диапазоны кодов состояния .(Включая другой код 2xx или редирект 301/302).
• Если протокол мониторинга TCP:
  • Ответ, отличный от ACK или SYN-ACK, получен в ответ на запрос SYN, отправленный диспетчером трафика, чтобы попытаться установить соединение.
• Тайм-аут.
• Любая другая проблема с подключением, из-за которой конечная точка недоступна.

Дополнительные сведения об устранении неполадок при неудачных проверках см. В разделе Устранение неполадок с пониженным статусом в диспетчере трафика Azure.

Временная шкала на следующем рисунке представляет собой подробное описание процесса мониторинга конечной точки диспетчера трафика, которая имеет следующие параметры:

• Протокол мониторинга — HTTP.
• Интервал зондирования 30 секунд.
• Количество допустимых отказов 3.
• Значение тайм-аута составляет 10 секунд.
• DNS TTL составляет 30 секунд.

Рис.: Последовательность переключения и восстановления конечной точки диспетчера трафика

1. GET .Для каждой конечной точки система мониторинга диспетчера трафика выполняет запрос GET по пути, указанному в настройках мониторинга.

2. 200 ОК или настраиваемый диапазон кодов, указанный в настройках мониторинга профиля диспетчера трафика . Система мониторинга ожидает, что HTTP 200 OK или код состояния в диапазоне, указанном в настройках мониторинга, будут возвращены в течение 10 секунд. Когда он получает этот ответ, он распознает, что услуга доступна.

3. 30 секунд между проверками .Проверка работоспособности конечной точки повторяется каждые 30 секунд.

4. Служба недоступна . Услуга становится недоступной. Диспетчер трафика не узнает об этом до следующей проверки работоспособности.

5. Пытается получить доступ к пути мониторинга . Система мониторинга выполняет запрос GET, но не получает ответа в течение периода ожидания 10 секунд. Затем он пытается еще три раза с 30-секундными интервалами. Если одна из попыток успешна, количество попыток сбрасывается.

6. Статус понижен . После четвертого сбоя подряд система мониторинга помечает состояние недоступной конечной точки как Degraded.

7. Трафик перенаправляется на другие конечные точки . Серверы имен DNS диспетчера трафика обновляются, и диспетчер трафика больше не возвращает конечную точку в ответ на запросы DNS. Новые подключения направляются к другим доступным конечным точкам. Однако предыдущие ответы DNS, содержащие эту конечную точку, могут по-прежнему кэшироваться рекурсивными DNS-серверами и DNS-клиентами.Клиенты продолжают использовать конечную точку, пока не истечет срок действия кэша DNS. По истечении срока действия кэша DNS клиенты делают новые запросы DNS и направляются на разные конечные точки. Длительность кеширования контролируется настройкой TTL в профиле диспетчера трафика, например 30 секунд.

8. Продолжаются проверки работоспособности . Диспетчер трафика продолжает проверять работоспособность конечной точки, пока она находится в состоянии Degraded. Диспетчер трафика определяет, когда конечная точка возвращается в рабочее состояние.

9. Служба возобновляет работу .Услуга становится доступной. Конечная точка сохраняет свое состояние Degraded в диспетчере трафика до тех пор, пока система мониторинга не выполнит следующую проверку работоспособности.

10. Движение до обслуживания возобновляется . Диспетчер трафика отправляет запрос GET и получает ответ со статусом 200 OK. Служба вернулась в работоспособное состояние. Серверы имен диспетчера трафика обновляются, и они начинают передавать DNS-имя службы в ответах DNS. Трафик возвращается в конечную точку по мере истечения срока действия кэшированных DNS-ответов, возвращающих другие конечные точки, и по мере завершения существующих подключений к другим конечным точкам.

    Примечание

    Поскольку диспетчер трафика работает на уровне DNS, он не может влиять на существующие подключения к какой-либо конечной точке. Когда он направляет трафик между конечными точками (либо путем изменения настроек профиля, либо во время отработки отказа или восстановления после отказа), диспетчер трафика направляет новые подключения к доступным конечным точкам. Однако другие конечные точки могут продолжать получать трафик через существующие соединения до тех пор, пока эти сеансы не будут завершены. Чтобы обеспечить утечку трафика из существующих подключений, приложениям следует ограничить продолжительность сеанса, используемого с каждой конечной точкой.

Методы маршрутизации трафика

Когда конечная точка находится в состоянии Degraded, она больше не возвращается в ответ на запросы DNS. Вместо этого выбирается и возвращается альтернативная конечная точка. Метод маршрутизации трафика, настроенный в профиле, определяет, как выбирается альтернативная конечная точка.

• Приоритет . Конечные точки формируют список с приоритетами. Всегда возвращается первая доступная конечная точка в списке. Если статус конечной точки — Degraded, то возвращается следующая доступная конечная точка.
• Взвешенное значение . Любые доступные конечные точки выбираются случайным образом на основе назначенных им весов и весов других доступных конечных точек.
• Производительность . Возвращается конечная точка, ближайшая к конечному пользователю. Если эта конечная точка недоступна, диспетчер трафика перемещает трафик на конечные точки в следующем ближайшем регионе Azure. Вы можете настроить альтернативные планы переключения при отказе для высокопроизводительной маршрутизации трафика с помощью вложенных профилей диспетчера трафика.
• Географический .Возвращается конечная точка, сопоставленная для обслуживания географического местоположения на основе IP-адресов запроса. Если эта конечная точка недоступна, другая конечная точка не будет выбрана для переключения при отказе, поскольку географическое положение может быть сопоставлено только с одной конечной точкой в ​​профиле. (Подробности в FAQ). При использовании географической маршрутизации мы рекомендуем клиентам использовать вложенные профили диспетчера трафика с более чем одной конечной точкой в ​​качестве конечных точек профиля.
• MultiValue Возвращается несколько конечных точек, сопоставленных с адресами IPv4 / IPv6.Когда для этого профиля получен запрос, возвращаются работоспособные конечные точки на основе указанного вами значения Максимальное количество записей в ответе . Количество ответов по умолчанию — две конечные точки.
• Подсеть Возвращается конечная точка, сопоставленная набору диапазонов IP-адресов. Когда с этого IP-адреса поступает запрос, возвращается конечная точка, сопоставленная с этим IP-адресом.

Для получения дополнительной информации см. Методы маршрутизации трафика диспетчера трафика.

Примечание

Одно исключение из нормального поведения маршрутизации трафика возникает, когда все подходящие конечные точки имеют пониженный статус. Диспетчер трафика делает попытку «максимальных усилий», и отвечает так, как если бы все конечные точки с пониженным статусом фактически находились в оперативном состоянии . Такое поведение предпочтительнее альтернативы, которая заключалась бы в том, чтобы не возвращать какую-либо конечную точку в ответе DNS. Отключенные или остановленные конечные точки не отслеживаются, поэтому они не считаются подходящими для трафика.

Это состояние обычно вызвано неправильной конфигурацией службы, например:

• Список управления доступом [ACL], блокирующий проверки работоспособности диспетчера трафика.
• Неправильная конфигурация порта или протокола мониторинга в профиле диспетчера трафика.

Следствием такого поведения является то, что если проверки работоспособности диспетчера трафика настроены неправильно, из маршрутизации трафика может показаться, что диспетчер трафика — работает правильно.Однако в этом случае аварийное переключение конечной точки не может произойти, что влияет на общую доступность приложения. Важно убедиться, что профиль показывает статус Online, а не статус Degraded. Состояние «В сети» означает, что проверки работоспособности диспетчера трафика работают должным образом.

Дополнительные сведения об устранении неполадок при неудачных проверках работоспособности см. В разделе Устранение неполадок с пониженным статусом в диспетчере трафика Azure.

Часто задаваемые вопросы

Следующие шаги

Узнайте, как работает Traffic Manager

Узнайте больше о методах маршрутизации трафика, поддерживаемых Traffic Manager

.

Узнайте, как создать профиль диспетчера трафика

Устранение неполадок с ухудшенным состоянием на конечной точке диспетчера трафика

Подавление пути деградации тирозина увеличивает продолжительность жизни дрозофилы

Научное обоснование исследования является новым, и исследование технически хорошо выполнено, чтобы подтвердить гипотезу.Тем не менее, есть ряд проблем и вопросов, которые можно было бы решить, чтобы сделать исследование более убедительным.

Рецензент № 1:

В статье «Старение и дисфункция митохондрий активируют путь деградации тирозина, а его подавление увеличивает продолжительность жизни», Parkhitko et al. продемонстрировать, как обращение вспять возрастного увеличения фермента деградации тирозина, ТАТ, увеличивает продолжительность жизни. Научное обоснование исследования ново, и исследование технически хорошо выполнено, чтобы подтвердить гипотезу.Однако есть несколько проблем и вопросов, которые можно было бы решить, чтобы сделать исследование более убедительным.

Рисунок 3 демонстрирует, что нокдаун ТАТ в нейронах увеличивает продолжительность жизни, и что нокдаун всего тела может быть не таким сильным из-за пагубного воздействия на другие ткани. Однако более поздние цифры возвращаются к изучению эффектов нокдауна ТАТ на все тело. Таким образом, не могли бы авторы описать, как на фиг. 4, 5 и 6E будут воздействовать Elav-управляемая TAT RNAi в дополнение ко всему телу.

Основываясь на нашей модели, мы предполагаем, что подавление ТАТ предотвращает перенаправление тирозина с пути деградации на производство нейромедиаторов, а ингибирования этого перенаправления в нейрональных клетках достаточно для увеличения продолжительности жизни. Тем не менее, эти нейромедиаторы могут оказывать положительное влияние на здоровье и долголетие по всему телу. На рисунке 4 мы демонстрируем, что нокдаун ТАТ, управляемый всем телом, вызывает метаболические изменения всего тела, связанные с увеличением продолжительности жизни.На рисунке 5 мы демонстрируем, что мухи с мутантом TAT имеют повышенные уровни нейромедиаторов, а на рисунке 6 мы демонстрируем, что нокдаун компонентов ETC во всем организме увеличивает уровни ферментов в пути деградации тирозина. Чтобы ответить на вопрос обозревателя, мы измерили уровни нейротрансмиттеров в головах мух с подавлением ТАТ, специфичным для нейронов Elav -Gal4. Специфичное для нейронов подавление ТАТ в сочетании с добавлением тирозина вызывает повышенную регуляцию допа и октопамина.Мы не обнаружили значительного повышения уровня тирамина или дофамина, потенциально связанного с деградацией тирозина в ненейрональных тканях. Точно так же специфичное для нейронов подавление ТАТ вызвало повышенную регуляцию тирозина и метаболическое перепрограммирование, подобное подавлению ТАТ во всем организме. Мы обнаружили несколько метаболитов (тирозин, глюкозамин, метилцистеин и НАДН), которые обычно и значительно изменялись в результате подавления ТАТ, управляемого всем телом и специфическим для нейронов.Напротив, специфическое для нейронов ингибирование комплекса I mETC не привело к усилению активности ТАТ или других ферментов в пути деградации тирозина во всем организме. Основываясь на нашей модели, дисфункция митохондрий приводит к перенаправлению метаболизма тирозина в путь деградации тирозина, который вызывает изменение продукции нейромедиаторов, а нейромедиаторы вызывают неавтономные эффекты на другие ткани в организме. Также возможно, что дисфункция митохондрий может неавтономно перепрограммировать метаболизм тирозина в других органах, что было бы интересно изучить в последующих исследованиях.

На рисунке 6 авторы выдвинули гипотезу о том, что старение и нейродегенерация могут служить сигналом для переключения метаболизма тирозина с продукции нейротрансмиттеров на путь деградации тирозина, чтобы компенсировать возрастное функциональное снижение, которое может еще больше усугубить митохондриальную дисфункцию. Однако еще предстоит ответить на несколько вопросов, чтобы подтвердить эту гипотезу.

Что происходит с ETC-I при нормальном старении у мух-долгожителей, показанных на Рисунке 1?

В нашей оригинальной рукописи мы продемонстрировали, что ингибирование других комплексов ETC также вызывает активацию ферментов в пути деградации тирозина, но эффект ингибирования ETC-I был самым сильным.Хотя неизвестно, как активность комплекса I mETC изменяется с возрастом в нейрональных клетках мух, активность комплекса I снижается с возрастом как у грызунов, так и у человека в различных органах, включая мозг, о котором мы сейчас говорим. Мы также добавили дополнительные ссылки, демонстрирующие, что обход ETC-1 продлевает продолжительность жизни и, как и в наших исследованиях, имеет специфический для нейронов эффект. Что касается сравнения функции ETC у мух B и O, мы не можем провести этот эксперимент, так как у нас больше нет оригинальных мух.Эти мухи, которые мы первоначально получили от доктора Труди Маккей, содержались в особом режиме отбора (содержались в клетках для популяций, и только яйца мух в возрасте 1 месяца должны были быть перенесены в свежие клетки, чтобы предотвратить отбор для быстрого размножения) и больше не доступны в качестве Лаборатория Маккея не поддерживала их в рамках этого особого режима отбора.

Являются ли мухи ETC-I -RNAi недолговечными? Есть также исследования мух с противоположными эффектами. Для этого исследования важно, можно ли спасти это сокращение за счет увеличения уровней тире и нокдауна ТАТ.

Это вопрос, очень зависящий от контекста. Мы описываем во введении, что подавление компонентов ETC увеличивает продолжительность жизни Drosophila (Copeland et al.). Более того, в Copeland et al. paper подавление CG9762 увеличивает продолжительность жизни, и мы демонстрируем, что подавление CG9762 активирует уровни мРНК TAT. Однако существуют также модели Drosophila дефицита Комплекса I, которые характеризуются уменьшенной продолжительностью жизни. Кроме того, было показано, что обход комплекса I посредством сверхэкспрессии Ndi1 увеличивает продолжительность жизни Drosophila .Кроме того, у червей подавление ETC продлевает продолжительность жизни только при очень специфических обстоятельствах, включая время лечения и силу нокдауна. В Copeland et al. В статье авторы использовали драйвер da-GS-Gal4 , тогда как в нашем исследовании мы использовали драйвер tubulin-Gal4, tubulin-Gal80ts . Эти два исследования сильно различаются, тем более что драйверы GeneSwitch в целом более слабые и мозаичные. Мы обсуждали эти различия в Обсуждении. Мы использовали драйвер тубулин-Gal4, тубулин-Gal80ts для подавления комплекса I посредством экспрессии NP15.6 РНКи и поддерживали мух при различных концентрациях тирозина.

Подавление NP15.6 сильно сокращает продолжительность жизни у женщин, но имеет более слабый эффект у мужчин. Кормление мух разными концентрациями тирозина частично спасало их сокращенную продолжительность жизни. Интересно, что эти гендерные различия коррелируют с половыми различиями в экспрессии компонентов пути деградации тирозина.

Управляет ли потеря клетками ETC-I автономной экспрессией ТАТ?

У червей октопамин опосредует неавтономные для клеток эффекты AMPK / кальциневрина-опосредованного долголетия (Burkewitz et al.) и нокдаун ETC в нейронах влияет на митохондриальный гомеостаз в дистальных тканях (Durieux et al.). Это отличная область для будущих исследований, взаимодействуют ли подавление ETC и изменения метаболизма тирозина через клеточно-автономные или клеточно-неавтономные механизмы. Мы не обнаружили повышающую регуляцию ТАТ или других ферментов в пути деградации тирозина в организме в результате специфического для нейронов ингибирования комплекса mETC I. Однако это не исключает возможности неавтономных взаимодействий между ингибированием комплекса I mETC и регуляция пути деградации тирозина.

Последняя цифра утверждает связь активности ТАТ с нейродегенерацией и БП, что является интересным аспектом исследования, которое могло бы расширить его значение. Могут ли авторы поддержать свои выводы, исследуя нейродегенерацию у штаммов WT и PD, чтобы подтвердить эти аргументы.

В ответ на комментарий рецензента мы выполнили гистологию контрольных и PD мух ​​с контрольными или тремя различными линиями TAT RNAi. Как и ожидалось, экспрессия α-синуклеина вызвала сильную нейродегенерацию и потерю нейронов.Однако подавление ТАТ не предотвращало потери нейронов. Экспрессия α-синуклеина потенциально вызывает обширное перепрограммирование метаболизма и может потребовать воздействия на несколько метаболических путей для предотвращения нейродегенерации.

Меня беспокоят результаты применения тигециклина, поскольку известно, что он вызывает митохондриальную дисфункцию и окислительный стресс. Кроме того, необходимо провести несколько описанных выше анализов с тигециклином, поэтому я предлагаю исключить его из этого исследования, если он не получит дальнейшей поддержки.

Мы ожидаем, что эффекты тигециклина (аналогичные ингибированию комплекса I ETC) будут сильно зависеть от контекста / времени. Например, было показано, что тигециклин оказывает очень разные эффекты на нормальные и раковые клетки. Чтобы выяснить, вызывает ли тигециклин активацию маркеров митохондриальной дисфункции, мы протестировали несколько маркеров митохондриального стресса с помощью qRT-PCR, CLPX, HSP10, HSP60 и HSP22 . Концентрация и продолжительность действия тигециклина, которые предотвращают повышающую регуляцию ТАТ , не вызывают повышенную регуляцию маркеров митохондриальной дисфункции.

Рецензент № 2:

Это очень интересная новая статья от Parkhitko et al.

Основным преимуществом работы является использование беспристрастного «омического» подхода для определения нового пути (деградация тирсозина), относящегося к старению и определению продолжительности жизни у Drosophila . Результаты, изложенные в документе, будут интересны широкому кругу читателей и, вероятно, вдохновят на дополнительную работу в этой новой области.

Что касается потенциальных экспериментальных ограничений для работы, кажется, что авторы не предоставили «контроль RU486» ни для одной из экспериментальных работ.Это потенциально важно, поскольку лаборатории Tower и Ja сообщили, что в зависимости от используемой пищи и концентрации RU. При использовании этого кормления RU могут оказывать непредсказуемое влияние на продолжительность жизни мух. например, J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2017 Февраль; 72 (2): 173-180.

Следовательно, настоятельно рекомендуется включить следующий контроль для исследований долголетия:

Контрольный штамм

/ Драйвер GS +/- RU (та же концентрация, что и для интересующего трансгена).

, однако, отмечу, что авторы протестировали несколько линий РНКи, и не все из них дали положительный эффект.Следовательно, наблюдаемые эффекты маловероятны из-за одного кормления RU. Кроме того, всегда имеет смысл анализировать потребление пищи в контексте вмешательств, способствующих долголетию. Похоже, что это также отсутствует в исследовании, что может затруднить интерпретацию результатов.

Мы протестировали все линии GeneSwitch, скрещенные с контрольными штаммами, в нашей предыдущей работе (Parkhitko et al., 2016). В этой статье мы также проверили и опубликовали, что удвоение концентрации RU486 не влияет на продолжительность жизни в наших руках.

Предлагаемые правки и предполагаемое влияние работы:

В идеальном мире (без пандемии) по крайней мере некоторые из приведенных ниже предложений можно было бы решить с помощью экспериментов. Но, учитывая текущие события, эти вопросы могут быть дополнительно обсуждены в рукописи:

Интересно и потенциально информативно, что уровень тирозина повышается у мух-долгожителей. Это может отражать рост среднего возраста, при этом «средний возраст» — это другой хронологический возраст в разных генетических фонах.Предположительно, даже у долгоживущих штаммов уровень тирозина снижается в позднем возрасте?

Мы согласны с этим утверждением. Мы включили только 1 и 4 мух, потому что мы хотели избежать активно умирающего состояния. Цель состояла только в том, чтобы получить потенциальные метаболические пути в качестве кандидатов на увеличение продолжительности жизни.

Могут ли генетические вмешательства, о которых сообщается, продлить продолжительность жизни, если вмешательства начинаются в среднем или даже позднем возрасте? Если это так, это значительно повысит воспринимаемое воздействие работы.

Мы согласны с тем, что это окажет сильное влияние на перевод. Мы добавили это в текст. Однако есть одно предостережение: линии GeneSwitch Gal4 могут быть не такими активными в более позднем возрасте, как в начале (на основе неопубликованных обсуждений с другими людьми в области старения), что может затруднить интерпретацию результатов.

Интересна взаимосвязь с нокдауном ETC и деградацией тирозина. Авторы сообщают, что нокдаун ETC (дисфункция мито) вызывает фенокопию старения.Однако, как отмечают авторы во введении: умеренный нокдаун ETC может продлить жизнь у мух (Copeland et al.,; Owusu-Ansah et al.) И червей. Различные результаты (увеличение продолжительности жизни или сокращение продолжительности жизни), вероятно, являются вопросом времени и уровня нокдауна, и это, возможно, стоит обсудить дополнительно. Однако на первый взгляд это кажется парадоксальным. Следовательно, более подробное обсуждение может принести пользу читателям.

Мы расширили эту часть в Обсуждении. См. Также комментарии рецензенту №1.

Работа, показывающая, что тигециклин предотвращает активацию пути деградации тирозина при дисфункции мито, является дополнительным преимуществом статьи. Однако возникает очевидный дополнительный вопрос: можно ли аналогичным образом использовать тигециклин для лечения стареющих мух дикого типа?

Если так, это значительно повысит эффективность работы. Можно ли использовать препарат для замедления старения / увеличения продолжительности жизни при лечении старых мух дикого типа. Может ли препарат спасти снижение уровня тирозина у старых мух WT?

Это интересный вопрос.Тигециклин — ингибитор митохондриальной трансляции. Мы не ожидаем, что длительное лечение тигециклином продлит жизнь из-за длительного митохондриального стресса — проблема, также поднятая рецензентом №1. В течение периода времени, который мы использовали для лечения мух контрольных и мух с ингибированием ETC CI, мы не наблюдали активации маркеров митохондриального стресса. Однако это был бы отличный отдельный проект для изучения того, как ингибирование митохондриальной трансляции взаимодействует со старением и производством нейромедиаторов.

Рецензент № 3:

Пархитко изучает влияние ТАТ на продолжительность жизни, метаболиты и репортерные фенотипы. В работе сравниваются метаболомные профили линий «B» и «O» розы и показаны различные возрастные структуры тирозина в этих линиях. Это приводит к предполагаемой тирозинаминотрансферазе (TAT / CG1461). Продолжительность жизни увеличивается при снижении ТАТ у взрослых. Авторы регистрируют множество коррелированных фенотипов мух TAT RNAi, от метаболомики до нейромедиаторов. Они обнаружили, что ингибирование митохондриальной ETC увеличивает элементы деградации тирозина.Некоторые данные действительно интересны, но выводы о механизмах старения чрезмерно экстраполируются и не проверяются. Работа имеет существенные проблемы с точки зрения вывода, дизайна и научной строгости.

Краткое изложение основных проблем:

1) Сравнение линий «B» и «O» трудно интерпретировать — вопросы, которые многие авторы объясняли много лет назад, но здесь не знают. По сути, строки B не являются «невыбранными элементами управления». До Роуза они были строго отобраны из-за преждевременного развития и репродуктивного графика, а также накопили значительную мутационную нагрузку для генов, экспрессируемых вскоре после эклозии.Линии O сместили нагрузку и вернулись к нормальному репродуктивному графику. Черты между линиями могут показывать возрастные различия, но не имеют никакого отношения к старению.

Мы использовали эти строки только для получения списка возможных метаболических путей, которые потенциально могут иметь отношение к старению. Затем мы использовали эту информацию для проверки изменений уровней ферментов, относящихся к пути деградации тирозина, у мух дикого типа, у мух с ингибированием ETC CI и у мух с подавлением ферментов, принадлежащих к пути деградации тирозина.

2) Недостаточно измерить только два возраста. То, что тирозин увеличивается от 1 до 4w в линиях O (или от 1 до 5w в OreR), является неполным. Возможно, тирозин увеличивается до 2w, а затем снижается, но при этом он выше на 4w, чем на 1w. Старение — это прогрессивная функция.

Мы решили выбрать эти две точки времени, потому что в линиях B и O 100% мух все еще живы. Мы не стремились использовать метаболомику для объяснения различий между этими штаммами; наша цель состояла только в том, чтобы получить потенциальных кандидатов для тестирования на мухах дикого типа.Кроме того, мы могли запустить только ограниченное количество образцов в данный момент времени, а наша платформа метаболомики не позволяет комбинировать результаты независимых прогонов. Мы согласны с тем, что это может быть интересный и независимый проект по характеристике возрастных метаболических изменений в этих линиях.

3) Линии O увеличивают плодовитость только через несколько недель. Линии B начинаются с эклозии. Вполне возможно, что метаболизм тирозина отражает репродуктивную деятельность, а не процесс соматического старения.

Как упоминалось выше, мы расширили анализ пути деградации тирозина до линий мух, которые не зависят от линий B / O.

4) Нам нужно увидеть абсолютное количество тирозина в 1 и 4w для каждой линии B и O. Использование «относительного количества» затемняет.

Этот вопрос также был поднят другим рецензентом. К сожалению, имеющиеся в продаже наборы не работали в наших руках на образцах мух, и у нас больше нет этих линий.

5) Во многих местах документ генерирует коррелятивные данные, но упаковывает интерпретации как причинно-следственные связи.Например, нет данных, подтверждающих, что «подавление ТАТ вызывает метаболическое перепрограммирование, влияя на митохондриальные / антиоксидантные метаболические факторы, способствующие долголетию». Данные показывают, что подавление ТАТ вызывает метаболические изменения, некоторые из которых связаны с «митохондриальными / антиоксидантными факторами». Работа не доказывает, что действие ТАТ через митохондрии вызывает наблюдаемые метаболические изменения или то, что это влияет на старение. В целом работа требует анализа эпистаза.

Мы согласны с этим, но не хотели переоценивать данные.Мы только заявили, что подавление ТАТ вызывает метаболические изменения, которые, как известно, связаны с увеличением продолжительности жизни. Мы согласны с тем, что эпистатический анализ был бы очень полезен, но поскольку линии GeneSwitch в целом являются слабыми драйверами Gal4, мы не хотели использовать их для экспериментов по долговечности у мух. Кроме того, мы и другие обнаружили, что добавление дополнительных конструкций UAS разбавляет Gal4 и может ослабить фенотипы, что затрудняет интерпретацию результатов, в дополнение к смешению генетического фона.

6) Интересно показать, что ингибирование ETC активирует мРНК TAT (и другие компоненты), которая может быть восстановлена ​​с помощью лекарственного средства, чтобы заблокировать повреждение ETC. Нет данных, подтверждающих роль ETC через метаболизм тирозина в увеличении выживаемости. Точно так же, чтобы «проверить, насколько механически подавление ТАТ увеличивает продолжительность жизни», измеряется только стресс-репортеры GFP, а не продолжительность жизни.

Чтобы частично ответить на этот комментарий, мы проверили, как подавление одного из компонентов ETC Complex I, которое вызывает сильную активацию TAT, влияет на продолжительность жизни, и можно ли исправить эти изменения, добавляя тирозин.

7) Работа нейропептида не завершена. Здесь усваивается наркотик? В противном случае отрицательный эффект бессмысленен. Тем не менее, L-DOPA действительно улучшает выживаемость. «Маргинальное и значительное», но «гораздо более слабое» (субъективное мнение) увеличение выживаемости фактически находится в пределах диапазона данных TAT RNAi, если мы можем интерпретировать график выживаемости с его плохой динамикой. И исследование препарата не было воспроизведено. Эти данные не исключают роль повышенного уровня L-ДОФА.

Мы кормили мух концентрациями лекарств, о которых ранее сообщалось, что они спасают генетические дефекты, связанные с производством этих нейротрансмиттеров, и мы использовали концентрации, указанные в этих публикациях.Мы согласны с тем, что недостаточное спасение может быть связано с плохим потреблением лекарств, нестабильностью лекарств и т. Д. Мы расширили обсуждение этих потенциальных предупреждений. Исследование препарата проводилось на достаточном количестве мух для выявления даже небольших изменений, а продолжительность жизни оценивалась в нескольких флаконах независимо, а данные о выживаемости были объединены.

8) Существует множество противоречивых вариантов использования комбинаций штамма, драйвера и пола РНКи, чтобы подчеркнуть какую-либо одну точку зрения. Почему или какие данные не отображаются?

Как правило, мы используем линии GeneSwitch для определения продолжительности жизни и линии TubulinGal4 / ElavGal4, Gal80ts для выполнения биохимического анализа, поскольку линии GeneSwitch мозаичны и слабее.Для анализа метаболомики мы могли запустить только ограниченное количество образцов и не можем объединить результаты из отдельных прогонов.