Действие исследования подтверждено

Афобазол (Фабомотизол): ШИРОКАЯ БАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ — Более 80 статей, описывающих исследование эффективности и безопасности Афобазола в клинической практике, с участием более 4500 пациентов.
Афобазол (фабомотизол): исследован в различных областях медицины:
Кардиология
Дерматология
Неврология
пульмонология
гастроэнтерология
Гинекология
Психиатрия.

Афобазол Восстанавливает нервные клетки

Уникальная формула Афобазол (МНН фабомотизол) регенерирует («восстанавливает») рецепторы нервных клеток и защищает клетки от повреждений, в том числе при стрессе, чтобы они снова могли правильно выполнять свою работу.

Результат: исчезают тревога, напряжение, раздражительность, неугомонность, появляются сила и уверенность, осознанные решения и действия, улучшается эмоциональный фон.

Афобазол действует без сонливости
Уникальная формула афобазола (МНН фабомотизола) работает через естественные физиологические механизмы восстановления нервных клеток, не влияя на резкость и скорость реакции нервной системы, без эффекта «сонливости».

Афобазол не вызывает:
дневную сонливость
снижение памяти и концентрации
миорелаксацию
зависимость
в зависимости от синдрома отмены
.

Афобазол могут принимать:

водители
лица, работающие на сложных механизмах
везде, где требуется экономия концентрации.

Таким образом, афобазол подходит всем работающим и живущим в современном мире людям.

Инновационная формула Афобазола (МНН фабомотизол)

Афобазол — один из самых популярных и обладающих благоприятным профилем безопасности успокаивающих препаратов в России. Он создан от имени НИИ фармакологии РАМН им. В. Закусова под руководством академика РАМН С.Б. Середенина и, в отличие от многих традиционных препаратов для лечения тревожности, не оказывает угнетающего действия на центральную нервную систему.Кроме того, оригинальность препарата заключается в способности восстанавливать естественный механизм, позволяющий нервной системе справляться со стрессовыми нагрузками.

Афобазол быстро действует
Эффект афобазола проявляется с первой недели приема: снижение тревожности, напряжения, раздражительности, возбужденного состояния;
Максимальный эффект Афобазола развивался к концу 4-й недели лечения;
Эффект от приема Афобазола сохраняется после завершения терапии.

Афобазол, признанный экспертами ВОЗ

В 2014 году Всемирная организация здравоохранения приняла решение включить препарат фабомотизол (афобазол) в класс анксиолитиков (противотревожные препараты), международную систему классификации лекарственных средств — анатомо-терапевтические. Система химической классификации, ATC.

Афобазол создан в НИИ фармакологии. В.В. Закусов Медицинские науки под руководством академика РАМН С.Б. Середенина в результате многолетних исследований селективного анксиолитика, обладающего эффективными традиционными бензодиазепиновыми транквилизаторами и лишенного присущих им побочных эффектов. Эффективность и безопасность афобазола изучалась в многочисленных экспериментальных и клинических исследованиях.

Данные о разработке препарата были представлены на рассмотрение ВОЗ, в результате чего в 2012 году было принято решение присвоить афобазолу международное непатентованное название — фабомотизол.В 2013 г. информация, полученная в ходе исследования механизма действия Афобазола в российских и зарубежных лабораториях, а также результаты исследований его эффективности и безопасности были переданы на рассмотрение в Центр методологии статистических исследований лекарственных средств ВОЗ (г. Сотрудничающий центр ВОЗ по методологии статистики лекарственных средств), который является координирующим органом и способствует широкому международному распространению методологии САР. Результаты изучения механизма действия и доказательной базы анксиолитического фабомотизола обсуждались на заседании Международной рабочей группы ВОЗ.Предоставление документации, соответствующей требованиям ВОЗ, послужившей основанием для присвоения международного кода АТС анксиолитическому (успокаивающему) препарату (N05B — ​​АНКСИОЛИТИК).
Было получено в течение периода рассмотрения представленной документации и комментариев и возражений по предлагаемому коду УВД. Проголосованный код АТС включен в классификацию АТС с января 2015 года. Афобазол ОТС стал первым российским анксиолитиком, получившим код международной классификации Всемирной организации здравоохранения.

Рецептор сигма-1 регулирует активацию ERK и способствует выживанию астроцитов головки зрительного нерва

Abstract

Рецептор сигма-1 (S1R) представляет собой уникальный трансмембранный белок, который, как было показано, регулирует дифференцировку нейронов и выживаемость клеток. Он экспрессируется в нескольких типах клеток нервной системы и внутренних органов, включая нейроны и глии внутри глаза. Лиганды S1R являются терапевтическими мишенями для лечения различных заболеваний, от нейродегенеративных состояний до опухолевых заболеваний.Однако эффекты активации и ингибирования S1R в глиальных клетках недостаточно охарактеризованы. Внутри глаза астроциты в головке зрительного нерва имеют решающее значение для здоровья и выживания нейронов, которые отправляют визуальную информацию в мозг. В этом исследовании мы использовали S1R-специфический агонист, (+) — пентазоцин, для оценки активации S1R в астроцитах, происходящих из головки зрительного нерва (ONHA). Обработка ONHA (+) — пентазоцином ослабляла уровень и продолжительность стресс-индуцированного фосфорилирования ERK после воздействия окислительного стресса и способствовала выживанию ONHA.Эти эффекты были специфичны для активации S1R, потому что они не наблюдались в ONHA, которые были истощены S1R с помощью siRNA-опосредованного нокдауна. В совокупности наши результаты предполагают, что активация S1R подавляет фосфорилирование ERK1 / 2 и защищает ONHA от смерти, вызванной окислительным стрессом.

Образец цитирования: Zhao J, Mysona BA, Wang J, Gonsalvez GB, Smith SB, Bollinger KE (2017) Рецептор сигма-1 регулирует активацию ERK и способствует выживанию астроцитов головки зрительного нерва. PLoS ONE 12 (9): e0184421.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421

Редактор: Рафаэль Линден, Федеральный университет Рио-де-Жанейро, БРАЗИЛИЯ

Поступила: 7 ноября 2016 г .; Одобрена: 23 августа 2017 г .; Опубликован: 12 сентября 2017 г.

Авторские права: © 2017 Zhao et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в файлах рукописи и вспомогательной информации.

Финансирование: При поддержке Национальных институтов здравоохранения Гранты 5K08EY021758-03 и RO1 EY014560, https://www.nih.gov/, а также Премия молодых ученых-клиницистов Американского общества глаукомы http://www.americanglaucomasociety.net/ ( КЕБ). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Введение

Рецептор сигма-1 (S1R) представляет собой небольшой (25 кДа) трансмембранный белок, который является высококонсервативным, но не имеет известной гомологии с существующими белками млекопитающих [1]. Он экспрессируется во всех органах и типах клеток центральной и периферической нервной, иммунной, эндокринной и репродуктивной систем [2–5]. Предыдущие исследования показали, что S1R действует как «плюрипотентный модулятор», который взаимодействует с несколькими ионными каналами и сигнальными путями, включая кальциевые каналы, инозитолфосфаты и протеинкиназы [6].Несмотря на обширные исследования, понимание молекулярных каскадов, запускаемых S1R, находится в зачаточном состоянии. Однако эффекты некоторых агонистов и антагонистов S1R были хорошо охарактеризованы в моделях нейродегенеративных заболеваний и терапевтических средств против рака [7–12]. В целом, эти исследования показывают, что агонисты S1R способствуют выживанию, тогда как антагонисты S1R ингибируют пролиферацию опухолевых клеток и вызывают апоптоз [13]. Таким образом, опубликованные результаты предполагают возможное применение сигма-лигандов в различных областях, включая онкологию и лечение нейродегенеративных заболеваний.

Нейрональные и глиальные клетки сетчатки и зрительного нерва содержат S1R, и его агонисты проявляют сильные нейропротекторные свойства как in vitro, так и in vivo [7, 14-17]. Недавние исследования показывают, что агонисты S1R могут предлагать вариант лечения дегенеративных заболеваний глаз, включая дистрофию фоторецепторов и глаукому [18–21]. Напротив, ингибирование S1R является потенциальным терапевтическим вариантом при опухолевых заболеваниях, включая рак груди и простаты [22, 23]. Понимание молекулярных механизмов, лежащих в основе активности S1R, имеет решающее значение для разработки более эффективных методов лечения глазных заболеваний.Кроме того, оценка S1R в тканях глаза способствует знанию того, как лиганды этого рецептора будут влиять на глаз, если они используются системно в качестве противоопухолевых или нейропротекторных агентов.

Общей связью между S1R и механизмами выживания клеток является каскад протеинкиназ, регулируемых внеклеточными сигналами (ERK1 / 2). Молекулярный сигнальный путь ERK1 / 2 регулирует основные функции клеток, включая пролиферацию, дифференцировку и выживание [24]. Некоторые анализы показывают, что S1R взаимодействует с путем ERK1 / 2, но механизм и внутриклеточные последствия этого взаимодействия недостаточно хорошо изучены [20, 21, 25–27].Например, исследования показывают, что прототипический агонист S1R, (+) — пентазоцин (PTZ), защищает ганглиозные клетки сетчатки (RGC) от гибели клеток, вызванной гипоксией, за счет увеличения активации ERK1 / 2 [21]. Кроме того, наша недавняя работа описывает усиление фосфорилирования ERK1 / 2 сетчатки одновременно с надежной защитой сетчатки от эксайтотоксического повреждения у мышей, получавших (+) — пентазоцин [20]. Эти недавние результаты контрастируют с данными об опосредованном (+) — пентазоцином снижении активации ERK1 / 2 в культурах первичных клеток микроглии, происходящих из сетчатки [28].Эти находки повышают вероятность того, что эффект активации S1R на статус пути ERK1 / 2 может зависеть от типа клеток.

S1R, включая (+) — пентазоцин, защищают ганглиозные клетки сетчатки (RGC) от гибели в условиях метаболического и окислительного стресса [14, 21]. Эти защитные свойства делают (+) — пентазоцин потенциальным средством лечения оптических невропатий, при которых потеря зрения вызвана дегенерацией RGC [29]. При глаукоме, наиболее распространенной оптической нейропатии, головка зрительного нерва (ДЗН) считается начальным очагом заболевания [30, 31].Это самая передняя часть зрительного нерва и место, где аксоны RGC сходятся, когда они покидают глаз и переходят в мозг. Астроциты головки зрительного нерва (ONHA) являются наиболее распространенными глиальными клетками в ONH. Они жизненно важны для здоровья RGC. Таким образом, оценка их ответа на активацию и ингибирование S1R имеет решающее значение для понимания офтальмологических лечебных эффектов агонистов и антагонистов S1R.

В настоящем исследовании мы изучили эффекты активации и ингибирования S1R в первичных культурах ONHA.Мы индуцировали активацию S1R с помощью S1R-специфического агониста, (+) — пентазоцина. Обработка этим соединением ослабляла фосфорилирование ERK и защищала ONHA от смерти, вызванной окислительным стрессом. Кроме того, ингибирование S1R с использованием siRNA-опосредованного нокдауна блокировало как (+) — пентазоцин-индуцированные эффекты просживания, так и (+) — пентазоцин-индуцированные эффекты на активацию ERK1 / 2. Таким образом, наши результаты предполагают, что активация S1R защищает ONHA посредством механизма, который, вероятно, включает модуляцию пути передачи сигналов ERK1 / 2.

Методы и материалы

Первичная культура астроцитов головки зрительного нерва крысы (ONHA)

Эксперименты, требующие, чтобы животные придерживались Положения ARVO об использовании животных в офтальмологических исследованиях и исследованиях зрения. Наш протокол для животных одобрен Комитетом по уходу и использованию животных Университета Огаста (IACUC, 2011–0338). Первичные астроциты головки зрительного нерва крысы выделяли из головки зрительного нерва крыс Sprague-Dawley (SD) (ENVIGO Laboratories, Индианаполис, Индиана) в соответствии с протоколом, модифицированным из Mandal et al.(2009) и Beckel et al. (2014) [32, 33]. Вкратце, крысят умерщвляли прямой декапитацией на 3-5 день после рождения. Для каждого эксперимента с культурой клеток использовали один помет детенышей (8–12 животных). Ткань головки зрительного нерва рассекали проксимальнее склеры и расщепляли в течение 15 минут с использованием 0,25% трипсина (Invitrogen, Carlsbad, CA) при 37 ° C. Клетки промывали один раз ростовой средой ONHA (среда Игла, модифицированная Дульбекко DMEM / F12 (Invitrogen, Carlsbad, CA), содержащая 10% фетальной телячьей сыворотки (FBS) (Atlanta Biologicals, Atlanta, GA), 1% пенициллин / стрептомицин (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния), 1% глутамакса (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния) и 25 нг / мл эпидермального фактора роста (EGF) (Sigma, St.Луис, штат Миссури)) и вращался в течение 5 минут со скоростью 1500 об / мин. Клетки ресуспендировали в ростовой среде ONHA и высевали на покрытые 0,2% желатином (Sigma, Сент-Луис, Миссури) колбы для культивирования клеток Т75. Клетки поддерживали в увлажненном инкубаторе, содержащем 5% CO ₂ при 37 ° C. Клетки пассировали через 7–10 дней и использовали на 2–5 пассажах. Иммуноцитохимический анализ и вестерн-блоттинг проводили для определения чистоты культур ONHA.

Культура клеток HeLa

Клетки аденокарциномы шейки матки (HeLa) человека были получены из АТСС (Манассас, Вирджиния.Кот. номер # ATCC CCL-2) и выдерживают в увлажненном инкубаторе, содержащем 5% CO ₂ при 37 ° C. Клетки HeLa культивировали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) (Invitrogen, Carlsbad, CA), с добавлением 10% FBS и 1% пенициллина / стрептомицина.

Иммуноцитохимия

Клетки фиксировали 4% параформальдегидом (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA) при комнатной температуре в течение 15 мин с последующей трехкратной промывкой PBS. Затем клетки были проницаемы через мембрану с помощью 0.3% тритон Х-100 в PBS при комнатной температуре в течение 10 мин. Затем клетки блокировали 0,1% тритоном X-100 в PBS (PBST) с 10% козьей сывороткой (Sigma, St. Louis, MO) при комнатной температуре в течение 1 часа, затем инкубировали в первичных антителах (глиальный фибриллярный кислотный белок (GFAP). ) 1: 500, Dako, Carpinteria, CA; Neural Cell Adhesion Molecule (NCAM) 1: 100, Santa Cruz, Dallas, TX; Iba-1 1: 500, Wako, Richmond, VA; Oligodendrocyte Specific Protein (OSP) 1: 500, Abcam, Cambridge, MA; S1R 1: 500) при 4 ° C в течение ночи. Кроличьи поликлональные антитела S1R были получены из пептидной последовательности SEVYYPGETVVHGPGEATDVEWG (соответствует остаткам 143–165 крысиного S1R) и созданы в лаборатории Dr.Сильвия Смит. Это антитело использовалось в многочисленных публикациях с 2002 года в качестве инструмента для изучения экспрессии и функции S1R [7, 17, 34]. На второй день клетки инкубировали во вторичных антителах (меченные Alexa Fluor 555 козьи анти-кроличьи 1: 1000; меченные Alexa Fluor 488 козьи антимышиные антитела 1: 1000, Invitrogen, Carlsbad, CA) при комнатной температуре в течение 1 часа. После 3-кратной промывки PBST покровные стекла закрывали Fluoroshield с DAPI (Sigma, Сент-Луис, Миссури). Клетки наблюдали на иммунофлуоресценцию с помощью микроскопа Zeiss Axioplan-2 (Carl Zeiss, Оберкохен, Германия), оснащенного программой AxioVision (версия 4.6.3) и камеру для микроскопии высокого разрешения.

Вестерн-блоттинг

Астроциты головки зрительного нерва крысы лизировали в буфере RIPA (Sigma, St. Louis, MO), содержащем 2 мМ ортованадата натрия и 1% коктейль ингибиторов протеазы (Thermo Scientific, Waltham, MA). Лизаты клеток центрифугировали при 14000 g в течение 30 минут. Концентрацию белка измеряли с помощью анализа Брэдфорда (Bio-Rad, Hercules, CA). Белки разделяли электрофорезом на 10% SDS-полиакриламидном геле, затем переносили на нитроцеллюлозную мембрану (Thermo Scientific, Waltham, MA).Мембрану блокировали 5% обезжиренным молоком в трис-буферном физиологическом растворе и 0,05% твин 20 (TBST) в течение 1 часа при комнатной температуре, затем инкубировали в течение ночи при 4 ° C с первичными антителами (GFAP 1: 1000; Iba-11: 500; OSP 1: 1000; S1R 1: 1000; p-ERK 1: 500; ERK 1: 500; глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH) 1: 2000). После трех промывок в TBST мембрану инкубировали в течение 1 часа с соответствующим вторичным антителом, конъюгированным с пероксидазой хрена (HRP), при комнатной температуре. Белки визуализировали путем инкубации с хемилюминесцентным субстратом SuperSignal West Pico (Thermo Scientific, Waltham, MA) и количественно определяли денситометрией с помощью программного обеспечения ImageJ (http: // imagej.nih.gov/ij/; предоставлено в открытом доступе Национальными институтами здравоохранения, Бетесда, Мэриленд). Блоты удаляли и повторно зондировали для загрузки контролей. Антитело GFAP было приобретено у Dako, Carpinteria, CA; Антитело Iba-1 от Wako, Richmond, VA; Антитело OSP от Abcam, Cambridge, MA; фосфо-ERK, поликлональные антитела ERK от Cell Signaling Technology, Danvers, MA; Моноклональное антитело GAPDH, HRP-конъюгированный анти-кроличий IgG и HRP-конъюгированный анти-мышиный IgG от Santa Cruz Biotechnology, Даллас, Техас.

Обработка клеточной культуры

Для анализа МТТ ONHA высевали на 96-луночные планшеты (10000 клеток / лунку). Чтобы определить токсичность (+) — пентазоцина (Sigma, Сент-Луис, Миссури) для ONHA, ONHA подвергали воздействию возрастающих концентраций (+) — пентазоцина (1, 3, 10, 50 мкМ) в течение 24 часов. Для определения токсичности H ₂ O ₂ (Sigma, Сент-Луис, Миссури) для ONHA, ONHA подвергались воздействию возрастающих концентраций H ₂ O ₂ (50, 100, 150, 200, 250, 500 мкМ) на 24 часа.Чтобы определить, защищает ли (+) — пентазоцин ONHA от индуцированной H ₂ O ₂ гибели клеток, ONHA предварительно обрабатывали 10 мкМ (+) — пентазоцином в течение 1 часа, а затем 100 мкМ H ₂ O ₂ совместное лечение 10 мкМ (+) — пентазоцином в течение 24 часов. Чтобы определить, будет ли ингибитор ERK U0126 (Cell Signaling Technology, Danvers, MA) защищать ONHA от индуцированной H ₂ O ₂ гибели клеток, ONHA предварительно обрабатывали 10 мкМ U0126 в течение 1 часа, а затем 100 мкМ H ₂ O ₂ совместная обработка 10 мкМ U0126 в течение 24 часов.

Для обнаружения изменений уровней фосфорилированных ERK в ONHA, подвергнутых воздействию H ₂ O ₂ и (+) — пентазоцина, ONHA высевали на 24-луночные планшеты из расчета 20000 клеток / лунку. Клетки обрабатывали 100 мкМ H ₂ O ₂ с предварительной обработкой в ​​течение 1 часа 10 мкМ (+) — пентазоцином или без нее. Через 15 минут, 30 минут, 1 час, 3 часа и 24 часа лизаты клеток собирали для вестерн-блоттинга для обнаружения экспрессии p-ERK, общей ERK и GAPDH.

Анализ МТТ

Астроциты головки зрительного нерва крысы высевали на 96-луночные планшеты при плотности 10 000 клеток / лунку в ростовой среде ONHA.После инкубации с H ₂ O ₂ с (+) — пентазоцином или без него в течение 24 часов среду удаляли, добавляли MTT (1,2 мМ в культуральной среде) (Invitrogen, Carlsbad, CA) и инкубировали в течение 4 часов при 37 ° C. ° C. Солюбилизацию диметилсульфоксидом (ДМСО) (Sigma, Сент-Луис, Миссури) проводили в соответствии с инструкциями протокола. Поглощение измеряли при 540 нм с использованием считывающего устройства для микропланшетов (VERSA max, Molecular Devices, Саннивейл, Калифорния). Эксперименты проводили в четырех повторностях и повторяли 3 раза.

Обнаружение активных форм кислорода (АФК)

Для определения внутриклеточных ROS, ONHA, выращенные на покровных стеклах, промывали PBS и инкубировали с 5 мкМ реагентом CellROX Green (Invitrogen, Carlsbad, CA) в темноте в течение 30 минут при 37 ° C. После промывки и фиксации 4% параформальдегида ячейки были закреплены с помощью Fluoroshield с DAPI. Внутриклеточные уровни АФК, соответствующие испускаемой флуоресценции, наблюдали с помощью микроскопа Zeiss Axioplan-2 (Carl Zeiss, Оберкохен, Германия), оснащенного программой AxioVision (версия 4.6.3) и камеру для микроскопии высокого разрешения.

Трансфекция SiRNA

миРНК S1R и не нацеливающая миРНК отрицательного контроля (скремблированная миРНК) были приобретены у Dharmacon (Lafayette, CO, USA). S1R или скремблированную миРНК трансфицировали в клетки HeLa и первичные ONHA крысы с использованием реагента для трансфекции липофектамина RNAiMAX (Invitrogen, Carlsbad, CA) в соответствии с протоколом производителя. Вкратце, за ночь перед трансфекцией клетки высевали по 20000 на лунку на 24-луночные планшеты или 5000 на лунку на 96-луночные планшеты.Для трансфекции 10 пмоль миРНК S1R или скремблированную миРНК смешивали с реагентом RNAiMax в течение 5 минут при комнатной температуре. Затем к клеткам добавляли комплексы РНК-липид. Для подтверждения нокдауна S1R клетки собирали через 3 дня и 6 дней после трансфекции и лизировали в буфере RIPA. Лизаты анализировали на экспрессию S1R с помощью вестерн-блоттинга. Последовательности-мишени миРНК S1R человека: GAAUGCGGGUGGCUGGAUG; GGCUUGAGCUCACCACCUA; GAGCUGGCCUUCUCUCGUC; CCAAACACAUGGAUGGUGG. Последовательности-мишени siRNA крысы S1R: GAACACAUACCACGAGCUU; GUGCACACCUUGUCGGUCU; GUGAGGAAGGACAUACAUA; AGACUUGUAUGUACUGUAA.Скремблированная последовательность миРНК: UGGUUUACAUGUCGACUAA.

Статистический анализ

Данные для анализа МТТ, обнаружения АФК и вестерн-блоттинга анализировали с использованием t-критерия, одно- или двухфакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений. Значимость была установлена ​​на уровне P <0,05 (Prism; GraphPad Software, Inc., Ла-Хойя, Калифорния).

Результаты

Культура ONHA и экспрессия S1R

Предыдущая работа показала, что S1R экспрессируется в RGCs и глиальных клетках зрительного нерва, но это не было оценено в ONHAs [16].Мы культивировали ONHA от крыс в период между 3 и 5 сутками постнатального развития, используя ранее описанные методы [32, 33]. Мы использовали крыс для этих анализов, потому что во многих механистических исследованиях с участием S1R использовались грызуны. Кроме того, из-за своего относительного размера головка зрительного нерва крысы легче изолировать от окружающих тканей, чем у мыши. Наши культивированные клетки экспрессировали S1R, GFAP и NCAM, но не экспрессировали маркеры олигодендроцитов или микроглии (рис. 1).

Рис. 1. Характеристика культивированных первичных астроцитов головки зрительного нерва крысы (ONHA).

(A) ONHA фиксировали и зондировали антителами против GFAP (красный) и NCAM (зеленый), S1R (красный), OSP (красный) и Iba-1 (красный). Клетки контрастировали с DAPI для маркировки ДНК (синим цветом) в качестве маркера ядер. Шкала шкалы: 50 мкм. (B) Количественный анализ показывает, что более 95% клеток в культуре экспрессируют GFAP. (C) Лизаты клеток ONHA (дорожка 3) были положительными по GFAP, маркеру астроцитов и S1R, но отрицательными по Iba-1, маркеру микроглиальных клеток, и OSP, маркеру олигодендроцитов.Белковый экстракт из мозга крысы (дорожка 1) и из ткани зрительного нерва крысы (дорожка 2) использовали в качестве положительного контроля.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.g001

Защита ONHA от вызванной окислительным стрессом гибели клеток агонистом S1R, (+) — пентазоцином

Мы подвергли ONHA возрастающим дозам (+) — пентазоцина. Затем жизнеспособность клеток измеряли с помощью анализа МТТ. (+) — Пентазоцин не вызывал значительного изменения процента жизнеспособности по сравнению с необработанным контролем (рис. 2А).Этот результат указывает на то, что агонист S1R, (+) — пентазоцин, минимально токсичен для ONHA. Затем мы подвергли культуры ONHA постоянно возрастающему уровню окислительного стресса, применяя увеличивающиеся концентрации химического окислителя, перекиси водорода (H ₂ O ₂ ). Результаты показали зависимое от концентрации снижение жизнеспособности клеток, когда культуры подвергались возрастающим уровням окислительного стресса (рис. 2В). Затем ONHA подвергали воздействию индуцирующих гибель уровней H ₂ O ₂ во время лечения агонистом S1R, (+) — пентазоцином.Мы решили подвергнуть клетки воздействию (+) — пентазоцина в концентрации 10 мкМ, потому что предыдущие исследования показали, что эта доза является нейропротекторной для ганглиозных клеток сетчатки in vitro [21]. Кроме того, было показано, что такая концентрация (+) — пентазоцина снижает окислительный стресс в глиальных клетках Мюллера сетчатки [35]. Когда культуры клеток получали (+) — пентазоцин в течение одного часа до и во время нанесения H ₂ O ₂ , гибель клеток, вызванная окислительным стрессом, была значительно снижена (рис. 2C).

Рис. 2. Влияние (+) — пентазоцина и H ₂ O ₂ на жизнеспособность ONHA.

(A) ONHA обрабатывали (+) — пентазоцином (PTZ) в различных концентрациях (1,3,10 или 50 мкМ) в течение 24 часов. МТТ-анализ проводили для оценки жизнеспособности. Обработка PTZ не вызвала значительного изменения процента жизнеспособности по сравнению с необработанными контрольными клетками. При самой высокой концентрации PTZ (50 мкМ) наблюдалась тенденция к снижению жизнеспособности, которая была незначительной.(B) ONHA подвергались воздействию различных концентраций H ₂ O ₂ (50, 100, 150, 200, 250, 500 мкМ) в течение 24 часов. H ₂ O ₂ индуцировал смерть ONHA дозозависимым образом. (C) ONHA обрабатывали 100 мкМ H ₂ O ₂ в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкМ, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой). Воздействие H ₂ O ₂ значительно снизило жизнеспособность по сравнению с необлученными клетками. По сравнению с H ₂ O ₂ -экспозиция без обработки PTZ, H ₂ O ₂ -экспонированные, обработанные PTZ ONHA показали значительно повышенную жизнеспособность.Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений. Значительно отличается от контроля * P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001, **** P <0,0001. Значительно отличается между группами ### P <0,001. Эксперименты проводили в четырех повторностях и повторяли 3 раза.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.g002

Агонист S1R, (+) — пентазоцин ингибирует образование ROS, вызванное окислительным стрессом в ONHA

Исследования показывают, что повышенные внутриклеточные активные формы кислорода (АФК) будут влиять на функциональную способность астроцитов, независимо от их жизнеспособности [36].Например, увеличение внутриклеточных АФК приводит к изменению поглощения глутамата астроцитами и нарушению глиопротекции связанных нейронов [37]. Таким образом, мы измерили внутриклеточную генерацию АФК внутри ONHA, с (+) — пентазоцином и без него, в присутствии окислительного стресса. Обнаружение внутриклеточных АФК проводили с использованием реагента CellROX Green. Мы обнаружили, что воздействие ONHA на H ₂ O ₂ вызывало значительное увеличение внутриклеточных АФК (рис. 3). Когда подвергнутые окислительному стрессу культуры клеток обрабатывали (+) — пентазоцином, внутриклеточная генерация АФК была значительно подавлена ​​(рис. 3).Обработка контрольных ONHA (+) — пентазоцином в отсутствие окислительного стресса не вызвала значительного изменения внутриклеточной генерации ROS (рис. 3).

Рис. 3. Влияние PTZ на генерацию ROS при воздействии на ONHA H ₂ O ₂ .

(A) Типичные изображения ONHA, обработанных 100 мкМ H ₂ O ₂ в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкМ, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой). Генерацию АФК визуализировали с помощью реагента CellROX Green.Шкала шкалы: 100 мкм. (B) Количественный анализ внутриклеточных АФК. Для каждой группы были количественно определены три покровных стекла, и восемь изображений были взяты из каждого покровного стекла. Средняя интенсивность сигнала была определена с помощью ImageJ. Генерация внутриклеточных АФК увеличивалась, когда ONHA подвергались воздействию H ₂ O ₂ . Генерация ROS была заблокирована PTZ. Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений. Значительно отличается от контроля **** P <0.0001. Значительно отличается между группами #### P <0,0001. Опыты повторяли 3 раза.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.g003

(+) — Опосредованные пентазоцином эффекты на активацию ERK1 / 2 у ONHA, подверженных окислительному стрессу

Несколько недавних исследований связали эффекты агонистов S1R на выживание с изменениями статуса фосфорилирования ERK1 / 2 [20, 21, 26]. Например, активация ERK, индуцированная стимуляцией S1R, приводит к защите очищенных RGC в условиях кислородно-глюкозной депривации [21].Чтобы изучить влияние (+) — пентазоцина на активацию ERK1 / 2 внутри ONHA, мы сначала проанализировали фосфорилирование ERK1 / 2 в культурах ONHA, подвергнутых воздействию H ₂ O ₂ (100 мкм) в концентрации, которая, как ранее было показано, вызывает тяжелые клеточные стресс (рис. 2C). Культуры обрабатывали H ₂ O ₂ (100 μ M) в течение 15 минут, 30 минут, 1 часа, 3 часов или 24 часов. Затем клетки собирали и проводили вестерн-блоттинг для анализа фосфорилированной фракции общего белка ERK1 / 2 (pERK1 / 2).В соответствии с предыдущими исследованиями астроцитов, подверженных окислительному стрессу, мы обнаружили, что воздействие ONHA на H ₂ O ₂ приводило к увеличению уровней pERK1 / 2 в моменты времени от 15 минут до 24 часов после нанесения, с максимальной активацией. в 30-минутный момент времени (рис. 4A) [38]. Затем культуры обрабатывали (+) — пентазоцином в течение одного часа до и во время воздействия H ₂ O ₂ . Результирующий анализ показал, что уровень и продолжительность фосфорилирования ERK1 / 2 в клетках, обработанных (+) — пентазоцином, были снижены по сравнению с контролем (Фиг.4A и 4B).Кроме того, колоколообразная кривая фосфорилирования ERK1 / 2 была сдвинута на более ранние временные точки. В отличие от контрольных клеток, пик фосфорилирования ERK1 / 2 наблюдался уже через 15 минут в клетках, обработанных пентазоцином (фиг. 4A и 4B). Несмотря на этот временной сдвиг, общий уровень фосфорилирования ERK1 / 2 в моменты времени, превышающие 30 минут, был значительно снижен в обработанных пентазоцином клетках по сравнению с контролем (фиг. 4A и 4B).

Рис. 4. Ингибирование фосфорилирования ERK1 / 2 в ONHA.

(A) ONHA инкубировали с 100 мкМ H ₂ O ₂ при 37 ° C в течение 15 минут, 30 минут, 1 часа, 3 часов и 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкм, предварительная обработка в течение 1 часа). с последующим лечением). Показан вестерн-блот-анализ клеточных лизатов. Фосфорилирование ERK увеличивалось через 15 минут после нанесения H ₂ O ₂ и достигало пика между 30 минутами и 1 часом. Лизаты, полученные из клеток, подвергшихся воздействию H ₂ O ₂ и обработанных PTZ, показали снижение фосфорилирования ERK через 1 час, 3 часа и 24 часа.(B) Количественный анализ уровней pERK, представленных как pERK, нормализованный к общему ERK. Результаты представлены как кратное изменение отношения pERK / общего ERK, полученного из H ₂ O ₂ экспонированных клеток по сравнению с не-H ₂ O ₂ экспонированных клеток. Опыты повторяли 3 раза. Данные были проанализированы с использованием двухфакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений. Уровни значимости для изменения pERK в необработанной (без PTZ) контрольной группе (черные столбцы) следующие: * p <0.05 ** p <0,01, *** p <0,001. Уровень значимости изменения pERK в группе, получавшей PTZ (серые столбцы), следующий: ♮ p <0,05. Значимость между необработанной контрольной группой (черные столбцы) и группой, обработанной PTZ (серые столбцы) в 1 час, 3 часа и 24 часа времени, представлена ​​следующим образом: #p <0,05 Обратите внимание, что изменение pERK между этими группами было не имеет значения в 0-й, 15-й и 30-й моменты времени. (C) ONHA подвергали воздействию 100 мкМ H ₂ O ₂ в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие U0126 (10 мкМ, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой).Вестерн-блот показал снижение уровней фосфорилирования ERK в условиях обработки U0126 по сравнению с отсутствием лечения. (D) ONHA обрабатывали 100 мкМ H ₂ O ₂ в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие U0126 (10 мкМ, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой). МТТ-анализ проводили для оценки жизнеспособности. Воздействие H ₂ O ₂ значительно снизило жизнеспособность ONHA, а обработка U0126 увеличила жизнеспособность по сравнению с необработанными, H ₂ O ₂ -экспонированными клетками.Комбинированная обработка PTZ и U0126 не показала значительного аддитивного эффекта на жизнеспособность клеток. Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений. Значительно отличается от контроля: **** p <0,0001. Значительно отличается между группами: #### p <0,0001. Эксперименты проводили в четырех повторностях и повторяли 3 раза.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.g004

Ингибирование фосфорилирования ERK1 / 2 способствует выживанию ONHA

Как описано выше, обработка ONHA, подверженных окислительному стрессу, с помощью (+) — пентазоцина приводит к увеличению выживаемости и ослаблению активации ERK1 / 2.Чтобы определить, может ли снижение фосфорилирования ERK1 / 2 быть механизмом, посредством которого (+) — пентазоцин способствует выживанию, мы проанализировали эффекты ингибирования активации ERK1 / 2 в ONHA. Для этого мы обрабатывали культуры ONHA ингибитором фосфорилирования ERK U0126 в течение одного часа до и во время применения окислительного стресса. Жизнеспособность обработанных U0126 ONHA оценивали после 24 часов воздействия H ₂ O ₂ . Культуры клеток, обработанные U0126, показали снижение гибели клеток и фосфорилирования ERK1 / 2 по сравнению с необработанными культурами (фиг. 4C и 4D).Эти результаты предполагают, что ингибирование активации ERK1 / 2 способствует выживанию ONHA в условиях окислительного стресса.

Нокдаун S1R в блоках ONHA (+) — опосредованные пентазоцином эффекты выживания

Результаты, представленные на фиг. 2, предполагают, что специфический агонист S1R, (+) — пентазоцин, защищает ONHA от гибели клеток, вызванной окислительным стрессом. Чтобы проверить гипотезу о том, что (+) — пентазоцин-опосредованное выживание клеток происходит посредством S1R-зависимого механизма, мы истощили S1R в ONHA, используя небольшие интерферирующие (si) РНК.

Первоначальные эксперименты по нокдауну проводили с использованием клеточной линии рака шейки матки человека (клетки HeLa), поскольку предварительные условия для трансфекции легче определять с использованием клеточной линии по сравнению с первичными ONHA. Культуры клеток трансфицировали скремблированной миРНК или миРНК S1R, нацеленной на человеческий S1R. Вестерн-блоттинг использовали для измерения уровня белка S1R через 3 дня и 6 дней после трансфекции. Эти анализы не показали изменений в уровне белка S1R в культурах, трансфицированных скремблированными siRNA.Однако через 3 и 6 дней после трансфекции siRNA S1R мы обнаружили значительное снижение уровней белка S1R (рис. 5A – 5D). Затем, используя анализ МТТ, мы измерили жизнеспособность клеток HeLa через 3 дня и 6 дней после трансфекции siRNA. Клетки, трансфицированные скремблированной миРНК, не показали изменения жизнеспособности по сравнению с нетрансфицированными культурами (фиг. 5G и 5H). Однако нокдаун S1R приводил к значительной исходной гибели клеток HeLa без воздействия окислительного стресса (рис. 5E и 5F).Эти результаты согласуются с предыдущими сообщениями, показывающими, что ингибирование S1R ограничивает рост и вызывает гибель быстро делящихся культур клеток [22, 23].

Рис. 5. Нокдаун S1R в клетках HeLa и ONHA.

HeLa трансфицировали скремблированной siRNA человека или siRNA S1R человека. Показан вестерн-блот-анализ уровней S1R через 3 дня (A) и 6 дней (B) после трансфекции. Количественная оценка результатов вестерн-блоттинга показывает уровни S1R, нормализованные к GAPDH, в качестве внутреннего контроля (C, D).Результаты представлены как кратное изменение уровней S1R, полученных из клеток, трансфицированных siRNA S1R, по сравнению с уровнями S1R, полученными из клеток, трансфицированных скремблированной siRNA. Данные были проанализированы с использованием t-критерия. Значительно отличается от контроля * p <0,05, ** p <0,01. Опыты повторяли 3 раза. МТТ-анализ проводили для оценки жизнеспособности через 3 дня (E) и 6 дней (F) после трансфекции скремблированной или S1R siRNA. Жизнеспособность была значительно снижена в клетках HeLa, трансфицированных S1R siRNA, по сравнению со скремблированными клетками, трансфицированными siRNA.Трансфекция скремблированной миРНК не вызывала значительной гибели клеток HeLa по сравнению с контролем без трансфекции (G, H). Данные были проанализированы с использованием t-критерия. Значительно отличается от контроля **** p <0,0001. Эксперименты проводили в четырех повторностях и повторяли 3 раза. ONHA трансфицировали скремблированной siRNA крысы или siRNA S1R крысы. Показан вестерн-блот-анализ уровней S1R через 3 дня (I) и 6 дней (J) после трансфекции. Количественная оценка результатов вестерн-блоттинга показывает уровни S1R, нормализованные к GAPDH, в качестве внутреннего контроля (K, L).Результаты представлены как кратное изменение уровней S1R, полученных из клеток, трансфицированных siRNA S1R, по сравнению с уровнями S1R, полученными из клеток, трансфицированных скремблированной siRNA. Данные были проанализированы с использованием t-критерия. Значительно отличается от контроля: ** p <0,01, *** p <0,001. Опыты повторяли 3 раза. МТТ-анализ проводили для оценки жизнеспособности через 3 дня (M) и 6 дней (N) после трансфекции скремблированной или S1R siRNA. Жизнеспособность ONHA, трансфицированных S1R siRNA, существенно не изменилась по сравнению со скремблированными клетками, трансфицированными siRNA.Трансфекция скремблированной миРНК не вызывала значительной гибели ONHA по сравнению с контролем без трансфекции (O, P). Эксперименты проводили в четырех повторностях и повторяли 3 раза.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.g005

Затем мы выполнили нокдаун S1R в первичных ONHA. Культуры трансфицировали скремблированной миРНК или миРНК S1R, нацеленной на крысиный S1R. В соответствии с результатами, полученными на клетках HeLa, эффективность нокдауна S1R была значительной через 3 и 6 дней после трансфекции ONHA (рис. 5I – 5L).В отличие от результатов, наблюдаемых в клетках HeLa, нокдаун S1R в ONHAs не оказывает значительного влияния на жизнеспособность клеток (Fig. 5M – 5P).

Затем мы определили, может ли (+) — пентазоцин защищать S1R-нокдаун ONHA от вызванной окислительным стрессом гибели клеток. Таким образом, мы подвергли нокдаун клеточные культуры 100 мкМ H ₂ O ₂ в присутствии или в отсутствие обработки (+) — пентазоцином (рис. 6A). Необработанные нокдаун-культуры, подвергнутые воздействию 100 мкМ H ₂ O ₂ , показали значительную гибель клеток через 6 дней после трансфекции siRNA S1R (фиг. 6A).Когда идентично экспонированные культуры с нокдауном S1R обрабатывали (+) — пентазоцином, не наблюдалось значительной защиты от гибели клеток (фиг. 6A).

Рис. 6. Нокдаун S1R в блоках ONHA (+) — опосредованное пентазоцином подавление генерации ROS.

(A) Через пять дней после трансфекции siRNA S1R, ONHA обрабатывали 100 мкМ H ₂ O ₂ в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкМ, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой). МТТ-анализ проводили для оценки жизнеспособности.100 мкМ H ₂ O ₂ индуцировали 50% гибели клеток, а обработка PTZ не приводила к значительному увеличению жизнеспособности клеток. (B-C) Эффект нокдауна S1R на генерацию ROS в ONHA. Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений. Значительно отличается от контроля: *** p <0,001, **** p <0,0001. (B) Типичные изображения ONHA через шесть дней после трансфекции либо скремблированной миРНК, либо миРНК S1R. Генерацию АФК визуализировали с помощью реагента CellROX Green.Шкала шкалы: 100 мкм. (C) Количественный анализ внутриклеточных АФК. Для каждой группы были количественно определены три покровных стекла, и восемь изображений были взяты из каждого покровного стекла. Средняя интенсивность сигнала была определена с помощью ImageJ. Трансфекция скремблированной миРНК не приводила к значительному увеличению генерации АФК по сравнению с нетрансфицированными контрольными клетками. ONHA, трансфицированные S1R siRNA, показали повышенные внутриклеточные ROS по сравнению со скремблированными ONHA, трансфицированными siRNA. Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений.Значительно отличается от контроля: ** p <0,01. Значительно различается между группами: #p <0,05. (D) Типичные изображения ONHA, трансфицированных siRNA S1R, обработанных 100 мкМ H ₂ O ₂ с или без PTZ в течение 24 часов. Шкала шкалы: 100 мкм. (E) Количественный анализ внутриклеточных АФК. Для каждой группы были количественно определены три покровных стекла, и восемь изображений были взяты из каждого покровного стекла. Средняя интенсивность сигнала была определена с помощью ImageJ. Генерация АФК увеличивалась, когда клетки инкубировали с H ₂ O ₂ .Генерация ROS не подавлялась обработкой PTZ. Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений. Значительно отличается от контроля * p <0,05. Опыты повторяли 3 раза.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.g006

Как описано выше (рис. 3), мы ранее наблюдали снижение образования ROS, когда H ₂ O ₂ -экспонированные ONHA обрабатывались (+ ) -пентазоцин. Чтобы определить, происходит ли (+) — пентазоцин-опосредованное ингибирование генерации ROS через S1R, мы измерили генерацию активных форм кислорода (ROS) в ONHA, нокдаун S1R.Измерения проводились в условиях воздействия H ₂ O ₂ , в присутствии и в отсутствие (+) — пентазоцина. Уровни внутриклеточных ROS определяли, как описано на фиг. 3. В отличие от клеток, трансфицированных скремблированной siRNA, ONHA с нокдауном S1R показали высокое исходное образование ROS (фиг. 6B и 6C). Воздействие ONHA на S1R siRNA-трансфицированные H ₂ O ₂ привело к значительному увеличению внутриклеточной генерации ROS (фиг. 6D и 6E). Обработка H ₂ O ₂ -экспонированных S1R-нокдаун-культур (+) — пентазоцином не оказывала значительного ингибирования генерации ROS (фиг. 6D и 6E).

В целом, эти результаты предполагают, что нокдаун S1R блокирует (+) — пентазоцин-индуцированное уменьшение образования ROS и ингибирует (+) — пентазоцин-опосредованные эффекты выживания при воздействии окислительного стресса ONHA. Таким образом, S1R, по-видимому, необходим для повышения выживаемости (+) — пентазоцина на ONHA.

Нокдаун S1R в ONHA увеличивает исходное фосфорилирование ERK1 / 2 и блокирует (+) — пентазоцин-опосредованное подавление фосфорилирования ERK1 / 2

Как описано выше, наши результаты показывают, что обработка ONHA (+) — пентазоцином ингибирует вызванную окислительным стрессом активацию ERK1 / 2 (рис. 4).Чтобы выяснить, может ли подавление активации ERK1 / 2 происходить через S1R, мы выполнили нокдаун S1R в ONHA с последующим вестерн-блоттингом уровней pERK1 / 2. Культуры клеток с S1R-нокдауном обрабатывали с окислительным стрессом или без него (H ₂ O ₂ ) в присутствии или в отсутствие (+) — пентазоцина. Измерение фосфорилирования ERK1 / 2 проводили в моменты времени от 15 минут до 24 часов после нанесения H ₂ O ₂ . В отличие от scrambled siRNA-трансфицированных клеток, S1R-нокдаун ONHAs обнаруживает высокий исходный уровень pERK (Fig. 7A-7D), с тенденцией к увеличению активации ERK1 / 2 в присутствии окислительного стресса.Обработка (+) — пентазоцином существенно не подавляла фосфорилирование ERK1 / 2 (фиг. 7E и 7F). Основываясь на этих результатах, мы заключаем, что функция S1R снижает уровни pERK1 / 2 на исходном уровне у ONHA. Кроме того, наши результаты также предполагают, что (+) — пентазоцин-опосредованное подавление вызванной окислительным стрессом активации ERK1 / 2 происходит через S1R.

Рис. 7. Нокдаун S1R внутри ONHA блокирует (+) — пентазоцин-опосредованное подавление фосфорилирования ERK1 / 2.

Фофорилирование ERK было обнаружено через 3 дня (A) и 6 дней (C) после трансфекции скремблированной или S1R siRNA в ONHA.Через 3 дня (A) и 6 дней (C) после трансфекции siRNA S1R, pERK увеличивался по сравнению с контролем зашифрованной siRNA. (B, D) Количественный анализ уровней pERK, представленных как pERK, нормализованные к общему ERK. Результаты представлены как кратное изменение отношения pERK / общего ERK, полученного из клеток, трансфицированных siRNA S1R, по сравнению с контрольными клетками, трансфицированными скремблированной siRNA. Данные были проанализированы с использованием t-критерия. Значительно отличается от контроля: * p <0,05. Опыты повторяли 3 раза. (E) Эффект PTZ на H ₂ O ₂ -экспонированная миРНК S1R, трансфицированная ONHA.Через 5 дней после трансфекции siRNA S1R ONHA инкубировали со 100 мкМ H ₂ O ₂ при 37 ° C в течение 15 минут, 30 минут, 1 часа, 3 часов и 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкМ, 1 часовая предварительная обработка с последующей совместной обработкой). Показан вестерн-блоттинг. (F) Количественный анализ уровней pERK, представленных как pERK, нормализованный к общему ERK. Результаты представлены в виде кратного изменения отношения pERK / общего ERK, полученного из H ₂ O ₂ экспонированных клеток, трансфицированных siRNA S1R, по сравнению с контрольными не-H ₂ O ₂ экспонированных клеток, трансфицированных siRNA S1R.Данные были проанализированы с использованием двухфакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки-Крамера для множественных сравнений.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.g007

Обсуждение

Агонисты и антагонисты S1R могут предложить новые варианты лечения широкого спектра заболеваний, включая нейродегенеративные заболевания и рак [7, 8, 12, 39]. Стимуляция S1R защищает очищенные нейроны, в том числе RGC, от гибели клеток в условиях окислительного, метаболического и эксайтотоксического стресса [7, 14, 21].Однако S1R экспрессируются в глии, а также в нейронах головного мозга, спинного мозга и зрительного нерва [16, 40, 41]. Предыдущая работа с использованием астроцитов головного мозга показывает, что ингибирование S1R приводит к снижению реактивности астроцитов [42]. Однако эффекты активации или ингибирования S1R на астроцитах, происходящих из глазных тканей, недостаточно хорошо охарактеризованы. Многочисленные исследования показывают, что глия имеет решающее значение для здоровья и выживания нейронов [43, 44]. В соответствии с этими находками, астроциты могут модулировать функцию ассоциированных RGCs, а изменения внутри астроцитов ONH являются одними из самых ранних признаков глаукомной оптической нейропатии [45–47].Следовательно, результаты этих анализов имеют решающее значение для оценки S1R как терапевтической мишени.

Наши результаты показывают, что стимуляция S1R с использованием специфического агониста (+) — пентазоцина защищает ONHA от гибели в условиях окислительного стресса. Кроме того, мы обнаружили, что лечение (+) — пентазоцином подавляет генерацию ROS и модулирует активацию ERK в ONHA. Несколько исследований показывают, что (+) — пентазоцин действует специфически через S1R [48, 49]. Однако в некоторых сообщениях описываются неспецифические (+) — пентазоцин-опосредованные эффекты [50].Наши результаты показывают, что (+) — пентазоцин-ассоциированные реакции выживания блокируются нокдауном S1R. Таким образом, мы заключаем, что S1R опосредует эти эффекты.

Начальные трансфекции миРНК S1R выполняли с использованием линии клеток HeLa. Интересно, что нокдаун S1R в этих культурах вызывал значительную гибель клеток на исходном уровне, независимо от воздействия окислительного стресса. Сравнение уровней белка S1R между трансфицированными клетками HeLa и ONHA показало сходную эффективность нокдауна S1R.Однако, в отличие от клеток HeLa, подавление экспрессии S1R внутри ONHA не приводило к значительной исходной гибели клеток. В нескольких исследованиях оценивали проапоптотические и ингибирующие рост эффекты ингибирования S1R в типах неопластических клеток [12, 51]. Сообщенные механизмы, которые лежат в основе этих эффектов, включают прямую регуляцию сигнальных путей апоптоза, ER и ответы на окислительный клеточный стресс [22, 23, 52]. Наши результаты подтверждают гипотезу о том, что S1R может быть терапевтической мишенью, специфичной для рака.Однако нокдаун S1R в ONHA был связан с повышенным уровнем ROS и более высоким исходным уровнем фосфорилирования ERK. Таким образом, хотя на выживание ONHA не влияло нокдаун S1R, их функции in vivo и все еще могут быть нарушены. Таким образом, следует учитывать эффекты ингибирования S1R на эти и другие типы клеток, если ингибирование S1R используется системно при лечении рака.

Недавние сообщения показывают, что агонисты S1R, включая (+) — пентазоцин, усиливают фосфорилирование ERK1 / 2 в нейронах.Например, исследования с использованием обработанных (+) — пентазоцином культур первичных RGCs обнаружили S1R-зависимое увеличение фосфорилирования ERK1 / 2 после 6 часов кислородно-глюкозной депривации [21]. Кроме того, исследования показали, что агонист S1R, 4-PPBP, усиливает фосфорилирование ERK1 / 2 в первичных культурах, происходящих из смешанных нейронов коры и гиппокампа [25].

Наши данные, показывающие S1R-опосредованное подавление активации ERK1 / 2 в астроцитах головки зрительного нерва, по-видимому, противоречат исследованиям, полученным на культурах нейронов, как обсуждалось выше.Наши результаты показывают, что стимуляция S1R с помощью (+) — пентазоцина подавляет активацию ERK1 / 2 в астроцитах, происходящих из головки зрительного нерва. Мы также показали, что (+) — пентазоцин ингибирует фосфорилирование ERK1 / 2 в первичной микроглии сетчатки [28]. Взятые вместе, результаты предполагают, что опосредованная агонистами стимуляция S1R ведет к дифференциальной модуляции активности ERK в первичных нейронах по сравнению с глией.

В целом, результаты нескольких исследований показывают, что агонисты S1R действуют, увеличивая фосфорилирование ERK1 / 2 в некоторых случаях, но действуют, уменьшая фосфорилирование ERK1 / 2 в других.Это может показаться нелогичным, но многие препараты, в том числе агонисты S1R, при некоторых обстоятельствах могут проявлять противоположные эффекты [53, 54]. Помимо различий в типах клеток, физиопатологические условия, при которых используется лекарство, а также его концентрация в месте действия могут определять задействованные сигнальные каскады.

Активность основных сигнальных путей протеинкиназы, включая ERK1 / 2, действительно варьируется в зависимости от анализируемой клеточной модели. Например, в линии олигодендроглиальных клеток CG4 фармакологическая блокада пути ERK1 / 2 предотвращает гибель клеток, индуцированную H ₂ O ₂ [55].Кроме того, ингибирование ERK1 / 2 внутри клеток глии блокирует выработку нейротоксичного оксида азота и защищает нейроны среднего мозга от дегенерации [56]. Однако внутри нейронов индуцированная глутаматом временная активация ERK1 / 2 вызывает реакцию просживания, в то время как индуцированная окислительным стрессом устойчивая активация ERK1 / 2 способствует гибели нейронов [57]. В целом вполне вероятно, что величина и продолжительность активации ERK1 / 2 в пределах данного типа клеток определяет способность этой протеинкиназы способствовать жизни или смерти [58].Наши результаты показывают, что длительное ингибирование фосфорилирования ERK1 / 2 увеличивает жизнеспособность ONHA, подверженных окислительному стрессу. Следовательно, ингибирование фосфорилирования ERK, вероятно, является одним из механизмов, посредством которого S1R опосредует эффекты выживания внутри ONHA. Однако было показано, что S1R взаимодействует с множеством внутриклеточных мишеней. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы выяснить, какой из многих опосредованных S1R эффектов способствует выживанию ONHA после лечения агонистом S1R, (+) — пентазоцином.

Несмотря на явно противоположные специфические для клеточного типа эффекты S1R на активность ERK1 / 2, агонисты S1R способствуют выживанию во множественных первичных культурах клеток [21, 25, 27, 59]. Более того, стимуляция S1R в астроцитах головки зрительного нерва и сетчатке микроглия приводит к снижению образования внутриклеточных АФК и снижению высвобождения нейротоксических воспалительных цитокинов. Следовательно, хотя агонисты S1R могут по-разному модулировать активность ERK1 / 2 в глиальных клетках и RGC, общий эффект стимуляции S1R в этих типах клеток может способствовать нейропротекции.Например, множество исследований показывают, что нейровоспаление, опосредованное микроглией и астроцитами, является ключевым фактором дегенерации зрительного нерва при глаукоме [60, 61]. Агонисты S1R могут действовать как в астроцитах, так и в микроглии, смягчая нейротоксические воспалительные реакции, одновременно усиливая пути выживания в самих нейронах зрительной системы. Если это так, активация S1R предложит мощный, плюрипотентный терапевтический вариант нейропротективного лечения глаукомы.Кроме того, антагонисты S1R обычно подавляют рост и выживание клеток [12, 22, 62]. Наши результаты соответствуют этим парадигмам.

Вспомогательная информация

Набор данных S1. Характеристика культивированных первичных астроцитов головки зрительного нерва крысы (ONHA).

(A) Дополнительные репрезентативные изображения, показывающие ONHA, зафиксированные и исследованные с помощью GFAP (красный), OSP (красный) и Iba-1 (красный). Клетки контрастировали DAPI (синий). (B) Репрезентативные изображения, показывающие DAPI-положительные клетки, GFAP-положительные клетки, OSP-положительные клетки и Iba-1-положительные клетки, подсчитывали для анализа чистоты культивированных ONHA.(C) Оригинальные вестерн-блоты, показывающие, что культивируемые ONHA экспрессируют GFAP и S1R, но не Iba-1 и OSP.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.s001

(TIF)

S2 Набор данных. Влияние (+) — пентазоцина и H

Исходные данные GraphPad показали, что A) PTZ не вызывал значительного изменения процентной жизнеспособности по сравнению с необработанным контролем, B) H ₂ O ₂ индуцировал смерть ONHA дозозависимым образом, и C) по сравнению с H ₂ O ₂ — облучение без обработки PTZ, H ₂ O ₂ — облученные, обработанные PTZ ONHA показали значительно повышенную жизнеспособность.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.s002

(ZIP)

Набор данных S3. Влияние PTZ на генерацию ROS в H

Дополнительные репрезентативные изображения ONHA, обработанных 100 мкМ H ₂ O ₂ в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкМ, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой). Наши данные показали, что внутриклеточная генерация ROS увеличивалась, когда ONHA подвергались воздействию H ₂ O ₂ .Генерация ROS была заблокирована PTZ.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.s003

(TIF)

Набор данных S4. Ингибирование фосфорилирования ERK1 / 2 в ONHA.

ONHA инкубировали с 100 мкМ H ₂ O ₂ при 37 ° C в течение 15 минут, 30 минут, 1 часа, 3 часов и 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкм, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой). ). Исходные вестерн-блоттинги всех 3 серий экспериментов показали, что фосфорилирование ERK увеличивалось через 15 минут после нанесения H ₂ O ₂ и достигало пика между 30 минутами и 1 часом.Лизаты, полученные из клеток, подвергшихся воздействию H ₂ O ₂ и обработанных PTZ, показали снижение фосфорилирования ERK через 1 час, 3 часа и 24 часа.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.s004

(TIF)

Набор данных S5. Нокдаун S1R в клетках HeLa и ONHA.

(A) Клетки HeLa трансфицировали скремблированной siRNA человека или siRNA S1R человека. Исходные вестерн-блоты всех 3 серий экспериментов показали, что уровни экспрессии S1R были снижены после 3 дней и 6 дней трансфекции siRNA S1R в клетках HeLa.(B) ONHA трансфицировали крысиной скремблированной siRNA или siRNA S1R крысы. Исходные вестерн-блоты всех 3 серий экспериментов показали, что уровни экспрессии S1R были снижены через 3 и 6 дней трансфекции siRNA S1R в ONHA.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.s005

(TIF)

Набор данных S6. Нокдаун S1R в блоках ONHA (+) — опосредованное пентазоцином подавление генерации ROS.

Через пять дней после трансфекции siRNA S1R, ONHA обрабатывали 100 мкМ H ₂ O ₂ в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкМ, предварительная обработка в течение 1 часа с последующей совместной обработкой).Дополнительные репрезентативные изображения показывают влияние нокдауна S1R на генерацию ROS в ONHA.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.s006

(TIF)

Набор данных S7. Нокдаун S1R в ONHA блокирует опосредованное (+) — пентазоцином подавление фосфорилирования ERK1 / 2.

Через 5 дней после трансфекции siRNA S1R ONHA инкубировали с 100 мкМ H ₂ O ₂ при 37 ° C в течение 15 минут, 30 минут, 1 часа, 3 часов и 24 часов в присутствии или в отсутствие PTZ (10 мкМ , 1 час предварительной обработки с последующей обработкой).Исходные вестерн-блоттинги всех 3 серий экспериментов показали эффект PTZ на H ₂ O ₂ -экспонированный, S1R siRNA-трансфицированный ONHA.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0184421.s007

(TIF)

Список литературы

1. 1. Хаяси Т., Су Т.П. Шапероны рецептора сигма-1 на границе ER-митохондрии регулируют передачу сигналов Ca (2+) и выживаемость клеток. Клетка. 2007. 131 (3): 596–610. Epub 2007/11/06. pmid: 17981125.
2. 2.Мавлютов Т.А., Дуэллман Т., Ким Х.Т., Эпштейн М.Л., Лиз С., Давлетов Б.А. и др. Экспрессия рецептора сигма-1 в ганглии заднего корешка: повторное исследование с использованием высокоспецифичного антитела. Неврология. 2016; 331: 148–57. Epub 2016/06/25. pmid: 27339730
3. 3. Алонсо Г., Фан В., Гиймен И., Сонье М., Легран А., Аноал М. и др. Иммуноцитохимическая локализация рецептора сигма (1) в центральной нервной системе взрослых крыс. Неврология. 2000. 97 (1): 155–70. Epub 2000/04/20.pmid: 10771347.
4. 4. Whitlock BB, Liu Y, Chang S, Saini P, Ha BK, Barrett TW и др. Первоначальная характеристика и авторадиографическая локализация нового сигма / опиоидного сайта связывания в иммунных тканях. Журнал нейроиммунологии. 1996. 67 (2): 83–96. Epub 1996/07/01. pmid: 8765330.
5. 5. Вулф С.А. младший, Калп С.Г., Де Соуза Е.Б. Сигма-рецепторы в эндокринных органах: идентификация, характеристика и авторадиографическая локализация в гипофизе, надпочечниках, семенниках и яичниках крыс.Эндокринология. 1989. 124 (3): 1160–72. Epub 1989/03/01. pmid: 2537173.
6. 6. Су ТП, Су ТС, Накамура Ю., Цай С.Ю. Рецептор сигма-1 как плюрипотентный модулятор в живых системах. Направления фармакологических наук. 2016; 37 (4): 262–78. Epub 2016/02/13. pmid: 26869505
7. 7. Смит С.Б., Дюплантье Дж., Дан Й., Майсона Б., Роон П., Мартин П.М. и др. Защита in vivo от нейродегенерации сетчатки с помощью лиганда сигма-рецептора 1 (+) — пентазоцина. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci.2008. 49 (9): 4154–61. Epub 2008/05/13. pmid: 18469181.
8. 8. Нгуен Л., Каушал Н., Робсон М.Дж., Мацумото Р.Р. Сигма-рецепторы как потенциальные терапевтические мишени для нейрозащиты. Европейский журнал фармакологии. 2014; 743: 42–7. Epub 2014/09/28. pmid: 25261035
9. 9. Francardo V, Bez F, Wieloch T, Nissbrandt H, Ruscher K, Cenci MA. Фармакологическая стимуляция рецепторов сигма-1 оказывает нейровосстановительное действие при экспериментальном паркинсонизме. Мозг: журнал неврологии.2014; 137 (Pt 7): 1998–2014. Epub 2014/04/24. pmid: 24755275.
10. 10. Ajmo CT Jr., Vernon DO, Collier L, Pennypacker KR, Cuevas J. Активация сигма-рецептора уменьшает размер инфаркта через 24 часа после постоянной окклюзии средней мозговой артерии у крыс. Текущие нейрососудистые исследования. 2006. 3 (2): 89–98. Epub 2006/05/25. pmid: 16719792.
11. 11. Бехенский А.А., Ясный И.Е., Шустер А.М., Середенин С.Б., Петров А.В., Куэвас Дж. Стимуляция сигма-рецепторов афобазолом блокирует активацию микроглии и снижает токсичность, вызванную бета-амилоидом 25-35.Журнал фармакологии и экспериментальной терапии. 2013. 347 (2): 458–67. Epub 2013/09/06. pmid: 24006337.
12. 12. ван Ваард А., Рыбчинская А.А., Рамакришнан Н.К., Ишивата К., Эльсинга PH, Диркс Р.А. Возможные применения лигандов сигма-рецепторов в диагностике и терапии рака. Biochimica et biophysica acta. 2015; 1848 (10 Pt B): 2703–14. Epub 2014/09/01. pmid: 25173780.
13. 13. Морис Т., Су ТП. Фармакология рецепторов сигма-1. Фармакология и терапия.2009. 124 (2): 195–206. Epub 22.07.2009. pmid: 19619582
14. 14. Мартин П.М., Ола М.С., Агарвал Н., Ганапати В., Смит С.Б. Лиганд сигма-рецептора (+) — пентазоцин предотвращает апоптотическую гибель ганглиозных клеток сетчатки, вызванную in vitro гомоцистеином и глутаматом. Исследование мозга. Молекулярное исследование мозга. 2004. 123 (1–2): 66–75. Epub 2004/03/30. pmid: 15046867.
15. 15. Мюллер Б.Х. 2-й, Парк Ю., Даудт Д.Р. 3-й, Ма Х.Й., Акопова И., Станковская Д.Л. и др. Стимуляция рецептора сигма-1 ослабляет приток кальция через активированные кальциевые каналы L-типа, управляемые напряжением, в очищенных ганглиозных клетках сетчатки.Экспериментальное глазное исследование. 2013; 107: 21–31. Epub 2012/11/28. pmid: 23183135.
16. 16. Ола М.С., Мур П., Эль-Шербени А., Роон П., Агарвал Н., Сарти В.П. и др. Характер экспрессии мРНК и белка сигма-рецептора 1 в сетчатке млекопитающих. Исследование мозга. Молекулярное исследование мозга. 2001. 95 (1–2): 86–95. Epub 2001/11/01. pmid: 11687279.
17. 17. Ха Й, Саул А., Тауфик А., Уильямс С., Боллинджер К., Смит Р. и др. Поздняя дисфункция внутренней сетчатки у мышей, лишенных сигма-рецептора 1 (sigmaR1).Исследовательская офтальмология и визуализация. 2011. 52 (10): 7749–60. Epub 25.08.2011. pmid: 21862648
18. 18. Ван Дж., Саул А., Рун П., Смит С.Б. Активация молекулярного шаперона, рецептора сигма 1, сохраняет функцию колбочек на мышиной модели наследственной дегенерации сетчатки. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2016; 113 (26): E3764–72. Epub 2016/06/15. pmid: 27298364
19. 19. Мавлютов Т.А., Никеллс Р.В., Го Л.В. Ускоренная гибель ганглиозных клеток сетчатки у мышей с дефицитом рецептора сигма-1.Молекулярное зрение. 2011; 17: 1034–43. Epub 2011/05/05. pmid: 21541278
20. 20. Чжао Дж., Мысона Б.А., Куреши А., Ким Л., Филдс Т., Гонсалвез Г.Б. и др. (+) — Пентазоцин снижает индуцированную NMDA гибель ганглиозных клеток сетчатки мышей посредством sigmaR1-зависимого механизма. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2016; 57 (2): 453–61. Epub 2016/02/13. pmid: 26868747
21. 21. 2-й Мюллер Б.Х., Парк И., Ма Х.Й., Дибас А., Эллис Д.З., Кларк А.Ф. и др. Стимуляция рецептора сигма-1 защищает ганглиозные клетки сетчатки от ишемического поражения за счет активации киназ 1/2, регулируемых внеклеточными сигналами.Экспериментальное глазное исследование. 2014; 128: 156–69. Epub 2014/10/12. pmid: 25305575.
22. 22. Дас Д., Персо Л., Деджуа Дж., Хэппи М., Бранниган О., Де Хесус Д. и др. Лиганд, индуцирующий апоптоз, связанный с фактором некроза опухоли (TRAIL), активирует каспазы в клетках рака простаты человека через рецептор сигма-1. Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях. 2016; 470 (2): 319–23. Epub 2016/01/23. pmid: 267
23. .
24. 23. Happy M, Dejoie J, Zajac CK, Cortez B, Chakraborty K, Aderemi J, et al.Антагонист рецептора Sigma 1 потенцирует противораковое действие p53, регулируя стресс ER, продукцию ROS, уровни Bax и активацию каспазы-3. Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях. 2015. 456 (2): 683–8. Epub 2014/12/17. pmid: 25511708.
25. 24. Wortzel I, Seger R. Каскад ERK: различные функции в различных субклеточных органеллах. Гены и рак. 2011. 2 (3): 195–209. Epub 23.07.2011. pmid: 21779493
26. 25. Тан Ф. Г-А П, Даунс С., Чжан М., О’Донован Л., Каллауэй Дж. К., Crack PJ.Агонист рецептора σ 1 4-PPBP вызывает фосфорилирование ERK1 / 2 в первичных нейронах: возможный механизм нейрозащитного действия. Нейрофармакология. 2010. 59 (6): 416–24. pmid: 20538010
27. 26. Moriguchi S, Yamamoto Y, Ikuno T, Fukunaga K. Стимуляция рецептора сигма-1 дегидроэпиандростероном улучшает когнитивные нарушения за счет активации CaM-киназы II, протеинкиназы C и внеклеточной киназы, регулируемой сигналом, у мышей после обонятельной бульбэктомии. Журнал нейрохимии.2011; 117 (5): 879–91. Epub 26.03.2011. pmid: 21434925.
28. 27. Tuerxun T N T, Adachi N, Kumamaru E, Kitazawa H, Kudo M, Kunugi H. SA4503, агонист рецептора сигма-1, предотвращает культивированные кортикальные нейроны от вызванной окислительным стрессом гибели клеток посредством подавления активации пути MAPK и экспрессии рецептора глутамата. Neurosci Lett. 2010. 469 (3): 303–8. pmid: 20025928
29. 28. Чжао Дж., Ха И, Лиоу Г.И., Гонсальвез Г.Б., Смит С.Б., Боллинджер К.Э. Лиганд сигма-рецептора, (+) — пентазоцин, подавляет воспалительные реакции микроглии сетчатки.Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2014; 55 (6): 3375–84. Epub 2014/05/09. pmid: 24812552
30. 29. Квон YH, Фингерт JH, Куэн MH, Алвард WL. Первичная открытоугольная глаукома. Медицинский журнал Новой Англии. 2009. 360 (11): 1113–24. Epub 2009/03/13. pmid: 19279343
31. 30. Calkins DJ. Критические патогенные события, лежащие в основе прогрессирования нейродегенерации при глаукоме. Прогресс в исследованиях сетчатки и глаз. 2012; 31 (6): 702–19. Epub 2012/08/09. pmid: 22871543
32. 31.Эрнандес MR. Головка зрительного нерва при глаукоме: роль астроцитов в ремоделировании тканей. Прогресс в исследованиях сетчатки и глаз. 2000. 19 (3): 297–321. Epub 2000/04/05. pmid: 10749379.
33. 32. Мандал А., Шахидулла М., Деламер Н.А. Вызванное гидростатическим давлением высвобождение накопленного кальция в культивируемых астроцитах головки зрительного нерва крысы. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 51 (6): 3129–38. Epub 2010/01/15. pmid: 20071675.
34. 33. Beckel JM, Argall AJ, Lim JC, Xia J, Lu W, Coffey EE и др.Механочувствительное высвобождение аденозин-5′-трифосфата через каналы паннексина и механочувствительная активация каналов паннексина в астроцитах головки зрительного нерва: механизм пуринергического вовлечения в хроническое напряжение. Глия. 2014. 62 (9): 1486–501. Epub 2014/05/20. pmid: 24839011
35. 34. Jiang G, Mysona B, Dun Y, Gnana-Prakasam JP, Pabla N, Li W и др. Экспрессия, субклеточная локализация и регуляция сигма-рецептора в клетках Мюллера сетчатки. Исследовательская офтальмология и визуализация.2006. 47 (12): 5576–82. Epub 2006/11/24. pmid: 17122151
36. 35. Ван Дж., Шанмугам А., Марканд С., Зоррилла Е., Ганапати В., Смит С.Б. Рецептор Sigma 1 регулирует реакцию на окислительный стресс в первичных клетках Мюллера сетчатки через передачу сигналов NRF2 и систему xc (-), Na (+) — независимый глутамат-цистиновый обменник. Свободнорадикальная биология и медицина. 2015; 86: 25–36. Epub 2015/04/30. pmid: 25
3
37. 36. Софронев М.В. Молекулярное рассечение реактивного астроглиоза и образования глиального рубца.Тенденции нейробиологии. 2009. 32 (12): 638–47. Epub 2009/09/29. pmid: 19782411
38. 37. Оуян Ю.Б., Волобуева Л.А., Сюй Л.Дж., Жиффар Р.Г. Избирательная дисфункция астроцитов CA1 гиппокампа способствует отсроченному повреждению нейронов после временной ишемии переднего мозга. Журнал неврологии: официальный журнал Общества неврологии. 2007. 27 (16): 4253–60. Epub 2007/04/20. pmid: 17442809
39. 38. Розенбергер Дж., Петрович Г., Бузас Б. Окислительный стресс индуцирует экспрессию проорфанина FQ и гена проэнкефалина в астроцитах через киназы p38- и ERK-MAP и NF-kappaB.Журнал нейрохимии. 2001. 79 (1): 35–44. Epub 2001/10/12. pmid: 11595755.
40. 39. Франкардо В. Рецептор сигма-1: потенциальная новая мишень для болезни Паркинсона? Исследование нервной регенерации. 2014. 9 (21): 1882–3. Epub 2015/01/06. pmid: 25558236
41. 40. Moon JY, Roh DH, Yoon SY, Choi SR, Kwon SG, Choi HS, et al. Рецепторы sigma1 активируют астроциты посредством фосфорилирования p38 MAPK, что приводит к развитию механической аллодинии на мышиной модели нейропатической боли.Британский журнал фармакологии. 2014. 171 (24): 5881–97. Epub 28.08.2014. pmid: 25158784
42. 41. Малик М., Рангель-Барахас Ч., Сумиен Н., Су Ч., Сингх М., Чен З. и др. Влияние лигандов, селективных к сигма (сигма1) рецепторам, на когнитивные дефициты, вызванные антагонистами мускариновых рецепторов у мышей. Британский журнал фармакологии. 2015. 172 (10): 2519–31. Epub 2015.01.13. pmid: 25573298
43. 42. Чжан Y, Lv X, Bai Y, Zhu X, Wu X, Chao J и др. Участие рецептора сигма-1 в активации астроцитов, индуцированной метамфетамином, через повышающую регуляцию его собственной экспрессии.Журнал нейровоспаления. 2015; 12:29. Epub 2015/04/19. pmid: 25889537
44. 43. Маркевич И., Лукомска Б. Роль астроцитов в физиологии и патологии центральной нервной системы. Acta neurobiologiae experimentalis. 2006. 66 (4): 343–58. Epub 2007/02/03. pmid: 17265695.
45. 44. Кимельберг Х.К., Недергаард М. Функции астроцитов и их потенциал в качестве терапевтических мишеней. Нейротерапия: журнал Американского общества экспериментальной нейротерапии.2010. 7 (4): 338–53. Epub 2010/10/01. pmid: 20880499
46. 45. Ньюман Э.А., Захс К.Р. Модуляция нейрональной активности глиальными клетками сетчатки. Журнал неврологии: официальный журнал Общества неврологии. 1998. 18 (11): 4022–8. Epub 1998/06/06. pmid: 95

47. 46. Шнайдер М., Фухсхофер Р. Роль астроцитов в фиброзе головки зрительного нерва при глаукоме. Экспериментальное глазное исследование. 2016; 142: 49–55. Epub 2015/09/01. pmid: 26321510.
48. 47.Тегерани С., Джонсон Е.К., Сепурна В.О., Моррисон Дж. Астроциты маркируют нитчатый актин и рано переориентируются в головке зрительного нерва на модели глаукомы крысы. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2014; 55 (10): 6945–52. Epub 2014/09/27. pmid: 25257054
49. 48. de Costa BR, Bowen WD, Hellewell SB, Walker JM, Thurkauf A, Jacobson AE и др. Синтез и оценка оптически чистого [3H] — (+) — пентазоцина, высокоэффективного и селективного радиолиганда для сигма-рецепторов. Письма FEBS.1989. 251 (1–2): 53–8. Epub 1989/07/17. pmid: 2568952.
50. 49. Langa F, Codony X, Tovar V, Lavado A, Gimenez E, Cozar P и др. Генерация и фенотипический анализ мышей с нокаутом сигма-рецепторов I типа (сигма 1). Европейский журнал нейробиологии. 2003. 18 (8): 2188–96. Epub 2003/11/19. pmid: 14622179.
51. 50. Куме Т., Нисикава Х., Тагучи Р., Хашино А., Кацуки Х., Канеко С. и др. Антагонизм рецепторов NMDA лигандами сигма-рецепторов ослабляет индуцированную химической ишемией гибель нейронов in vitro.Европейский журнал фармакологии. 2002. 455 (2–3): 91–100. Epub 2002/11/26. pmid: 12445574.
52. 51. Ким Ф.Дж., Шрок Дж. М., Спино С. М., Марино Дж. К., Пастернак Г. В.. Ингибирование роста опухолевых клеток с помощью репрессии трансляции, опосредованной лигандом Sigma1. Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях. 2012. 426 (2): 177–82. Epub 2012/08/29. pmid: 22

    8

53. 52. Do W, Herrera C, Mighty J, Shumskaya M, Redenti SM, Sauane M. Рецептор сигма-1 играет важную роль в индуцированном IL-24 раком апоптозе.Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях. 2013. 439 (2): 215–20. Epub 2013/08/31. pmid: 23988449.
54. 53. Cobos EJ, Entrena JM, Nieto FR, Cendan CM, Del Pozo E. Фармакология и терапевтический потенциал лигандов сигма (1) рецепторов. Современная нейрофармакология. 2008. 6 (4): 344–66. Epub 2009/07/10. pmid: 19587856
55. 54. Хаяши Т., Морис Т., Су Т.П. Передача сигналов Ca (2+) через сигма (1) -рецепторы: новый регуляторный механизм, влияющий на внутриклеточную концентрацию Ca (2+).Журнал фармакологии и экспериментальной терапии. 2000. 293 (3): 788–98. Epub 2000/06/28. pmid: 10869377.
56. 55. Бхат Н.Р., Чжан П. Активация перекисью водорода множественных митоген-активируемых протеинкиназ в клеточной линии олигодендроцитов: роль киназы, регулируемой внеклеточными сигналами, в гибели клеток, индуцированной перекисью водорода. Журнал нейрохимии. 1999. 72 (1): 112–9. Epub 1999/01/14. pmid: 9886061.
57. 56. Каналы С., Касарехос М. Дж., Де Бернардо С., Солано Р. М., Мена Массачусетс.Селективная и стойкая активация протеинкиназы, регулируемой внеклеточными сигналами, оксидом азота в глиальных клетках вызывает дегенерацию нейронов в культурах среднего мозга, обедненных глутатионом. Молекулярная и клеточная нейронауки. 2003. 24 (4): 1012–26. Epub 2003/12/31. pmid: 14697665.
58. 57. Луо Й, ДеФранко ДБ. Противоположные роли ERK1 / 2 в окислительной токсичности нейронов: различные механизмы действия ERK1 / 2 на ранней и поздней фазах окислительного стресса. J Biol Chem. 2006. 281 (24): 16436–42.Epub 2006/04/20. pmid: 16621802.
59. 58. Subramaniam S, Unsicker K. ERK и гибель клеток: ERK1 / 2 в гибели нейронов. Журнал FEBS. 2010. 277 (1): 22–9. Epub 22.10.2009. pmid: 19843173.
60. 59. Дун Й., Тангараджу М., Прасад П., Ганапати В., Смит С.Б. Профилактика эксайтотоксичности в клетках первичного ганглия сетчатки с помощью (+) — пентазоцина, лиганда, специфичного для сигма-рецептора-1. Исследовательская офтальмология и визуализация. 2007. 48 (10): 4785–94. Epub 2007/09/28. pmid: 17898305
61. 60.Уильямс П.А., Марш-Армстронг Н., Хауэлл Г.Р. Нейровоспаление при глаукоме: новая возможность. Экспериментальное глазное исследование. 2017. Epub 2017/03/01. pmid: 28242160.
62. 61. Варгас Дж. Л., Ди Поло А. Нейровоспаление при глаукоме: растворимый фактор некроза опухоли альфа и связь с эксайтотоксическим повреждением. Исследование нервной регенерации. 2016; 11 (3): 424–6. Epub 2016/04/30. pmid: 27127480
63. 62. Ван Л., Прескотт А. Р., Спрус Б. А., Сандерсон Дж., Дункан Г. Антагонисты рецептора сигма подавляют рост клеток хрусталика человека и вызывают пигментацию.Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2005. 46 (4): 1403–8. Epub 2005/03/26. pmid: 157
    .

Афобазол употребляют с алкоголем. Афобазол и алкоголь: совместимость и возможные последствия

Неврозы часто возникают из-за стресса. Это постоянная раздражительность, плохое настроение и самочувствие. Для решения проблемы можно использовать мягкий транквилизатор. Давайте разберемся, можно ли принимать Афобазол с алкоголем, и что происходит в организме при таком взаимодействии.

Кратко о препарате

В жизни бывают разные ситуации. Итак, занервничав, возникают мысли выпить алкоголь, чтобы успокоиться. Но что делать, если успокаивающее лекарство принималось раньше. Чтобы выяснить, можно ли употреблять алкоголь во время приема Афабазола, нужно внимательно изучить аннотацию к лекарству.

Афобазол считается транквилизатором, благотворно влияющим на психику в легких стрессовых ситуациях. Препарат показан к приему в следующих случаях:

• для устранения беспокойства, повышенной возбудимости;
• от бессонницы;
• чувство беспричинного страха;
• для снятия симптомов вегетативного характера при патологиях сердечной мышцы и легких;
• применяется для улучшения концентрации внимания, при забывчивости;
• устраняет симптомы при ПМС у женщин, применяется при климаксе.

Афобазол применяется при алкоголизме, в комплексном лечении наркозависимости. Легкий транквилизатор не вызывает сонливости, общей упадка сил, слабости, не снижает внимания. Поэтому лекарственный состав используют для улучшения концентрации внимания. Лекарство применяется даже при онкологии, астме, нарушениях сердечного ритма.

Среди побочных эффектов препарата, которые длятся длительно, можно выделить такие симптомы, как головная боль, аллергические проявления.

Список противопоказаний невелик.Это весь период беременности и индивидуальная чувствительность организма к активным компонентам лекарственного состава.

Совместимость с алкоголем

Что касается вопроса о том, можно ли сочетать Афобазол с алкоголем, здесь среди специалистов нет единого мнения. В аннотации к препарату нет прямых предупреждений о нежелательной совместимости Афобазола и алкоголя.

Попадая при этом в кровь, активные компоненты транквилизатора не взаимодействуют с этанолом.Нет взаимодействия Афобазола со спиртом и в процессе разложения этанола. Действующие вещества лекарственного состава при выводе из организма выходят в том же составе, в тканях не задерживаются.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ! Для быстрого и надежного избавления от алкоголизма советуют наши читатели. Это естественное средство, которое блокирует тягу к алкоголю, вызывая стойкое отвращение к алкоголю. Кроме того, Alcolock инициирует регенеративные процессы в органах, которые алкоголь начал разрушать.Средство не имеет противопоказаний, эффективность и безопасность препарата доказана клиническими исследованиями в НИИ наркологии.

Когда говорят, совместим ли Афобазол с алкоголем, подразумевают, что такая комбинация не принесет ожидаемого эффекта от приема препарата. Этанол практически полностью притупляет действие активных компонентов транквилизатора.

Так, если лекарство принимается для снятия нервного напряжения при отказе от курения, то совместимость Афобазола с алкоголем может привести к неэффективности применения лекарства.После алкоголя курильщик хочет выкурить сигарету. Эффект от препарата в этот момент будет сведен к нулю.

Если для устранения нервозности принять транквилизатор, то после одновременного приема Афобазола и алкоголя этанол сведет все усилия к минимуму.

При применении препарата в комплексном лечении алкоголиков его действие направлено на снятие стрессовых состояний, вызванных отказом от алкоголя. В какой-то момент пациенту может казаться, что зависимость ушла, и во время лечения он пьет.В этом случае лечение придется возобновить, а Афобазол после алкоголя только поможет уменьшить симптомы депрессивного состояния.

На основании всего сказанного можно сделать вывод, совместимы ли Афобазол и алкоголь. Получается, что прямой опасности от одновременного сочетания не будет, но и от приема препарата не будет. Поэтому не стоит проводить эксперименты, наблюдая за реакцией организма.

Последствия объединения

Несмотря на то, что прямого запрета на сочетание Афобазола с алкоголем нет, так как в процессе использования любого лекарства могут возникнуть нежелательные побочные эффекты.

При одновременном применении Афобазола и алкоголя последствия негативного характера могут проявляться следующим образом:

• если в гинекологии для снятия раздражения применяют транквилизатор, то сочетание Афобазола с алкоголем опасно. Гормональные нарушения могут проявляться двояко. Самым безобидным последствием в этом случае будет отсутствие результата от приема лекарственного состава;
• как упоминалось выше, мягкий транквилизатор применяется при патологиях сердечной мышцы.Если в процессе лечения вы употребляете алкоголь во время приема Афобазола, то на сосуды будет негативное влияние. В результате ухудшится общее самочувствие. Этанол полностью разрушит действие препарата, что может привести к нарушению кровотока. Заболевание может перейти в острое или хроническое течение. То же самое происходит, если препарат назначают для устранения симптомов язвы желудка. Если одновременно пить Афобазол с алкоголем, то течение болезни усугубится дополнительными симптомами, и процесс заживления тканей не произойдет.

Отдельно нужно сказать о последствиях сочетания алкоголя с Афобазолом, когда препарат применяется на фоне алкогольного отравления. Если выпито большое количество алкоголя, вызвавшее отравление, то одновременный прием даже легкого транквилизатора может вызвать осложнения седативного характера.

Осложнение седативного действия — угнетающее действие на нервную систему. Сам этанол вызывает сонливость. Учитывая, что можно сочетать Афобазол с алкоголем, можно получить неконтролируемое состояние, невозможность преодолеть сильную сонливость.Одновременное действие алкоголя и лекарства окажет двойное седативное действие, что впоследствии может привести к различным осложнениям.

Каждый человек должен нести ответственность и принимать независимое решение о том, можно ли принимать афобазол с алкоголем. Отсутствие оговорок в аннотации к препарату не означает, что оба продукта можно сочетать.

Вы все еще считаете, что алкоголизм вылечить невозможно?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки, победа в борьбе с алкоголизмом еще не на вашей стороне…

А закодировать уже думали? Это и понятно, ведь алкоголизм — опасное заболевание, которое приводит к серьезным последствиям: циррозу печени или даже смерти. Боли в печени, похмелье, проблемы со здоровьем, работа, личная жизнь … Все эти проблемы вам знакомы не понаслышке.

а может еще есть способ избавиться от мук? Рекомендуем прочитать статью Елены Малышевой о современных методах лечения алкоголизма …

Лечение стрессовых заболеваний без применения транквилизаторов невозможно.И одним из самых известных и часто используемых препаратов такого рода является Афобазол . Одновременное употребление транквилизаторов и алкоголя в большинстве случаев противопоказано. Однако Афобазол — исключение.

Но вот как правильно пить этот препарат при употреблении алкоголя — чтобы и эффект, и вредные последствия были минимизированы?

Особенности взаимодействия Афобазола и алкоголя

Афобазол назначают пациентам с диагнозом невроз, депрессия и другие состояния, требующие облегчения от тревожного синдрома.

Во время курса лечения данным препаратом не запрещается прием спиртных напитков — Афобазол не усиливает действие спиртосодержащих напитков и не способствует отравлению организма продуктами распада этанола.

Как снять напряжение

К сожалению, в наше неспокойное время невротические заболевания диагностируются как у мужчин, так и у женщин.

Бывают ситуации, к которым организм адаптируется довольно сложно — психика человека, находящегося в постоянном стрессе, потрясена.Чувство тревоги и страха, которое присутствует каждый день, негативно сказывается на его самочувствии и подрывает его здоровье — человеку приходится обращаться за помощью к специалистам.

Транквилизаторы назначают при стойком чувстве беспокойства и при снижении концентрации внимания. Афобазол, оказывая умеренное действие на организм, хорошо переносится большинством пациентов. В аптеках препарат отпускается без рецепта.

Афобазол также принимают в предменструальный период и при лечении заболеваний, снижающих качество жизни человека.Препарат входит в курс терапии онкологических и дерматологических заболеваний. Некоторые пациенты спрашивают — можно ли совмещать прием Афобазола с употреблением алкогольных напитков? Ответ на этот вопрос довольно неоднозначен.

Афобазол: механизм действия препарата

• Действующее вещество Афобазол мягко и успокаивающе действует на центральную нервную систему, снимает симптомы тревоги, плаксивости и раздражительности, снимает нервные спазмы и вегетативные расстройства.

Преимущества афобазола

Афобазол, в отличие от других транквилизаторов:

1. Содержит в своем составе фабомотизол и за счет этого избирательно воздействует на рецепторы головного мозга.
2. Не подавляет деятельность желудочно-кишечного тракта и нервной системы.
3. Способствует выведению токсичных веществ из организма.

Препарат можно принимать в сочетании со многими лекарственными средствами, причем эффект от его приема становится заметным через 5 дней.

Действие алкогольных напитков

Если сравнить ощущения, которые испытывает пациент от употребления алкоголя, с ощущениями, которые он испытывает на начальном этапе лечения Афобазолом, оказывается, что они очень похожи. Уходит тревога, поднимается настроение, наступает полное расслабление.

Однако, если пациент продолжает смешивать наркотик с выпивкой, он становится злым и даже агрессивным.

Лечение гормонального дисбаланса у женщин

Многие женщины с гормональными изменениями употребляют спиртосодержащие напитки для снятия симптомов раздражительности, поднятия настроения и улучшения самочувствия.Этого делать не стоит — содержащийся в спирте этанол отравляет и разрушает организм. И, в первую очередь, поражаются нейроны головного мозга.

Следовательно, изменения, происходящие в эндокринной системе, только усугубляются. Обманчивое расслабление, которое охватывает тело после очередной дозы алкоголя, рано или поздно проходит. Но проблемы остаются.

При наличии гормонального дисбаланса с помощью Афобазола можно нормализовать настроение и избавиться от симптомов вегетативных расстройств.Прием алкоголя в этом случае не принесет организму ощутимого вреда, но эффективность принятого препарата значительно снизится.

Лечение неврозов

Нарушения нервной системы выражаются неврозами. Некоторые люди принимают алкоголь, чтобы расслабиться, снять стресс или избавиться от психоэмоционального напряжения. В состоянии алкогольного опьянения человек немного успокаивается, однако его проблемы не решаются. Человек пьет снова и снова, тем самым отравляя свое тело и усугубляя симптомы невроза, становясь все более злым и агрессивным.

Афобазол при лечении неврозов мягко воздействует на рецепторы головного мозга и стимулирует центральную нервную систему — угнетения мышечной активности и функций организма не наблюдается.

При одновременном приеме Афобазола и алкоголя эффективность препарата снижается. Конечно, такое сочетание не навредит организму. Но и пользы от этого не будет.

Лечение болезней внутренних органов

Этиловый спирт вреден для внутренних органов, в этом нет никаких сомнений.Алкоголь расширяет сосуды и часто становится провокатором внутреннего кровотечения.

После того, как произошло расширение сосудов, следует их резкое сужение и нарушение кровообращения. Алкогольные напитки, принимаемые одновременно с Афобазолом, снижают эффективность препарата и не позволяют добиться высоких результатов в лечении.

• Нарушения в работе сердечно-сосудистой системы.
• Бронхиальная астма.
• Дерматологические болезни.
• Красная волчанка.
• Рак.

Все эти заболевания сопровождаются бронхолегочными и сосудистыми нарушениями — употребление спиртных напитков на фоне лечения Афобазолом приведет к развитию осложнений. Из-за повышенной нагрузки на сосуды опасно принимать это лекарство вместе с алкоголем и при наличии заболеваний желудочно-кишечного тракта. Особенно, если у больного диагностирована язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки.

Не забывайте, что алкоголь имеет огромное количество противопоказаний (в отличие от Афобазола) — чрезмерное пристрастие к алкоголю грозит опасными для здоровья последствиями.

Афобазол и состояние алкогольного опьянения

Афобазол относится к малотоксичным транквилизаторам. Зарегистрировано очень мало случаев передозировки этим препаратом.

Передозировка алкоголем и наркотиками

При многократном превышении дозы Афобазола может возникнуть интоксикация организма.В этом случае побочным эффектом будет седативное осложнение.

Самыми неприятными последствиями передозировки являются:

• Чувство сонливости.
• Нарушение работы центральной нервной системы.

Действие Афобазола и алкоголя в этом случае будет одновременным — ингибирующее действие препарата (при превышении его доз) будет накладываться на аналогичное действие алкогольного напитка. Увеличится токсичность последних, организму будет нанесен непоправимый вред.

Прием афобазола от похмелья

Последствия запоя можно устранить с помощью Афобазола — препарат снимет чувство вины, сопровождающее похмелье, и устранит психологические расстройства.

Однако эффект от препарата будет заметен не ранее, чем через 3-4 дня (и только при регулярном приеме). Но по истечении этого срока симптомы похмелья уже исчезнут сами по себе.

Заключение — Афобазол не поможет избавиться от похмельного синдрома.И это даже не устранит его симптомы. Но, поскольку этот препарат безопасен, принимать его можно — организм к нему не привыкнет. А если отменить препарат, неприятных последствий не будет.

Некоторые врачи прописывают своим пациентам Афобазол, чтобы избавиться от последствий переедания. Однако не забывайте, что препарат не излечит от алкогольной зависимости — такое сложное заболевание требует специализированной терапии.

Кстати, Афобазол довольно эффективно снимает абстинентный синдром.

Специалисты допускают возможность одновременного приема Афобазола и алкоголя. Но лучше не — и лечение будет более эффективным, и организму не придется испытывать негативное воздействие алкоголя.

Прием афобазола при распитии слабоалкогольных напитков

Алкоголь, даже слабый, снижает действие препарата — ни один напиток, содержащий этанол, нельзя сочетать с Афобазолом.

Афобазол и пиво не подходят!

В безалкогольном пиве содержание алкоголя минимальное — не более 1%.Употребление этого напитка не влияет на эффективность Афобазола — врачи не запрещают пить безалкогольное пиво и лечиться Афобазолом.

Но это не касается обычного пива, а также слабоалкогольных напитков и коктейлей — при прохождении лечения Афобазолом от них нужно отказаться.

Как правильно разделить прием афобазола и употребление алкоголя

Следует полностью исключить употребление алкоголя в процессе лечения Афобазолом.В противном случае желаемый лечебный эффект не будет достигнут.

На протяжении всего периода лечения препаратом нужно помнить, что:

• Афобазол пейте только в трезвом состоянии.
• После употребления спиртосодержащих напитков Афобазол можно принимать только после полного выведения этанола из организма. Продолжительность периода «ожидания» напрямую зависит от крепости алкоголя и от его дозы. Если напиток получился крепким, Афобазол нужно пить не ранее 1.5 дней спустя.
• Употреблять алкоголь можно не ранее, чем через 2 недели после завершения курса приема Афобазола.

При однократном нарушении правил приема Афобазола (относительно спиртных напитков) вред для организма будет минимальным. Однако не стоит искушать судьбу — Афобазол и алкоголь несовместимы.

При назначении седативных средств врачи рекомендуют своим пациентам воздерживаться от употребления алкоголя. Следует ли следовать этому совету, если прописано анксиолитическое средство последнего поколения? В народе бытует мнение, что афобазол и алкоголь совместимы, правда ли это?

Препарат назначают при нарушениях концентрации внимания, нарушениях сна, тревожности и некоторых других проблемах.Препарат не вызывает привыкания, побочные эффекты возникают крайне редко. Для достижения терапевтического эффекта необходим курс лечения.

Совместимость

Теоретически можно принимать афобазол и алкоголь одновременно. В отличие от многих аналогов, данный препарат никак не взаимодействует напрямую с этиловым спиртом. Лекарство не оказывает седативного действия. Препарат активизирует нервную систему, помогая ей самостоятельно справиться с чрезмерным стрессом.

Многих пациентов беспокоит вопрос: «Насколько совместимы афобазол и алкоголь?» А какова нормальная реакция организма на разовое употребление? При приеме правильно рассчитанной дозы не следует ожидать таких неприятных эффектов, как: сонливость, снижение работоспособности и быстрое опьянение от малых доз алкоголя.

Можно принимать афобазол вместе с алкоголем, вопрос в том, как часто и в каких дозах? Проблема совместимости основного действующего элемента препарата — бензимидазола и алкоголя — в том, что одно вещество подавляет действие другого. Алкогольные напитки угнетают нервную систему, а наркотики ее стимулируют. Не стоит во время лечения увлекаться употреблением алкоголя. Употребление витаминизированных напитков отрицательно скажется на лечебном процессе. В этом случае действие алкоголя не будет удовлетворительным.

Допускается употребление небольшой дозы напитков со степенью в особых ситуациях с хорошим перекусом. В этом случае не следует прерывать прием афобазола. Если пациент любит пить для удовольствия и расслабления, ему имеет смысл пересмотреть свои привычки, по крайней мере, во время курса лечения.

Эффекты

Производитель продукта заявляет о совместимости афобазола и алкоголя в инструкции по применению. Этот совет не является руководством к регулярному и бесконтрольному употреблению алкоголя.При таком поведении нельзя ожидать эффекта от препарата. Часто этот препарат назначают как дополнение к наркотическим средствам или. Клинически доказано, что терапевтический эффект от приема этого препарата заключается в уменьшении тяги к алкоголю.

Для эффективного лечения алкоголизма специалисты советуют средство «АлкоЛок» … Этот препарат:

Устраняет тягу к алкоголю

Восстанавливает поврежденные клетки печени

Выводит токсины из организма

Успокаивает нервную систему

Не имеет вкуса или запах

Содержит натуральные ингредиенты и полностью безопасен

AlcoLock имеет доказательную базу, основанную на многочисленных клинических исследованиях.Средство не имеет противопоказаний и побочных действий.

Пациент может проконсультироваться с лечащим врачом, совместим ли афобазол с алкоголем конкретно в его случаях. Если есть хронические заболевания и серьезные нарушения функционирования нервной системы, вызванные регулярным злоупотреблением алкоголем, необходимо прекратить дальнейшее употребление спиртных напитков. При отсутствии серьезных проблем со здоровьем разрешается немного выпить во время курса лечения.

Афобазол и алкоголь, совместимость которых небезопасна для здоровья, употреблять одновременно категорически нельзя, хотя в инструкции указано, что действующее вещество не вступает в реакцию с этиловым спиртом и не усиливает его действие.

Для чего нужен афобазол и как он действует

Афобазол — селективный антифобный препарат транквилизирующего действия. Принимается при нервозности, стрессе, страхе, бессоннице. Основным компонентом и действующим веществом является фабомотизол, действующий на бензодиазепиновые рецепторы головного мозга.

Как действует Афобазол? Препарат обладает мягким возбуждающим и антистрессорным действием. Использование средства положительно влияет на настроение, повышая его, снимает стресс. Этанол — депрессант, который действует по-разному.

Вещества противоположны по своему действию, но при употреблении малых доз алкоголя и одновременном приеме терапевтических доз препарата они не будут взаимодействовать друг с другом. Но это не значит, что можно совмещать прием Афобазола и алкоголя.

Афобазол разрешен для управления транспортными средствами. Не влияет на внимание и концентрацию, не вызывает сонливости, устраняет нервозность, расслабляет и снижает агрессию.

Сколько нужно выпить препарат, чтобы получить положительный результат? Эффект от препарата наступает к концу первой недели, максимальный результат достигается в течение месяца. Курс лечения зависит от состояния организма пациента, тяжести заболевания и составляет от 2 до 4 недель.Положительный эффект сохраняется 1-2 недели. Максимальный срок лечения может составлять 3 месяца, не более.

Свойства афобазола и спирта

Активный компонент препарата фабомотизол обладает нейропротекторными свойствами:

1. Предотвращает повреждение нейронов.
2. Увеличивает взаимодействие нейронов друг с другом.
3. Повышает скорость передачи импульса по нервным волокнам.

Этиловый спирт и его метаболиты, такие как ацетальдегид, нарушают структуру и целостность мембран нервных клеток, а клетки головного мозга разрушаются.В этом случае не имеет значения количество выпитого алкоголя.

Когда алкоголь уже попал в кровоток, нет сомнений в том, что он легко пройдет через гематоэнцефалический барьер, попадет в мозг и начнет разрушать здоровые клетки мозга.

Можно ли принимать Афобазол с алкоголем? Абсолютно противоположные способы воздействия этанола и афобазола на нейроны не влияют друг на друга, однако при некоторых заболеваниях деструктивное действие алкоголя нейтрализует нейропротекторное действие препарата.

Заболевания внутренних органов и систем

Часто Афобазол применяется женщинами для снятия предменструального раздражающего синдрома, для уменьшения вегетативных расстройств в период менопаузы. Средство оказывает успокаивающее действие, устраняет раздражение, улучшая сон, настроение и работоспособность. Если женщина употребляла алкоголь, то действие лекарства может исчезнуть, а симптомы вернутся.

Этанол влияет на части мозга, отвечающие за гормональный баланс в организме, и состояние гормонов ухудшается.Алкоголь в организме женщины провоцирует нарушения в эндокринной системе женщины.

Алкогольные напитки подавляют действие лекарства и делают его бесполезным. Не стоит увлекаться алкоголем во время терапии гормональных нарушений.

При заболеваниях сердечно-сосудистой системы сочетание наркотиков и алкоголя отрицательно влияет на сердце и сосуды. Афобазол применяется для лечения бронхиальной астмы, системной красной волчанки, для борьбы с проблемами в дерматологии и онкологии.Препарат эффективен в комплексном лечении ишемической болезни сердца, аритмий, повышенного артериального давления.

Отсюда следует, что активный компонент положительно влияет на сосуды и мышцы, при этом улучшается кровообращение, ткани насыщаются кислородом. А если использовать этанол, то эффект полностью пропадает. Как только алкоголь попадает в организм, сосуды резко расширяются, а затем внезапно сужаются, при этом сильно нарушается кровообращение, от этого ткани страдают кислородным голоданием и недостатком питания.

Одновременное употребление алкоголя и Афобазола отрицательно влияет на пораженные органы сердечно-сосудистой системы, бронхи и легкие.

Смешивание наркотиков и алкоголя также плохо для людей, страдающих заболеваниями нервной системы. Обостряются невротические состояния. Первые ощущения после употребления спиртных напитков кажутся только положительными: уходит депрессия, устраняются беспокойство и переживания, понимается настроение, наступает расслабление. Но этого эффекта не происходит, потому что клеткам помогли добиться этого; такие ощущения возникают из-за гибели нервных клеток, разрушения связи между ними, торможения нервной работы мозга.

Оправданным состоянием после беззаботного веселья будет пьянство, похмелье, при котором отходы в виде мертвых нервных клеток будут выводиться вместе с мочой.

Все следующие изменения характера и поведения человека, а именно раздражительность, вспыльчивость, негодование, неконтролируемая агрессия, являются результатом разрушающего мозг действия алкогольных напитков.

А Афобазол положительно действует на нейроны, стимулируя их работу, уменьшая проявление стресса.

Совместное применение Афобазола и алкоголя полностью блокирует действие препарата.

Комбинация алкоголя с афобазолом при лечении язв желудка и двенадцатиперстной кишки также не дает хороших результатов. Эти заболевания гораздо эффективнее излечиваются при нормальном кровоснабжении этих участков. Этанол сначала расслабляет мускулатуру сосудов, что увеличивает риск кровотечения на пораженных участках, а затем резко их тонизирует. Такие изменения не способствуют быстрому заживлению язв.Совместное употребление алкоголя и наркотиков не приводит к положительной динамике.

Как правильно распивать алкоголь во время приема продукта?

Если случится так, что во время лечения Афобазолом вам захочется немного выпить на отдыхе, нужно знать, как пить, через какое время и когда это можно сделать наиболее безопасно:

1. Можно принимать препарат 8 часов перед употреблением алкоголя для мужчин.
2. Для женщин можно за 12 часов до приема алкоголя.
3. Через 6 часов после попадания алкоголя в организм мужчины.
4. Через 9 часов после того, как этанол попал в кровоток женщины.

Во время лечения лучше вообще отказаться от алкоголя.

Передозировка и побочные эффекты

Передозировка Афобазолом маловероятна, поскольку это нетоксичный препарат. Поэтому случаи передозировки редки и проявляются сонливостью, торможением реакций.

Избыточное количество афобазола в крови приводит к угнетению нервной системы. А если к этому состоянию добавить небольшое количество алкоголя, то их разрушительное действие взаимно усиливается.Смерть может наступить как один из побочных эффектов.

Ни в коем случае нельзя совмещать прием алкоголя и лечение Афобазолом. В противном случае лечебный эффект пропадает. Опыт и отзывы врачей свидетельствуют о том, что такие сочетания губительно действуют на нервную систему, в некоторых случаях опасны для жизни.

Если я выпью лекарство и выпил немного алкоголя, что мне делать? При нарушении рекомендаций необходимо сделать следующее:

1. Немедленно прекратить употребление алкоголя.
2. В следующие 4 часа постарайтесь выпить как можно больше воды.
3. Ознакомьтесь с пунктом «Противопоказания» в инструкции к препарату и следуйте рекомендациям.
4. Если это успокаивающее средство принималось курсом, то этанол нельзя принимать от 3 дней до 1 месяца.
5. Обратитесь к врачу для получения дополнительной информации.

Согласно исследованиям наркологов, Афобазол для пациентов с алкогольной зависимостью очень эффективен в отношении таких симптомов, как похмелье, потоотделение, жажда, тремор и беспокойство.Еще лекарство помогает быстро избавиться от привычки курить, подавляя беспокойство, не провоцирует слабость, вялость, вялость.

Афобазол относится к группе психотропных препаратов. Его действие направлено на подавление стрессов и нервных расстройств, в том числе при отказе от алкогольной и табачной зависимости. Седативный эффект препарата не угнетает работу нервной системы. Напротив, алкоголь при длительном употреблении вызывает агрессию и раздражительность. Совместное употребление транквилизаторов и алкоголя может привести к нарушению работы центральной нервной системы и мозга.

Банка Афобазол спирт

Производители препарата в инструкции по применению указали, что он не усиливает действие алкоголя на организм. Афобазол показан к применению в следующих условиях:

• нарушения сна;
• адаптивный стресс при переезде, смене места работы;
• изменения гормонального фона;
• тяжелое течение предменструального синдрома;
• Повышенная раздражительность при отказе от сигарет.

Дополнительно препарат назначают для лечения заболеваний внутренних органов, кожи и онкологии.Препарат можно принимать людям старше 18 лет. Исключение составляют женщины во время беременности и кормления грудью.

Совместимость Афобазола и этилового спирта позволяет применять препарат для нормализации работы нервной системы на этапе отказа от алкогольной зависимости. Он не избавляет от запоя, а только снимает симптомы воздействия на нервную систему, от которой страдает организм. Алкогольные напитки отравляют нервные клетки, вызывая агрессию. Одновременный прием с Афобазолом не приносит терапевтического эффекта, а в больших дозах усугубляет симптомы.

Врачи, проводившие исследования удовлетворенности пациентов действием Афобазола, отмечают, что только каждый десятый почувствовал эффект. Низкая эффективность позволила распространить мнение, что препарат помогает только предполагаемым людям, но на самом деле не имеет терапевтического эффекта.

С неврозами

Невроз — заболевание центральной нервной системы. Это может быть вызвано длительным стрессом, трагическим событием и перенапряжением. Проявления болезни — резкие перепады настроения, эмоциональные срывы, появление страхов.

Попытки облегчить симптомы с помощью алкоголя имеют временный эффект. Человек чувствует улучшение настроения, исчезает раздражительность. Увеличение дозы алкоголя снижает работоспособность нервной системы и приводит к обострению неврозов.

Афобазол мягко действует на мозг и центральную нервную систему, питая их клетки. У человека улучшается настроение, снижается раздражительность, повышается работоспособность. Из-за противоположного действия Афобазол нельзя принимать одновременно с алкоголем.Последствия проявляются в снижении действия препарата и обострении течения болезни.

С болезнями внутренних органов

При заболеваниях, которые периодически обостряются, человек принимает лекарства и посещает врачей. Это влияет на его настроение и поведение. Особенно сложно это делать тем, у кого диагностировали рак. Люди впадают в депрессию и не знают, что делать дальше.

При длительном лечении Афобазол назначают в качестве дополнительной терапии.Нормальное функционирование нервной системы положительно сказывается на течении болезни, приближая ремиссию. Во время лечения любыми препаратами обычно противопоказан алкоголь, который несет дополнительную нагрузку на печень.

При сердечных заболеваниях важно правильное функционирование системы кровообращения. Афобазол, выравнивая стенки сосудов, улучшает кровообращение. Этанол при попадании в организм оказывает резкое действие: сильное расширение и быстрое сужение сосудов.В результате нарушается кровоток, ухудшается самочувствие.

Из-за прямого противодействия употребление алкоголя при применении Афобазола не рекомендуется. Помимо отсутствия должного эффекта возможно обострение симптомов заболевания: повышение артериального давления, сердечная недостаточность, внутреннее кровотечение при язве желудка и другие.

Гормональные нарушения

Алкоголь действует на клетки мозга, а это значит, что он может повлиять на любую систему организма.При изменении гормонального фона женщинам присущи нервозность, резкие перепады настроения, повышенный аппетит. Алкоголь их успокаивает лишь на время.

Афобазол, напротив, устраняет неблагоприятные симптомы и улучшает настроение. Одновременный прием препарата и алкоголя снижает терапевтический эффект. После вывода этанола из организма четко проявляются сбои в работе эндокринной системы, возможны осложнения.

Интоксикация и афобазол

Многие пациенты, не видя ограничений на употребление алкоголя в аннотации к препарату, считают, что они могут пить.Любая доза алкоголя убивает клетки мозга и нервной системы. Алкоголь снижает эффективность Афобазола, после чего симптомы, которые следовало прекратить, усугубляются. Самовольное увеличение дозы препарата может привести к передозировке, проявлениями которой являются:

• сонливость;
• медленная реакция на внешние раздражители;
• интоксикация организма.

Афобазол и алкоголь пить нельзя, за исключением отсутствия терапевтического эффекта, возможно усугубление симптомов, в редких случаях приводящее к летальному исходу.Если у пациента запланировано застолье, то лучше проконсультироваться с лечащим врачом о возможности употребления алкоголя и последствиях.

Похмелье и действие алкоголя

Афобазол назначают для облегчения последствий длительного употребления алкоголя: психических расстройств, депрессии и беспокойства. Желаемый эффект наступает через 72-96 часов после начала терапии. К этому времени симптомы похмелья пройдут сами по себе.

Несмотря на то, что Афобазол совместим с алкоголем по инструкции, при похмелье он не окажет быстрого действия.Препарат снимает симптомы дисфункции нервной системы при полном отказе от алкоголя — при абстинентном синдроме. Транквилизатор действует на организм постепенно, нормализуя его работу. Расслабляющий эффект алкоголя временный, он замедляет работу систем организма. При алкоголизме лечение Афобазолом бессмысленно.

Афобазол и пиво

Спирт любой крепости содержит этанол. Попадая в организм, он снимает тревожные и депрессивные состояния, воздействуя на нервные клетки, но при повышении дозы тормозит работу.Отмирают нервные и мозговые клетки, организм подвергается воздействию продуктов распада алкоголя.

Врачи не рекомендуют употреблять слабоалкогольные напитки во время курса лечения транквилизаторами и как минимум через 72 часа после его окончания. Исключение составляет безалкогольное пиво, содержание этанола в котором менее 1%. Его совместное применение с транквилизатором не снизит эффективность терапии и не вызовет осложнения симптомов.

Правила использования

Афобазол продается в аптеках без рецепта, поскольку он не токсичен для организма.При самолечении учитываются основные моменты инструкции по применению:

1. Курс лечения от 14 до 30 дней, увеличение до 90 по согласованию с врачом.
2. Нельзя принимать более 1 таблетки за раз, более 3 в день.
3. Возможны аллергические реакции и головные боли, которые появляются редко.

Врачи рекомендуют избегать употребления алкоголя в начале приема Афобазола и в течение месяца после его окончания.Препарат обладает способностью выводить токсины, а при попадании в организм снижает всасывание продуктов распада алкоголя. В случаях, когда человек пил алкоголь и почувствовал недомогание во время приема транквилизатора, необходимо:

1. Отказаться от дальнейшего употребления алкоголя.
2. Выпейте больше жидкости в течение 4 часов.
3. Обратитесь за медицинской помощью, но не увеличивайте дозу самостоятельно.

Порок сердца является противопоказанием для взаимодействия алкоголя и наркотиков.Нарушение кровотока может привести к осложнениям течения болезни.

отзывов, инструкция по применению, аналоги

В данной статье будут представлены приложение, отзывы и аналоги Афобазола. Это препарат из группы транквилизаторов, обладающий умеренным активирующим действием в сочетании со снятием тревоги. Обладает очень мягким действием. Он не вызывает развития лекарственной зависимости и не провоцирует абстинентный синдром после прекращения его приема.Представленный препарат применяется для лечения тревожности у взрослых, которая вызвана различными факторами, например, предстоящей операцией, стрессом, психическими расстройствами, неврастенией, нарушением адаптации и так далее.

Отзывов об «Афобазоле» много.

Состав препарата

Выпускается только в форме таблеток для приема внутрь. Таблетки имеют плоскоцилиндрическую форму со скосом. Афобазол продается в картонных упаковках и в стеклянных банках.В качестве действующего вещества препарат содержит фабомотизол в количестве от 5 до 10 миллиграммов в одной таблетке. Таблетки, имеющие дозировку 5 миллиграммов, получили название «Афобазол 5». Препарат дозировкой 10 миллиграммов — «Афобазол 10». В качестве вспомогательных веществ в состав препарата входят следующие компоненты:

• крахмал картофельный;
• стеарат магния;
• моногидрат лактозы;
• целлюлоза микрокристаллическая.

Показания к применению

«Афобазол» принимается с целью купирования тревожности, которая связана со следующими состояниями:

1. Отказ человека от вредной привычки курить.Специально для людей с большим стажем курения.
2. Развитие генерализованного тревожного расстройства.
3. Развитие неврастении с нарушением адаптации.
4. Наличие хронического соматического заболевания, протекающего с чередованием припадков и периодов покоя, доставляющее человеку чувство беспомощности и смертельную опасность. Например, речь идет о бронхиальной астме, синдроме раздраженного кишечника, ишемической болезни сердца, гипертонии, аритмии, системной красной волчанке и так далее.
5. Наличие онкологических заболеваний.
6. Дерматологические патологии, вызывающие у него чувство страха, беспокойства, осознание собственной неполноценности и другие подобные чувства, заставляющие его сомневаться в возможности нахождения в обществе. Например, подобное может случиться при псориазе, депривации и так далее.
7. Развитие бессонницы на фоне повышенной тревожности.
8. Развитие нейроциркуляторной дистонии.
9. Наличие предменструального синдрома.
10. Состояние отмены алкоголя.

По отзывам, Афобазол особенно эффективен при снятии тревоги при заболеваниях сердца и сосудов, а кроме того, при предменструальном синдроме и нейроциркуляторной дистонии. Согласно исследованиям ученых, этот препарат считается оптимальным вариантом, помогающим снять депрессию, беспокойство, плаксивость и депрессию, что характерно для людей, страдающих сердечными заболеваниями.

Отзывы о применении «Афобазола» подтверждены.

Инструкция

Таблетки принимают сразу в полной дозировке.Нельзя увеличивать дозу постепенно, поскольку они обладают мягким действием, из-за чего организму не требуется времени, чтобы привыкнуть к препарату. Кроме того, можно резко прекратить прием Афобазола. Также нет необходимости постепенно снижать дозировку с целью последующей отмены препарата. У этого препарата нет синдрома отмены.

Возможность резко прервать прием средства в любое время объясняется тем, что оно не провоцирует у людей лекарственной зависимости, а значит, не вызывает синдрома отмены, который крайне трудно переносить, являясь настоящим бичом транквилизаторы.

Возможность сразу начать прием препарата в необходимой дозировке с одношаговым прекращением делает его очень простым и к тому же доступным в использовании. Нет необходимости сначала увеличивать дозу препарата до необходимой в течение трех недель, а после окончания курса лечения также постепенно снижать ее, чтобы отменить.

Согласно отзывам и инструкции к «Афобазолу» простота использования препарата дает возможность принимать его в пробном режиме: выпить таблетки пять недель, дождаться появления полного эффекта, а затем оценить, подходит ли средство для длительного применения. лично конкретного пациента.Если подходит, можно и дальше принимать. Но если нет, вам придется прекратить прием в тот же день, перейдя на другие лекарства.

В рамках перехода с Афобазола на другие препараты важно помнить, что его действие длится две недели. Чтобы избежать нежелательных реакций организма, рекомендуется начать прием другого препарата через две недели после отмены первого.

Физическая зависимость у человека возникает при систематическом приеме определенных лекарств, которые напрямую влияют на нервную систему, ускоряя работу ее клеток.Со временем предыдущей дозы для достижения результата не хватит, количество препарата необходимо увеличить. Без приема лекарства нервная система не выполняет свои функции. Большинство транквилизаторов вызывают физическую зависимость. Это связано с привыканием нервной системы к действию лекарственного вещества.

Это подтверждается инструкцией к «Афобазолу» и отзывами врачей.

Как только прекращается прием, может развиться абстинентный синдром Что это значит? Человек хочет продолжить терапию.Такие ощущения бывают при отказе от курения, только они еще сильнее. Бензодиазепины провоцируют симптомы сонливости, при этом снимается тревога, наступает спокойствие и устраняются эпилептические припадки. Но из-за расслабления гладкой мускулатуры ухудшается работа сердца, сосудов, желудочно-кишечного тракта и других органов. Эта группа средств вызывает физическую зависимость.

Как мне принимать Афобазол?

Это средство следует принимать после еды. Его нужно глотать целиком, нельзя жевать и прорваться.Таблетку следует запивать обычной водой без газа.

Оптимально применять лекарство по 10млн 3 раза в сутки, соблюдая примерно равные интервалы между приемами. При таком режиме приема разовая норма составляет 10 миллиграммов, а суточная — 30. Продолжительность стандартного лечения обычно составляет две-четыре недели, после чего необходимо прекратить прием препарата. Спустя четыре недели можно снова пройти курс терапии Афобазолом. Отзывы пациентов рассмотрим в конце статьи.

При необходимости и исключительно под контролем лечащего врача допускается увеличение дозировки препарата до 20 миллиграммов трижды в сутки, а продолжительность непрерывного лечения — до трех месяцев. Однако любое увеличение дозировки более чем на 10 миллиграммов, наряду с продолжительностью приема более четырех недель, следует проводить только после консультации с врачом. Следует учитывать, что Афобазол можно применять повторными курсами, но важно соблюдать между ними интервал не менее четырех недель.

Побочные действия на фоне приема препарата

Согласно отзывам о «Афобазоле», в рамках вероятных побочных эффектов препарат может спровоцировать различные аллергические явления, а также головную боль, которая обычно проходит сама собой. , не требуя специального лечения.

Некоторые люди могут заметить возникновение выраженного сексуального влечения через несколько дней после начала приема средств. Подобный эффект врача с учеными не отнесен к побочным эффектам, а связан со снятием стресса, а кроме того, с снятием тревоги.

Противопоказания к применению

Представленный препарат противопоказан пациентам со следующими заболеваниями:

1. Наличие индивидуальной гиперчувствительности или непереносимости компонентов препарата.
2. Непереносимость человеческой галактозы.
3. Появление лактазной недостаточности.
4. Мальабсорбция глюкозы и галактозы.
5. Беременность и период кормления грудных детей.
6. Возраст пациента менее восемнадцати лет.

Аналоги лекарств

На фармацевтическом рынке это лекарство имеет аналоги, а также препараты-синонимы. Однако синонимом является только один препарат под названием нейрофазол. Этот синоним содержит тот же активный компонент, что и Афобазол. Но «Нейрофазол» применяется в виде капельниц для внутривенного введения, что делает его применение недостаточно удобным, а потому ограниченным. По своей сути Нейрофазол предназначен исключительно для использования в специализированных отделениях медицинских учреждений, а Афобазол можно применять самостоятельно дома или на работе.Инструкции и отзывы подтверждают это.

Помимо этого синонима существуют препараты-аналоги, содержащие другие действующие вещества, но с максимально похожим действием, направленные на борьбу с чувством тревоги. Итак, сегодня к аналогам Афобазола относятся транквилизаторы: Адаптол, Диваза, Ноофен, Мебикс, Стрезам, Тенотен, Фезанефе, Фензитат, Эльзепам и другие препараты.

Какое средство считается лучше Афобазола?

В медицинской практике понятие не используется.«Лучший препарат» врачи предпочитают использовать термин «оптимальный». Дело в том, что для каждого конкретного человека в той или иной ситуации лучше всего подходят один, максимум два. Это те препараты, которые наиболее эффективны в той или иной ситуации и считаются оптимальными.

Важно понимать, что оптимальными лекарствами для каждого человека будут разные лекарства. Более того, даже для одного и того же пациента в разных ситуациях оптимальными могут быть разные препараты. Таким образом, подсчитать два «лучших» препарата, которые идеально подошли бы всем без исключения, при любой форме и варианте тревожности, просто невозможно.Поэтому для кого-то «Афобазол» будет лучшим средством, а кому-то понадобится другой препарат, который для него и будет идеальным вариантом.

Согласно отзывам и инструкции по применению, «Афобазол» является умеренно эффективным анксиолитиком, помогающим многим хорошо снять тревогу. Правда, некоторые пациенты отмечают, что им его эффекта недостаточно, так как тревога не прекращается, а эмоциональное состояние не приближается к необходимому. Эта категория пациентов предпочитает использовать анксиолитики с более сильным успокаивающим действием.Эти препараты включают следующие препараты: феназепам, диазепам и лоразепам.

Вышеуказанные транквилизаторы относят также к бензодиазепинам, которые обладают выраженным противотревожным действием, которое, однако, сочетается с чувством сонливости, вялости и депрессии, отсутствующим у Афобазола. Именно о таких мощных транквилизаторах обычно ходят слухи, что они вводят человека в «овощное» состояние, при котором при тревоге исчезает желание что-то делать. Следующие препараты занимают промежуточное положение между мощными бензодиазепиновыми препаратами и афобазолом по интенсивности успокаивающего действия: хлордиазепоксид, гидазепам и оксазепам.

Среди перечисленных лекарств, часто используемых для снятия беспокойства, используется Гидазепам, который многими считается лучшим по сравнению с Афобазолом. Помимо этих лекарств, существует довольно большое количество препаратов, обладающих успокаивающим действием, но, как уже сообщалось, «лучший» препарат следует подбирать индивидуально.

Что предпочесть: «Афобазол», «Персену» или «Новопасситу»?

«Персен» с «Новопасситом» — успокаивающие средства природного происхождения с практически идентичным спектром терапевтического действия.Они предназначены для снятия тревожности, а кроме того, чувства тревоги и других исключительно психологически неприятных симптомов с проявлениями, которые связаны с повышенной тревожностью.

«Афобазол» — препарат, предназначенный для снятия сильной тревоги, а также связанных с ней неприятных психологических симптомов и соматических проявлений, например скачков и биений давления при учащенном сердцебиении и так далее.

Таким образом, «Персен» с «Новопасситом» снимает только психологический дискомфорт, а «Афобазол» дополнительно устраняет соматические проявления, связанные с повышенной тревожностью.Кроме того, Афобазол умеренно активизирует деятельность нервной системы, улучшает память и внимание, практически не вызывая сонливости.

«Персен» с «Новопасситом» можно рекомендовать к применению только в целях успокоения, когда человек страдает страхом, тревогой, напряжением и другими психологическими симптомами нервозности, не связанными с соматическими проявлениями. «Афобазол» рекомендуется применять не только при психологических симптомах повышенной тревожности, но и на фоне соматических проявлений этого состояния, например, при потливости, учащенном сердцебиении, экстрасистолии, скачках артериального давления и так далее.

Такие выводы можно сделать на основании отзывов об Афобазоле. В инструкции по применению указано, что препарат не вызывает у пациентов сонливости, умеренно активизируя нервную систему, поэтому препарат можно смело принимать людям, желающим вести активный образ жизни, водить транспортное средство и конструктивно вести переговоры, решая сложные проблемы. На фоне досадных проблем препарат позволяет человеку не «взорваться» по разным вопросам и причинам. «Персен» с «Новопасситом» не подходят для решения подобных задач, так как они только успокаивают, а не решают никаких проблем.

Выбор между «Тенотеном» и «Афобазолом»

Препарат «Тенотен» седативный препарат с успокаивающим действием. Афобазол — препарат исключительно против тревожности. Это означает, что «Тенотен» может обладать более выраженным противотревожным и, кроме того, седативным действием. Этот аналог может помочь при тревоге, которая сочетается с депрессией. «Афобазол» с комбинацией «тревога» плюс «депрессия» будет неэффективен, так как не имеет необходимых эффектов для лечения состояния.Также имеются отзывы об аналогах «Афобазола».

Кроме того, «Тенотен» отличается немедленным действием, в связи с чем его можно использовать изредка, когда возникает необходимость. А эффект от «Афобазола» может развиться только через неделю применения. Этот препарат предназначен для прохождения курса лечения. Именно по этой причине не удастся применить его от случая к случаю, когда человеку нужно быстро успокоиться и сбросить тревогу на определенное время, пока сложная ситуация не нормализуется.

Также многие отмечают, что «Афобазол» может спровоцировать сонливость, чего «Тенотена» не наблюдается совсем. В связи с этим при необходимости рекомендуется время от времени использовать «Тенотен» в исправной форме. Недостаток — более высокая цена.

Отзывы о применении «Афобазола» представлены ниже.

Отзывы

Отзывы об этом препарате очень неоднозначны: около двух третей из них положительные, а треть — отрицательные. В положительных комментариях люди, принимавшие этот препарат, отмечают, что он им очень помог справиться с наступившей депрессией, которая сопровождалась сильной тревогой, связанной с тяжелыми жизненными обстоятельствами.Также люди пишут, что препарат помог избавиться от нервозности и постоянного беспокойства окружающим. Отзывы о препарате «Афобазол» этим не ограничиваются.

Люди в своих комментариях говорят, что они стали намного спокойнее реагировать на многие надоедливые вещи, перестали кричать и спотыкаться, пытаться обдумывать, а кроме того, конструктивно решать ту или иную проблему.

Какие еще отзывы отзывы о «Афобазоле»?

Некоторые пациенты отмечают, что этот препарат сделал их намного более уравновешенными, устранил уязвимость с плаксивостью и способностью принимать все слишком близко к сердцу.Благодаря действию таблеток Афобазол, по мнению получателей, приобретается уверенность в себе и своих силах, а также нормальное и спокойное отношение к многочисленным жизненным проблемам и заботам.

Отрицательные отзывы в основном связаны со следующими двумя факторами:

1. Неэффективность препарата в конкретных ситуациях.
2. Развитие тяжело переносимых побочных эффектов вынуждает прекратить терапию.

По словам пациентов, «Афобазол» в некоторых из них не улучшил состояние и не снял тревогу настолько, чтобы стало комфортно, что, конечно, вызвало большое разочарование и отрицательные отзывы.

У остальных препарат спровоцировал появление дневной сонливости, что вынудило их прекратить курс препарата из-за невозможности продолжить работу. Есть отзывы, в которых пациенты, ранее принимавшие сильнодействующие анксиолитики из категории бензодиазепинов, сообщают, что, на первый взгляд, описываемый препарат не оказывает никакого действия по сравнению с ними. Это подтверждают многочисленные отзывы пациентов, принимавших Афобазол.

Правда, эти же люди говорят, что впечатление складывается после недавнего прекращения приема препаратов-бензодиазепинов, так как эти средства настолько мощные, что на их фоне просто теряется эффект.В том случае, если начать прием Афобазола за два месяца до отмены бензодиазепинов, его эффект вполне ощущается, он нормальный, так как тревога устраняется не хуже, а состояние безразличия ко всему не появляется.

Отзывы врачей о препарате

Перед применением следует посетить медицинское учреждение, а не просто изучить инструкцию по применению.

Отзывы врачей об Афобазоле также довольно неоднозначны, так как одни считают его плацебо, что совершенно неэффективно, а другие — вполне нормальным средством, обладающим мягким действием и хорошо подходящим людям, не имеющим тяжелых или глубоких расстройств. .

Среди этих двух противоположных категорий нет точек контакта для врачей, поскольку те, кто рассматривает препарат плацебо, не хотят видеть примеры, в которых препарат эффективно помогал. Такая группа экспертов считает, что если препарат подходит только шестидесяти процентам людей, то его нельзя считать хорошим лекарством. Хорошими средствами врачи с аналогичной позицией включают бензодиазепины, которые надежно снимают тревогу у всех пациентов, но вызывают массу побочных эффектов. Кстати, среди этих эффектов основная проблема — бензодиазепиновая зависимость.Вторая группа врачей считает достойными препараты, помогающие достаточно большому количеству пациентов.

Это отзывы людей после применения «Афобазола».